ＭＤＳにおける異常クローン拡大メカニズムの解明

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24659458
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 真田 昌 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20529044)
• キーワード: 骨髄異形成症候群 / RNAスプライシング / 遺伝子変異 / 造血幹細胞

研究概要

遺伝子解析研究により、骨髄異形成症候群MDSではRNAスプライシングに関わる遺伝子群に高頻度かつ特徴的に変異が生じていることが明らかとなったが、その分子メカニズムは依然として不明である。MDS例において、本変異獲得細胞が選択されるにも関わらず、マウス造血幹細胞への本変異体導入実験では、変異獲得による生物学的優位性は観察されない。本研究では、何故、本変異を獲得した細胞がクローナルに増殖し得るかを明らかとすることで、MDS特有の分子病態の解明を目指した。スプライシング分子変異はTET2の不活化変異としばしば合併することから、TET2 条件的欠失マウスを用いて、TET2が不活化された細胞において、代表的なスプライシング分子変異であるU2AF1ならびにSRSF2変異導入細胞が優位性を獲得し得るか検証した。すなわち、造血細胞特異的にTET2を誘導的に欠失させたマウスからCD34-KSL（造血幹細胞）を採取し、レトロウィルスベクターを用いて遺伝子導入を行い、致死量の放射線を照射したマウスに骨髄移植を行った。野生型マウス由来に比し、TET2ホモ欠失マウスを用いた移植の末梢血キメリズム解析では、競合細胞に対するキメリズムは高くなったが、依然として野生型ならびに空ベクターに比し、キメリズムは低く、優位性は確認できなかった。遺伝子導入実験において期待すべき生物学的効果がされない理由の一つとして、強制発現系を用いており生理的な発現量との違いによる作用の差が大きいと想定される。そこで、Cre-loxPシステムを用いて変異アレルを生理的なプロモーターのもと、誘導的かつ造血細胞特異的に発現させられるマウスの作成し、変異アレルの発現を確認した。今後、それらのマウスおよび同マウス由来の造血幹細胞を用いて検討を続ける予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Somatic RHOA mutation in angioimmunoblastic T cell lymphoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sakata-Yanagimoto M, et al, Sanada M, et al. (25/35)
  • 雑誌名: Nat Genet 巻: 46 ページ: 171-5
  • DOI: 10.1038/ng.2872
  • 査読あり
• [雑誌論文] Haploinsufficiency of Sf3b1 leads to compromised stem cell function but not to myelodysplasia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsunawa, M. Yamamoto, R. Sanada, M. Sato-Otsubo, A. Shiozawa, Y. Otsu, M. Isono, K. Koseki, H. Nakauchi, H. Ogawa, S.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: In press ページ: In press
  • DOI: 10.1038/leu.2014.73
  • 査読あり
• [雑誌論文] Landscape of genetic lesions in 944 patients with myelodysplastic syndromes.. (2014)
  • 著者名/発表者名: Haferlach T, Nagata Y, Grossmann V, Okuno Y, Bacher U, Nagae G, Schnittger S, Sanada M, Kon A, Alpermann T, Yoshida K, Roller A, Nadarajah N, Shiraishi Y, Shiozawa Y, Chiba K, Tanaka H, Koeffler HP, Klein HU, Dugas M, Aburatani H, Kohlmann A, Miyano S, Haferlach C, Kern W, Ogawa S.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 28 ページ: 241-247
  • DOI: 10.1038/leu.2013.336
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clonal leukemic evolution in myelodysplastic syndromes with TET2 and IDH1/2 mutations. (2014)
  • 著者名/発表者名: Lin, T. L. Nagata, Y. Kao, H. W. Sanada, M. Okuno, Y. Huang, C. F. Liang, D. C. Kuo, M. C. Lai, C. L. Lee, E. H. Shih, Y. S. Tanaka, H. Shiraishi, Y. Chiba, K. Lin, T. H. Wu, J. H. Miyano, S. Ogawa, S. Shih, L. Y.
  • 雑誌名: Haematologic 巻: 99 ページ: 28-36
  • DOI: 10.3324/haematol.2013.091249
  • 査読あり
• [雑誌論文] Concurrent loss of Ezh2 and Tet2 cooperates in the pathogenesis of myelodysplastic disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Muto T, Sashida G, Oshima M, Wendt GR, Mochizuki-Kashio M, Nagata Y, Sanada M, Miyagi S, Saraya A, Kamio A, Nagae G, Nakaseko C, Yokote K, Shimoda K, Koseki H, Suzuki Y, Sugano S, Aburatani H, Ogawa S, Iwama A.
  • 雑誌名: J Exp Med 巻: 210(12) ページ: 2627-39
  • DOI: 10.1084/jem.20131144
• [雑誌論文] Somatic SETBP1 mutations in myeloid malignancies (2013)
  • 著者名/発表者名: Makishima H, Yoshida K, Nguyen N, Przychodzen B, Sanada M, Okuno Y, Ng KP, Gudmundsson KO, Vishwakarma BA, Jerez A, Gomez-Segui I, Takahashi M, Shiraishi Y, Nagata Y, Guinta K, Mori H, Sekeres MA, Chiba K, Tanaka H, Muramatsu H, Sakaguchi H, Paquette RL, McDevitt MA, Kojima S, Saunthararajah Y, Miyano S, Shih LY, Du Y, Ogawa S, Maciejewski JP.
