蛋白アレイを用いた関節リウマチの新たな抗シトルリン化蛋白抗体の網羅的検索

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24659274
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 大村 浩一郎 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40432372)
• キーワード: 抗CCP抗体 / ACPA / 関節リウマチ / 新規自己抗体 / AlphaScreen / 蛋白アレイ

研究概要

抗CCP抗体は関節リウマチ（RA）の診断に有用な自己抗体であるが、早期RAでの陽性率は50%程度であり、しばしば診断に苦慮し、治療開始が遅延し関節破壊が進行する。我々は抗CCP抗体陰性RAの診断に有用な自己抗体の検索をビオチン化蛋白ライブラリーとAlphaScreen法を用いて網羅的に行った。抗CCP抗体は複数のシトルリン化ペプチドに対する抗体であるが、抗CCP抗体陰性RA血清には未知のシトルリン化蛋白に対する抗体が少なからず含まれており、本年度は未知の抗シトルリン化蛋白抗体をスクリーニングした。同時に非シトルリン化タンパク抗体もスクリーニング可能であり、平行して行った。抗CCP抗体陰性RA2検体、抗CCP抗体陽性RA2検体、健常者2検体を用いて一次スクリーニングを行い、陽性検体に関して二次スクリーニングを抗CCP抗体陰性RA33検体、抗CCP抗体陽性RA33検体、様々な膠原病20検体、健常者10検体を用いてAlphaScreen法にて行った。抗CCP抗体陽性血清に関して、mockに対するシグナルのmean+3SDをcut-off値とすると、2181蛋白中186蛋白が陽性となり、抗CCP抗体陰性血清では9蛋白のみが陽性となり、シトルリン化タンパクのスクリーニングが機能していることが示された。シグナルの強い上位4蛋白はいずれも健常人では陰性、他の膠原病での陽性率も0-10%程度であり、感度は3-6%と高くはないが、今後組み合わせることで診断に有用な自己抗体となる可能性がある。抗CCP抗体陰性RA血清に反応する非シトルリン化蛋白も複数個見つかっており、合わせて今後の診断に役立つ可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Inverse association between air pressure and rheumatoid arthritis synovitis: an observational study (2014)
  • 著者名/発表者名: Terao C, Hashimoto M, Furu M, Nakabo S, Ohmura K, Nakashima R, Imura Y, Yukawa N, Yoshifuji H, Matsuda F, Ito H, Fujii T, Mimori T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e85376
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0085376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Neutrophils are essential as a source of IL-17 in the effector phase of arthritis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Katayama M, Ohmura K, Yukawa N, Terao C, Hashimoto M, Yoshifuji H, Kawabata D, Fujii T, Iwakura Y, Mimori T.
  • 雑誌名: PLos One 巻: 8 ページ: e62231
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0062231
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genome-Wide Association Study and Gene Expression Analysis Identifies CD84 as a Predictor of Response to Etanercept Therapy in Rheumatoid Arthritis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Cui J, Stahl EA, Saevarsdottir S, Miceli C, Diogo D, Trynka G, Raj T, Mirkov MU, Canhao H, Ikari K, Terao C, Okada Y, Wedrén S, Askling J, Yamanaka H, Momohara S, Taniguchi A, Ohmura K, Matsuda F, Mimori T, Gupta N, Kuchroo M, Morgan AW, Isaacs JD, Wilson AG, Hyrich KL, Herenius M, Doorenspleet ME, Tak PP, et al
  • 雑誌名: PLoS Genet 巻: 9 ページ: e1003394
  • DOI: 10.1371/journal.pgen.1003394
  • 査読あり
• [雑誌論文] Three Groups in the 28 Joints for Rheumatoid Arthritis Synovitis - Analysis Using More than 17,000 Assessments in the KURAMA Database. (2013)
  • 著者名/発表者名: Terao C, Hashimoto M, Yamamoto K, Murakami K, Ohmura K, Nakashima R, Yamakawa N, Yoshifuji H, Yukawa N, Kawabata D, Usui T, Yoshitomi H, Furu M, Yamada R, Matsuda F, Ito H, Fujii T, Mimori T
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e59341
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0059341
  • 査読あり
• [雑誌論文] PLD4 as a novel susceptibility gene for systemic sclerosis in a Japanese population. (2013)
  • 著者名/発表者名: Terao C, Ohmura K, Kawaguchi Y, Nishimoto T, Kawasaki A, Takehara K, Furukawa H, Kochi Y, Ota Y, Ikari K, Sato S, Tohma S, Yamada R, Yamamoto K, Kubo M, Yamanaka H, Kuwana M, Tsuchiya N, Matsuda F, Mimori T
  • 雑誌名: Arthritis Rheum. 巻: 65 ページ: 472-80
  • DOI: 10.1002/art.37777
  • 査読あり
• [学会発表] Only rheumatoid factor-positive subset of anti-citrullinated peptide/protein antibody-negative rheumatoid arthritis seroconverts to anti-citrullinated peptide/protein antibody positive.
  • 著者名/発表者名: Hiwa R, Ohmura K, Mimori T, et al
  • 学会等名: American College of Rheumatology Annual Scientific Meeting 2013
  • 発表場所: San Diego
• [学会発表] Clinical characteristics of rheumatoid factor-positive or –negative subsets of anti-citrullinated peptide/protein antibody-negative rheumatoid arthritis.
  • 著者名/発表者名: Hiwa R, Ohmura K, Mimori T, et al
  • 学会等名: American College of Rheumatology Annual Scientific Meeting 2013
  • 発表場所: San Diego
• [学会発表] Does anti-cyclic citrullinated peptide (CCP) antibody-negative rheumatoid arthritis (RA) become anti-CCP positive RA?
  • 著者名/発表者名: Hiwa R, Ohmura K, Mimori T, et al
  • 学会等名: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都