膜蛋白質ｓｈｅｄｄｉｎｇの絶対定量解析基盤技術の確立と慢性炎症反応モニタリング

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24659280
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 東山 繁樹 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 教授 (60202272)
• 連携研究者: 宮崎 龍彦 岐阜大学, 医学部附属病院病理部, 臨床教授 (80239384) ; 武森 信暁 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 講師 (40533047)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 臨床検査システム / shedding / タンパク質絶対定量 / プロテオーム解析

研究概要

炎症反応の進行を的確に把握する技術開発を目的として、炎症によって誘導される細胞膜タンパク質のsheddingをフェムトモルレベルで高精度にモニタリングする系の開発を試みた。無細胞合成系を用いてリコンビナント炎症関連膜タンパク質を合成し、これを内部標準として、タンパク質絶対定量を可能とする高感度MRM質量分析系を確立した。この系を用いて各種膜タンパク質を定量し、10ヘムトモルレベルで検出可能である事を確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Cisplatin resistance by induction of aldo-keto reductase family 1 member C2 in human bladder cancer cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Shirato A, Kikugawa T, Miura N, Tanji N, Takemori N, Higashiyama S, Yokoyama M.
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 7 ページ: 674-678
  • URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24527071
  • 査読あり
• [雑誌論文] Annexin A2 regulates a disintegrin and metalloproteinase 17-mediated ectodomain shedding of pro-tumor necrosis factor-αin monocytes and colon epithelial cells (2013)
  • 著者名/発表者名: T sukamoto H, Tanida S, Ozeki K, Ebi M, Mizoshita T, Shimura T, Mori Y, Kataoka H, Kamiya T, Fukuda S, Higashiyama S, Joh T.
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis 巻: 19(7) ページ: 1365-73
  • DOI: 10.1097/MIB.0b013e318281f43a
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spatiotemporal visualization of proHB-EGF ectodomain shedding in living cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Inoue H, Sakaue T, Ozawa T, Higashiyama S.
  • 雑誌名: J Biochem 巻: 154 ページ: 67-76
  • DOI: 10.1093/jb/mvt030
  • 査読あり
• [雑誌論文] Notch increases the shedding of HB-EGF by ADAM12 to potentiate invadopodia formation in hypoxia (2013)
  • 著者名/発表者名: Díaz B, Yuen A, Iizuka S, Higashiyama S, Courtneidge SA.
  • 雑誌名: J Cell Biol 巻: 201 ページ: 279-292
  • DOI: 10.1083/jcb.201209151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cisplatin influences acquisition of resistance to molecular-targeted agents through epithelial-mesenchymal transition-like changes (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurokawa M, Ise N, Omi K, Goishi K, Higashiyama S.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 104 ページ: 904-911
  • DOI: 10.1111/cas.12171
  • 査読あり
• [雑誌論文] Telmisartan inhibits cell proliferation by blocking nuclear translocation of ProHB-EGF C-terminal fragment in colon cancer cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Ozeki K, Tanida S, Morimoto C, Inoue Y, Mizoshita T, Tsukamoto H, Shimura T, Kataoka H, Kamiya T, Nishiwaki E, Ishiguro H, Higashiyama S, Joh T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e56770
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0056770
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human antigen R-mediated mRNA stabilization is required for ultraviolet B-induced autoinduction of amphiregulin in keratinocytes (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakayama H, Fukuda S, Matsushita N, Nishida-Fukuda H, Inoue H, Shirakata Y, Hashimoto K, Higashiyama S.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 288 ページ: 10338-10348
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.417527
  • 査読あり
• [雑誌論文] TGFαshedding assay : an accurate and versatile method for detecting GPCR activation (2012)
  • 著者名/発表者名: Inoue A, Ishiguro J, Kitamura H, Arima N, Okutani M, Shuto A, Higashiyama S, Ohwada T, Arai H, Makide K, Aoki J.
  • 雑誌名: Nat Methods 巻: 9 ページ: 1021-1029
  • DOI: 10.1038/nmeth.2172
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell surface annexins regulate ADAM-mediated ectodomain shedding of proamphiregulin (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakayama H, Fukuda S, Inoue H, Nishida-Fukuda H, Shirakata Y, Hashimoto K, Higashiyama S.
  • 雑誌名: Mol Biol Cell 巻: 23 ページ: 1964-1975
  • DOI: 10.1091/mbc.E11-08-0683
  • 査読あり
• [雑誌論文] A disintegrin and metalloenzyme (ADAM) 17 activation is regulated byα5β1 integrin in kidney mesangial cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Gooz P, Dang Y, Higashiyama S, Twal WO, Haycraft CJ, Gooz M.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 ページ: e33350
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0033350
  • 査読あり
• [学会発表] Absolute Quantitative Analysis of Urinary Proteome Alterations Using Wheat Germ Cell Free Protein Synthesis and MRM Mass Spectrometry (2013)
  • 著者名/発表者名: Takemori N, Takemori A, Higashiyama S.
  • 学会等名: HUPO 11th Annual World Congress
  • 発表場所: Boston, MA, USA
  • 年月日: 20130909-13
• [学会発表] Ectodomain shedding制御とEGFR/Ligandシグナル (2013)
  • 著者名/発表者名: 東山繁樹、福田信二
  • 学会等名: 第18回日本病態プロテアーゼ学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20130816-17
• [学会発表] コムギ胚芽無細胞タンパク質合成系を用いた絶対定量プロテオーム解析技術の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 武森信暁、武森文子、森下了、青島理人、澤崎達也、東山繁樹
  • 学会等名: 第65回日本細胞生物学会大会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 20130619-21
• [学会発表] Ectodomain shedding in EGFR/ligand signaling; regulation, functional implication and imaging. Matrix Metalloproteinases (2013)
  • 著者名/発表者名: Higashiyama S.
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Lucca, Italy
  • 年月日: 20130519-24
• [備考]
  • URL: http://www.m.ehime-u.ac.jp/data/course/list_detail.php?id=201100000053