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2013 年度 実績報告書

環境細菌の極貧有機炭素源環境下での生育を司る機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 24658068
研究機関東北大学

研究代表者

永田 裕二  東北大学, 生命科学研究科, 准教授 (30237531)

研究分担者 大坪 嘉行  東北大学, 生命科学研究科, 助教 (40342761)
津田 雅孝  東北大学, 生命科学研究科, 教授 (90172022)
キーワード炭酸固定 / 独立栄養細菌 / 環境細菌 / 極貧有機炭素源環境 / 微生物機能開発
研究概要

地球表層環境に広く棲息する好気性従属栄養環境細菌群は極貧有機炭素源環境下でも生育する機構を有していると様々な状況証拠から推定されるが、明確な科学的記述が困難であり、未開拓な研究分野である。申請者は、環境汚染物質分解能を有する典型的な好気性従属栄養環境細菌Sphingobium japonicum UT26株の研究過程で、炭素源非添加無機培地で大気中CO2を生体成分として固定して生育可能な突然変異株を取得した。本研究の目的は、十分な科学的再現性の元に分子機構の解明が可能な本系を利用して、新規なCO2固定系が関与すると推定される本細菌株が有する極貧有機炭素源環境下での生育機構の全貌を解明し、さらに、本機構の好気性従属栄養細菌群における普遍性を明らかにし、細菌の極貧栄養条件下での培養という広範な応用への可能性を検討することである。
本研究では、「UT26株でadhX遺伝子が高発現すると炭素源非添加無機培地で生育可能となる現象」に着目して研究を実施し、adhX遺伝子高発現株でも大気中の標識CO2の取り込みが観察されることを明らかにすると共に、adhX高発現株のトランスポゾン変異株ライブラリーから取得した当該表現型に変異を持つ株の解析を進めた。これら変異株のトランスポゾン挿入部位を同定し、さらに、候補遺伝子の再破壊と相補実験を実施した結果、ピルビン酸/リン酸ジカイネース、アセチルCoAシンテターゼ、イソクエン酸リアーゼをコードすると推定される遺伝子が本表現型に必須であると結論した。これら遺伝子産物の推定機能とUT26株の全ゲノム配列情報から、PPCによるCO2固定を伴うグリオキシル酸回路が超低栄養条件下での同化過程として機能している可能性が高いという重要な知見を得た。

  • 研究成果

    (35件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (10件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (23件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Complete Genome Sequence of Pseudomonas sp. Strain TKP, Isolated from a gamma-Hexachlorocyclohexane-Degrading Mixed Culture2014

    • 著者名/発表者名
      Ohtsubo Y, Kishida K, Sato T, Tabata M, Kawasumi T, Ogura Y, Hayashi T, Tsuda M, Nagata Y
    • 雑誌名

      Genome announcements

      巻: 2 ページ: e01241-13

    • DOI

      10.1128/genomeA.01241-13

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Complete Genome Sequence of the Thermophilic Polychlorinated Biphenyl Degrader Geobacillus sp. Strain JF8 (NBRC 109937)2014

    • 著者名/発表者名
      Shintani M, Ohtsubo Y, Fukuda K, Hosoyama A, Ohji S, Yamazoe A, Fujita N, Nagata Y, Tsuda M, Hatta T, Kimbara K
    • 雑誌名

      Genome announcements

      巻: 2 ページ: e01213-13

    • DOI

      10.1128/genomeA.01213-13

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Complete Genome Sequence of Pseudomonas aeruginosa MTB-1, Isolated from a Microbial Community Enriched by the Technical Formulation of Hexachlorocyclohexane2014

    • 著者名/発表者名
      Ohtsubo Y, Sato T, Kishida K, Tabata M, Ogura Y, Hayashi T, Tsuda M, Nagata Y
    • 雑誌名

      Genome announcements

      巻: 2 ページ: e01130-13

    • DOI

      10.1128/genomeA.01130-13

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Design and Experimental Application of a Novel Non-Degenerate Universal Primer Set that Amplifies Prokaryotic 16S rRNA Genes with a Low Possibility to Amplify Eukaryotic rRNA Genes2014

    • 著者名/発表者名
      Mori H, Maruyama F, Kato H, Toyoda A, Dozono A, Ohtsubo Y, Nagata Y, Fujiyama A, Tsuda M, Kurokawa K
    • 雑誌名

      DNA Res

      巻: 21 ページ: 217-227

    • DOI

      10.1093/dnares/dst052

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Complete Genome Sequence of Ralstonia pickettii DTP0602, a 2,4,6-Trichlorophenol Degrader2013

    • 著者名/発表者名
      Ohtsubo Y, Fujita N, Nagata Y, Tsuda M, Iwasaki T, Hatta T
    • 雑誌名

