Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ｂｌｏｃｋｓ法による高効率多重遺伝子サイレンシング系の確立

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24658040
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 植物病理学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 中屋敷 均 神戸大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (50252804)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: いもち病菌 / 細胞壁分解酵素 / RNAi

研究概要

ポストゲノム時代の逆遺伝学的なアプローチにおける技術的問題の一つは、機能的に重複を持つファミリー遺伝子の機能解析である。本研究では、この問題を解決するために、40-60bp程度のターゲット配列を複数個タンデムにつなげた合成DNAをトリガー配列としたRNAiであるBuilding Blocks法を開発し、その適用を試みた。その結果、植物細胞壁構成成分であるキシロースやセルロースの分解酵素であるキシラナーゼやセルラーゼファミリーに属する約１０個の遺伝子を効率的にノックダウンすることが出来た。この方法によりこれまで明らかでなかった植物細胞壁分解酵素のいもち病菌における病原性への関与が明らかとした。

研究成果

• [雑誌論文] Substrate-induced transcriptional activation of the MoCel7C cellulase gene is associated with methylation of histone H3 at lysine 4 in the rice blast fungus Magnaporthe oryzae (2013)
  • 著者名/発表者名: Vu BV, Pham KT, Nakayashiki H
  • 雑誌名: Appl Environ Microbiol 巻: 79 ページ: 6823-6832
  • 査読あり
• [雑誌論文] Appressorium-localized NADPH oxidase B is essential for aggressiveness and pathogenicity in the host-specific, toxin-producing fungus Alternaria alternata Japanese pear pathotype (2013)
  • 著者名/発表者名: Morita Y, Hyon GS, Hosogi N, Miyata N, Nakayashiki H, Muranaka Y, Inada N, Park P, Ikeda K
  • 雑誌名: Mol Plant Pathol 巻: 14 ページ: 365-378
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular cloning of the apoptosis-related calcium-binding protein AsALG-2 in Avena sativa (2013)
  • 著者名/発表者名: Hoat TX, Nakayashiki H, Yang Q, Tosa Y, Mayama S
  • 雑誌名: Mol Plant Pathol 巻: 14 ページ: 222-229
• [雑誌論文] Cellulases belonging to glycoside hydrolase families 6 and 7 contribute to the virulence of Magnaporthe oryzae (2012)
  • 著者名/発表者名: Vu, V.B., Itoh, K., Nguyen, Q.B. and Nakayashiki, H
  • 雑誌名: Molecular Plant-Microbe Interaction 巻: 25 ページ: 1135-1141
  • 査読あり
• [学会発表] いもち病菌における新たな遺伝子解析手法、Building Blocks法の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 村部知里、河南浩美、伊藤賢司、中屋敷均
  • 学会等名: 平成24年度日本植物病理学会関西部会
  • 発表場所: 鳥取市鳥銀文化会館
  • 年月日: 2012-09-27
• [学会発表] Histone lysine methyltransferases in Magnaporthe oryzae are involved in various aspects of infection and pathogenesis (2012)
  • 著者名/発表者名: Pham, K. T. M., Vu, B. V., Nguyen, Q. B., Ikeda, K., and Nakayashiki, H.
  • 学会等名: 10th International Congress of Plant Pathology
  • 発表場所: China
  • 年月日: 2012-08-29
• [備考]
  • URL: http://www.ans.kobe-u.ac.jp/jyukensei/e-bio/guide/structure.html