新規探索法による新しい循環調節ペプチドの同定と機能解析

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24659394
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 桑迫 健二 宮崎大学, フロンティア科学実験総合センター, 准教授 (20381098)
• 研究分担者: 加藤 丈司 宮崎大学, 学内共同利用施設等, 教授 (20274780) ; 北村 和雄 宮崎大学, 医学部, 教授 (50204912) ; 永田 さやか 宮崎大学, 医学部, 研究員 (00452920) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 新規生理活性ペプチド / オーファン受容体 / キメラ遺伝子 / 安定発現株 / FACS解析 / FRET解析

研究実績の概要

精製を繰り返し行う過程で、組織抽出物の不足が生じるため、ブタの循環系の臓器も追加で大量に抽出して、平成25年度で完了しなかった実験を精力的に進めた。我々が独自に考案した方法論の再現性・普遍性の高さを確認する作業も進めた。単独で細胞膜に発現できる非オーファンＧ蛋白共役型受容体（GPCR）に１回膜貫通型の修飾蛋白が作用すると、リガンドの特異性が変化する。例えば、カルシトニン受容体（CTR）に３種の受容体活性調節蛋白（RAMP1、RAMP2、RAMP3）がそれぞれ作用すると、アミリンが作用できるようになる。従って、CTRのように、単独で細胞膜に発現できるオーファンGPCRと複合体を形成する修飾蛋白も引き続き行い、前年度の手順でリガンドの特定を目指した。しかしながら、我々が目指した新規生理活性ペプチドの同定には至らなかった。1999年にグレリンが発見されて以来、約15年間もメジャーな生理活性ペプチドは同定されていない。今後、我々が発見した新規の探索法をモディファイして、新規生理活性ペプチドの同定を推進したい。

研究成果

• [雑誌論文] Gender-related alterations in plasma adrenomedullin level and its correlation with body weight gain (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawano S, Kawagoe Y, Kuwasako K, Shimamoto S, Igarashi K, Tokashiki M, Kitamura K, Kato J
  • 雑誌名: Endocr Connect 巻: 4 ページ: 42-49
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Involvement of the histamine H1 receptor in the regulation of sympathetic nerve activity (2015)
  • 著者名/発表者名: Murakami M, Yoshikawa T, Nakamura T, Ohba T, Matsuzaki Y, Sawamura D, Kuwasako K, Yanagisawa T, Ono K, Nakaji S, Yanai K
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 458 ページ: 584-589
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Modified autonomic regulation in mice mutated in the β4 subunit of the lh/lh calcium channel (2015)
  • 著者名/発表者名: Murakami M, Suzuki T, Wu TW, Kuwasako K, Takahashi E, Watanabe H, Murakami AM, Miyoshi I, Yanagisawa T, Sasano H, Ono K, Ohba T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: not determined ページ: in press
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Biological properties of adrenomedullin conjugated with polyethylene glycol (2014)
  • 著者名/発表者名: Kubo K, Tokashiki M, Kuwasako K, Tamura M, Tsuda S, Kubo S, Yoshizawa-Kumagaye K, Kato J, Kitamura K
  • 雑誌名: Peptides 巻: 57 ページ: 118-121
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effects of propofol on electrocardiogram measures in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Shintaku T, Ohba T, Niwa H, Kushikata T, Hirota K, Ono K, Matsuzaki Y, Imaizumi T, Kuwasako K, Sawamura D, Murakami M
  • 雑誌名: J Pharmacol Sci 巻: 126 ページ: 351-358
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] Ｇ蛋白共役型受容体（GPCR）の重要な細胞内シグナル分子、β-アレスチンの新規作用：１型アドレノメデュリン受容体(AM１受容体)の細胞内移行の負の制御 (2015)
  • 著者名/発表者名: 桑迫 健二、北村 和雄、永田 さやか、加藤 丈司
  • 学会等名: 第88回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-20
• [学会発表] 一般住民におけるアドレノメデュリンとナトリウム利尿ペプチドの血中レベルと慢性腎臓病の発症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 加藤丈司、桑迫健二、北村和雄
  • 学会等名: 第18回日本心血管内分泌代謝学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-21 – 2014-11-22
• [学会発表] メタボリックシンドローム発症要因の解析－清武町研究－ (2014)
  • 著者名/発表者名: 野崎尚美、桑迫健二、北村和雄、加藤丈司
  • 学会等名: 第37回日本高血圧学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-10-17 – 2014-10-19
• [学会発表] Novel functions of two G protein-coupled receptor kinases: their marked inhibitory effect on adrenomedullin type 1 receptor signaling (2014)
  • 著者名/発表者名: Kenji Kuwasako, Kazuo Kitamura, Sayaka Nagata, Johji Kato
  • 学会等名: The Conference on Bioactive Peptides for Cell-Cell Communication 2014
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-10 – 2014-09-12
  • 招待講演
• [学会発表] Biological properties of adrenomedullin conjugated with polyethylene glycol (2014)
  • 著者名/発表者名: Keishi Kubo, Mariko Tokashiki, Kenji Kuwasako, Masaji Tamura, Shugo Tsuda, Shigeru Kubo, Kumiko Yoshizawa-Kumagaye, Johji Kato, Kazuo Kitamura
  • 学会等名: European Society of Cardiology Congress 2014
  • 発表場所: Barcelona
  • 年月日: 2014-08-30 – 2014-09-03