      Genome announcements

      巻: 1 ページ: e00903-13

    • DOI

      10.1128/genomeA.00903-13

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Inhibitory effect of Pseudomonas putida nitrogen-related phosphotransferase system on conjugative transfer of IncP-9 plasmid from Escherichia coli2013

    • 著者名/発表者名
      Inoue K, Miyazaki R, Ohtsubo Y, Nagata Y, Tsuda M
    • 雑誌名

      FEMS microbiology letters

      巻: 345 ページ: 102-109

    • DOI

      10.1111/1574-6968.12188

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure and site-directed mutagenesis analysis of haloalkane dehalogenase LinB from Sphingobium sp. MI12052013

    • 著者名/発表者名
      Okai, M., J. Ohtsuka, L.F. Imai, T. Mase, R. Moriuchi, M. Tsuda, K. Nagata, Y. Nagata, and M. Tanokura
    • 雑誌名

      J. Bacteriol.

      巻: 195 ページ: 2642-2651

    • DOI

      10.1128/JB.02020-12

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 機能相補による芳香族化合物複合汚染土壌からの新規分解酵素遺伝子の検索2013

    • 著者名/発表者名
      永山浩史、菅原智詞、遠藤諒、加藤広海、大坪嘉行、永田裕二、津田雅孝
    • 雑誌名

      Journal of Environmental Biotechnology

      巻: 13(1) ページ: 51-56

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The effect of a unique halide-stabilizing residue on the catalytic properties of haloalkane dehalogenase DatA from Agrobacterium tumefacience C582013

    • 著者名/発表者名
      Hassan, K. A. Gora, J. Brezvsky, R. Chaloupkova, H. Moskalikova, A. Fortova, Y. Nagata, J. Damborsky, Z. Prokop
    • 雑誌名

      FEBS J.

      巻: 280 ページ: 3149-3159

    • DOI

      10.1111/febs.12238

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Complete genome sequence of the γ-hexachlorocyclohexane-degrading bactrium Sphingomonas sp. stain MM-12013

    • 著者名/発表者名
      Tabata, M., Y. Ohtsubo, S. Ohhata, M. Tsuda, and, Y. Nagata
    • 雑誌名

      Genome Announcements

      巻: 1 ページ: e00247-13

    • DOI

      10.1128/genomeA.00247-13

    • 査読あり
  • [学会発表] フェナントレン分解コンソーシアムにおける非分解優占種細菌の役割2014

    • 著者名/発表者名
      小川なつみ, 加藤広海, 遠藤諒, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] IncP-9群NAH7のoriTの同定と接合伝達宿主域に関する研究2014

    • 著者名/発表者名
      岸田康平, 井上慧, 宮崎亮, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] Acidvorax sp KKS102のカタボライト調節機構に関わる二成分制御系遺伝子bphPQの解析2014

    • 著者名/発表者名
      佐藤旦, 小沼かおり, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivoransにおけるFur依存的な鉄恒常性維持に関与するhemP遺伝子の解析2014

    • 著者名/発表者名
      佐藤拓哉, 木村明音, 湯原悟志, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] FinishChecker: 完全決定したつもりのゲノム配列のチェック機能2014

    • 著者名/発表者名
      大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] 有機塩素系殺虫剤gamma-hexachlorocyclohexane分解能を有するスフィンゴモナッド細菌群の挿入配列に関する研究2014

    • 著者名/発表者名
      荷川取佑記, 大畑智史, 田端理朗, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] 芳香族化合物汚染化土壌メタゲノムから培養非依存的手法により取得したフェノール分解関与遺伝子群の機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      永山浩史, 菅原智詞, 遠藤諒, 加藤広海, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] 有機塩素系殺虫剤分解能を有するスフィンゴモナッド細菌株の有機炭素源非添加無機寒天培地での生育を司る機構に関する研究2014

    • 著者名/発表者名
      永田裕二, 平野丈, 宇井博紀, 大坪嘉行, 津田雅孝
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140327-20140330
  • [学会発表] Finishしたゲノム配列のチェックツール: FinishChecker2014

    • 著者名/発表者名
      大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] Mycobacterium属細菌のフェナントレン分解能に対する非分解菌の効果2014

    • 著者名/発表者名
      小川なつみ, 加藤広海, 遠藤諒, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] ナフタレン分解プラスミドNAH7のoriTの同定と宿主域の解析2014

    • 著者名/発表者名
      岸田康平, 井上慧, 宮崎亮, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] 土壌微生物の移植メタゲノム2014

    • 著者名/発表者名
      加藤広海, 森宙史, 丸山史人, 豊田敦, 永山浩史, 大坪嘉行, 永田裕二, 藤山秋佐夫, 黒川顕, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] Burkholderia multivoransのFurを介した転写制御機構の解明2014