  • 雑誌名: Nat Genet 巻: 45(8) ページ: 942-6
  • DOI: 10.1038/ng.2696
• [雑誌論文] BCOR and BCORL1 mutations in myelodysplastic syndromes and related disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Damm F, et al, Sanada M, et al, *Kosmidar O. (8/31)
  • 雑誌名: Blood 巻: 122 ページ: 3169-77
  • DOI: 10.1182/blood-2012-11-469619
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recurrent mutations in multiple components of the cohesin complex in myeloid neoplasms. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kon A, et al, Sanada M, et al, *Ogawa S. (4/41)
  • 雑誌名: Nat Genet. 巻: 122 ページ: 1232-7
  • DOI: 10.1038/ng.2731
  • 査読あり
• [雑誌論文] The landscape of somatic mutations in Down syndrome-related myeloid disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshida K, et al, Sanada M, et al, *Ogawa S. (7/33)
  • 雑誌名: Nat Genet 巻: 45 ページ: 1293-9
  • DOI: 10.1038/ng.2759
  • 査読あり
• [雑誌論文] An empirical Bayesian framework for somatic mutation detection from cancer genome sequencing data (2013)
  • 著者名/発表者名: Shiraishi, Y. Sato, Y. Chiba, K. Okuno, Y. Nagata, Y. Yoshida, K. Shiba, N. Hayashi, Y. Kume, H. Homma, Y. Sanada, M. Ogawa, S. Miyano, S.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res 巻: 41 ページ: e89
  • DOI: 10.1093/nar/gkt126
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exome sequencing identifies secondary mutations of SETBP1 and JAK3 in juvenile myelomonocytic leukemia (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakaguchi, H. Okuno, Y. Muramatsu, H. Yoshida, K. Shiraishi, Y. Takahashi, M. Kon, A. Sanada, M. Chiba, K. Tanaka, H. Makishima, H. Wang, X. Xu, Y. Doisaki, S. Hama, A. Nakanishi, K. Takahashi, Y. Yoshida, N. Maciejewski, J. P. Miyano, S. Ogawa, S. Kojima, S.
  • 雑誌名: Nat Genet 巻: 45 ページ: 937-41
  • DOI: 10.1038/ng.2698
  • 査読あり
• [雑誌論文] Deep sequencing in cancer research. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshida K, Sanada M, Ogawa S.
  • 雑誌名: Jpnj clin oncol. 巻: 43 ページ: 110-5
  • DOI: 10.1093/jjco/hys206
  • 査読あり
• [雑誌論文] ACTN1 Mutations Cause Congenital Macrothrombocytopenia (2013)
  • 著者名/発表者名: Kunishima, S. Okuno, Y. Yoshida, K. Shiraishi, Y. Sanada, M. Muramatsu, H. Chiba, K. Tanaka, H. Miyazaki, K. Sakai, M. Ohtake, M. Kobayashi, R. Iguchi, A. Niimi, G. Otsu, M. Takahashi, Y. Miyano, S. Saito, H. Kojima, S. Ogawa, S.
  • 雑誌名: Am J Hum Genet 巻: 92 ページ: 431-8
  • DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.01.015
  • 査読あり
• [学会発表] AMLにおけるゲノム異常 (2013)
  • 著者名/発表者名: 眞田 昌
  • 学会等名: 第７５回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20131012-20131012
  • 招待講演
• [学会発表] Role of Sf3b1 on hematopoiesis
  • 著者名/発表者名: Manabu Matsunawa, Ryo Yamamoto, Masashi Sanada, Aiko Sato, Yusuke Shiozawa, Kenichi Yoshida, Yasunobu Nagata, Ayana Kon, Tetsuichi Yoshizato, Makoto Otsu, Kyoichi Isono, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, and Seishi Ogawa
  • 学会等名: 55th Annual Meeting of American Society of Hematology
  • 発表場所: New Orleans
• [学会発表] FUNCTIONAL ANALYSIS OF COHESIN MUTATIONS IN MYELOID NEOPLASMS
  • 著者名/発表者名: Ayana Kon, Masashi Sanada, et al. (2/20)
  • 学会等名: 18th Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Stockholm
• [学会発表] Role of Sf3b1 on hematopoiesis
  • 著者名/発表者名: Manabu Matsunawa, Ryo Yamamoto, Masashi Sanada, Aiko Sato, Yusuke Shiozawa, Kenichi Yoshida, Yasunobu Nagata, Ayana Kon, Tetsuichi Yoshizato, Makoto Otsu, Kyoichi Isono, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, and Seishi Ogawa
  • 学会等名: 第75回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 札幌