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2012 年度 実施状況報告書

糖尿病性腎症の進展におけるポドサイトとメサンギウム細胞の相互作用の意義

研究課題

研究課題/領域番号 24659415
研究機関福井大学

研究代表者

岩野 正之  福井大学, 医学部, 教授 (20275324)

研究分担者 高橋 直生  福井大学, 医学部附属病院, 助教 (30377460)
糟野 健司  福井大学, 医学部, 准教授 (60455243)
三上 大輔  福井大学, 医学部附属病院, 医員 (90464586)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
キーワードFSP1 / RAGE / ポドサイト / メサンギウム細胞
研究概要

FSP1は、糖尿病性腎症の進展とともにポドサイトでの発現が亢進する。さらに、FSP1は分泌蛋白としての生物活性も有しており、受容体はAGE受容体(RAGE)であることが報告されている。そこで、われわれはFSP1-RAGE系を介するポドサイトとメサンギウム細胞の相互作用を検討する目的で、RAGE-/-マウスおよびRAGE+/+マウスの糸球体を単離後、培養メサンギウム細胞(MC)を樹立した。RAGE-/-MCおよびRAGE+/+MCにリコンビナントFSP1を添加後12時間にRNAを抽出し、DNAチップで、発現量の異なる因子を探索中である。
次に、糖尿病性腎症モデルを作製するのに適切なマウスバックグラウンドを検討する目的で、Balb/cマウスとC57BL/6マウスに、ストレプトゾトシン投与後に高脂肪食を摂取させる方法で、糖尿病性腎症の誘発を試みた。両方のバックともに、アルブミン尿の著明な増加が観察された。しかし、B6マウスでは糸球体硬化が出現したのに対し、Balb/cマウスでは糸球体障害が認められなかった。In vivo実験を開始する準備として、現在、Balb/cバックであるFSP1-/-マウスおよびFSP1 TGマウスをバッククロスにより、B6バックに変更中である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

糖尿病性腎症の作製が、B6マウスでしか可能でないことが判明したため、すべての遺伝子改変マウスのバックをB6に変更中である。しかし、動物室でネズミ盲腸蟯虫が広がったため、実験の中断を余儀なくされている。クリーン化終了後、実験を再開する。

今後の研究の推進方策

統一されたバックグラウンドの遺伝子改変マウスを交配することで、RAGE+/+FSP1TG+, RAGE+/+FSP1TG-, RAGE+/+FSP1-/-, RAGE-/-FSPTG+, RAGE-/-FSP1TG-, RAGE-/-FSP1-/-の6種類の遺伝子改変マウスを作製する。この6種類の遺伝子改変マウスに実験的に糖尿病性腎症を誘導し、マウスの腎病変の半定量的解析、尿蛋白(蓄尿)、腎機能、および平成24年度に実施したin vitroの実験系で同定された、FSP1-RAGE系で発現が誘導あるいは抑制される因子の発現を免疫組織学で検討する。次に、凍結切片からlaser-capture microdissection (LCM)を用いてマウス糸球体を単離後、糸球体内における各因子mRNA発現量をreal-time PCR法で定量する。

次年度の研究費の使用計画

細胞培養実験のための消耗品購入に使用予定である。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Significance of renal biopsy in patients with presumed diabetic nephropathy2013

    • 著者名/発表者名
      Harada K, Akai Y, Sumida K, Yoshikawa M, Takahashi H, Yamaguchi Y, Kubo A, Iwano M, Saito Y.
    • 雑誌名

      J Diabetes Invest

      巻: 4 ページ: 88-93

    • DOI

      10.1111/j.2040-1124.2012.00233.x

    • 査読あり
  • [学会発表] 結節病変を有した糖尿病性腎症例における腎予後と臨床および病理組織学的指標との関連性2012

    • 著者名/発表者名
      森本勝彦、岩野正之
    • 学会等名
      日本腎臓学会学術総会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      20120601-20120603

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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