    • 著者名/発表者名
      佐藤拓哉, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] gamma-HCH分解能を有するsphingomonad細菌株における可動性遺伝因子を介したゲノム動態の解析2014

    • 著者名/発表者名
      大畑智史, 田端理朗, 荷川取佑記, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第8回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      20140307-20140309
  • [学会発表] Isolation of phenol-catabolic genes by cultivation-independent functional screening from metagenome of soil artificially polluted by aromatic hydrocarbons2013

    • 著者名/発表者名
      Hirofumi Nagayama, Tomonori Sugawara, Ryo Endo, Hiromi Kato, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata, Hiroshi Mori, Ken, Kurokawa, and Masataka Tsuda
    • 学会等名
      2nd Thunen Symposium on Soil Metagenomics: mining and learning from metagenomes plus workshop on bioinformatic tools for soil microbiologists
    • 発表場所
      Braunschweig, German
    • 年月日
      20131211-20131213
  • [学会発表] Design and experimental validation of a novel non-degenerate universal primer set that amplifies prokaryotic 16S rRNA genes with a low possibility to amplify eukaryotic rRNA genes2013

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Mori, Fumito Maruyama, Hiromi Kato, Atsushi Toyoda, Ayumi Dozono, Yoshiyuki Ohtsubo, Yuji Nagata, Asao Fujiyama, Masataka Tsuda, and Ken Kurokawa
    • 学会等名
      2nd Thunen Symposium on Soil Metagenomics: mining and learning from metagenomes plus workshop on bioinformatic tools for soil microbiologists
    • 発表場所
      Braunschweig, German
    • 年月日
      20131211-20131213
  • [学会発表] 土壌微生物の他土壌への移植メタゲノミクス2013

    • 著者名/発表者名
      加藤広海, 森宙史, 丸山史人, 豊田敦, 大坪嘉行, 永田裕二, 藤山秋佐夫, 黒川顕, 津田雅孝
    • 学会等名
      第29回日本微生物生態学会年次大会
    • 発表場所
      鹿児島
    • 年月日
      20131122-20131125
  • [学会発表] IncP-9群プラスミドNAH7のoriTの同定とtraF欠失による宿主域変化2013

    • 著者名/発表者名
      岸田康平, 井上慧, 宮崎亮, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第7回 日本ゲノム微生物学会 若手の会 研究会
    • 発表場所
      静岡県駿東郡
    • 年月日
      20130919-20130920
  • [学会発表] Burkholderia multivorans ATCC17616株の鉄恒常性維持機構の解明2013

    • 著者名/発表者名
      佐藤拓哉, 木村明音, 湯原悟志, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      第7回 日本ゲノム微生物学会 若手の会 研究会
    • 発表場所
      静岡県駿東郡
    • 年月日
      20130919-20130920
  • [学会発表] 累積置換変異導入によるハロアルカンデハロゲナーゼLinBのbeta-HCH分解活性の機能進化に関する研究2013

    • 著者名/発表者名
      永田裕二, 森内良太, 田中裕興, 大坪嘉行, 津田雅孝
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2013年度大会
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      20130530-20130601
  • [学会発表] 機能発現に基づくメタゲノムライブラリーからの新規芳香族化合物分解酵素遺伝子の取得と解析2013

    • 著者名/発表者名
      永山浩史, 菅原智詞, 遠藤諒, 加藤広海, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2013年度大会
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      20130530-20130601
  • [学会発表] IncP-9群プラスミドNAH7のoriTの同定及び接合伝達関連遺伝子traFの解析2013

    • 著者名/発表者名
      岸田康平, 井上慧, 宮崎亮, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2013年度大会
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      20130530-20130601
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株の鉄恒常性維持機構の解明2013

    • 著者名/発表者名
      佐藤拓哉, 木村明音, 湯原悟志, 大坪嘉行, 永田裕二, 津田雅孝
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2013年度大会
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      20130530-20130601
  • [図書] Appearance and evolution of γ-hexachlorocyclohexane-degrading bacteria. In Biodegradative Bacteria2014

    • 著者名/発表者名
      Nagata Y, Tabata M, Ohhata S, Tsuda M
    • 総ページ数
      358 (10-41)
    • 出版者
      Springer Verlag, Tokyo
  • [図書] Strategies to reveal genomic function in natural soil systems. In Biodegradative Bacteria2014

    • 著者名/発表者名
      Ohtsubo Y, Nishiyama E, Ishibashi Y, Nagata Y Tsuda M
    • 総ページ数
      358 (279-291)
    • 出版者
      Springer Verlag, Tokyo

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公開日: 2015-05-28  

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