Ｓ－ニトロシル化の可視化を目指した蛍光タンパク質の改変

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24659111
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 松本 明郎 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60437308)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: Ｓ－ニトロシル化 / 一酸化窒素 / 翻訳後修飾 / イメージング / GFP

研究概要

一酸化窒素（Nitric Oxide:NO）が生理活性を示すための機序であるS-ニトロシル化修飾（SNO化）が生じる経過を解析可能にすることを目的として，SNO化修飾に反応して蛍光強度が増強する緑色蛍光蛋白質(GFP)の改変をおこなった．野生型GFPにSNO化修飾を受けるシステインを導入し，さらにアミノ酸置換を無作為に行なったクローンを多数作成したところ，SNO化処理に伴い蛍光強度が迅速に変化する変異体が得られた．遺伝子配列の解析から，感受性はSH基のpKa変化よりも立体構造に依存している事が示唆され，SNO化修飾の生成・特異性を規定する機序に新たな視点を与えることにもなった．

研究成果

• [雑誌論文] Oral"hydrogen water"induces neuroprotective ghrelin secretion in mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto A, Yamafuji M, Tachibana T, Nakabeppu Y, Noda M, Nakaya H
  • 雑誌名: Scientific reports 巻: 3 ページ: 3273
  • DOI: 10.1038/srep03273
  • 査読あり
• [雑誌論文] 酸化ストレス制御によるレドックスシグナルの維持-とくに一酸化窒素(NO)によるシグナル伝達とその制御機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 巻: 247(9) ページ: 770-775
• [雑誌論文] The nitric oxide reductase of enterohemorrhagic Escherichia coli plays an important role for the survival within macrophages (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimizu T, Tsutsuki H, Matsumoto A, Nakaya H, Noda M
  • 雑誌名: Mol Microbiol 巻: 85 ページ: 492-512
  • DOI: 10.1111/j.1365-2958.2012.08122.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] SNO化制御の破綻と疾患 (2012)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎
  • 雑誌名: 細胞工学 巻: 31(2) ページ: 171-172
• [雑誌論文] 一酸化窒素由来ストレスの制御とシグナル機構の維持実験医学増刊活性酸素・ガス状分子による恒常性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎
  • 雑誌名: 制御と疾患 巻: 30(17) ページ: 57-63
• [学会発表] Drinking'hydrogen water' induces ghrelin secretion and protects dopaminergic neurons in MPTP- induced Parkinson's disease model mice (2014)
  • 著者名/発表者名: 山藤芽実,松本明郎,立花知子,中別府雄作,野田百美,中谷晴昭
  • 学会等名: 第87回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20140319-21
• [学会発表] 低酸素時における洞徐脈に対するNox1/NADPHオキシダーゼの保護作用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小島章光,西田洋文,松本明郎,岩田和実,白山武司,矢部千尋,中谷晴昭
  • 学会等名: 第87回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20140319-21
• [学会発表] 水素水による新たな生理作用の発現機序―胃におけるグレリン産生の活性化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎
  • 学会等名: 第4回分子状水素医学シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-02-01
  • 招待講演
• [学会発表] 一酸化窒素(NO)による腸管出血性大腸菌(EHEC)の感染制御と重症化機序 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎,清水健,津々木博康,野田公俊,中谷晴昭
  • 学会等名: 第13回日本NO学会学術集会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 20130628-29
• [学会発表] ガス状分子によるシグナル伝達制御 : NOによるS-ニトロシル化修飾 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松本明郎
  • 学会等名: 第3回分子状水素医学シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130209-10
  • 招待講演
• [学会発表] Establishment of phenylalanine sensitive cells revealed mTOR inhibition by excessive phenylalanine (2013)
  • 著者名/発表者名: Sanayama, Y., Matsumoto, A., Kohno Y., Nakaya H.
  • 学会等名: The 55th Annual Meeting of The Japanese Society for Inherited Metabolic Diseases (JSIMD)
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2013-11-27
• [学会発表] Redox sensitive regulation of thioredoxin interacting protein (TxnIP) in mouse vascular smooth muscle cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, A., Endo, H., Matsumoto, A., Nakaya H.
  • 学会等名: The 33rd Naito Conference
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20120626-29
• [備考] 千葉大学大学院医学研究院薬理学
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/pharmacology/