| 研究課題/領域番号 |
24658226
|
|---|
| 研究機関 | 三重大学 |
|---|
研究代表者 |
近藤 誠 三重大学, 生物資源学研究科, 助教 (50432175)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
|
| キーワード | デオキシニバレノール / アンモニア / 毒性 |
|---|
| 研究概要 |
HPLCによるデオキシニバレノールの定量条件を検討し、以下の条件として設定した。分離カラム ODSカラム（4.6mm x 250mm）、検出波長220nm、移動相 水：メタノール：アセトニトリル=18：1：1、流速1.0ml/分。デオキシニバレノールの保持時間は18.7分であり、同時に分析したニバレノールの保持時間は9.3分であったことから、両者は明確に分離できていた。これらの条件でデオキシニバレノールの定量性を確認したところ、0.15～10ppmまで検量線の直線性が保たれていたため、今後の定量には本条件を用いることとした。一方、アンモニアを暴露したデオキシニバレノールをアンモニアにより暴露させた場合、先の条件で測定したデオキシニバレノールは減少することが確認され、未同定のピークが２種類出現していた。現在は、これら２種類以外の化合物の存在を確かめるため、アセトニトリル濃度を0～100%に変えて分析を行っている。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
デオキシニバレノールの定量条件の検討の際に、HPLCのカラムおよびポンプで異常がおき、その異常個所の確認と修理に時間を費やし、目標の実験まで到達できなかった。
アンモニア暴露によるデオキシニバレノールの毒性の変化を評価するため、培養細胞（HL60株）による評価を検討しており、現在技術の習得を学内の他の研究室にて行っている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
細胞培養の技術を習得した後、自身の研究室で細胞培養の設備を整え、アンモニア暴露したデオキシニバレノールの毒性の変化を評価する。
一方、デオキシニバレノールのアンモニア暴露実験を行い、新規の2種類のピークをマーカーとして反応生成物の検出を行う。また、それらの化合物をHPLC-MSにより分子量の推定を行う。新規のピークに該当する化合物を単離し、NMRにより構造を決定するとともに、毒性の評価を培養細胞を用いて行う。
|
| 次年度の研究費の使用計画 |
４月～５月中に毒性評価の技術を習得し、研究室内で設備を整える。６月にデオキシニバレノールに対するアンモニア暴露による生成物の分子量を測定し、７月～１０月には生成物の単離を目指し、その後、構造決定と毒性の評価を行う。１１月以降は実際の植物体（麦わらなど）にデオキシニバレノールを添加し、アンモニア暴露による濃度変化と栄養価値の評価を行う。２月ごろまでに実験を終え、学会発表と論文投稿に備えることを目標とする。
|
