| 研究課題/領域番号 |
24659499
|
|---|
| 研究機関 | 岡山大学 |
|---|
研究代表者 |
綾 邦彦 岡山大学, 大学病院, 講師 (20379762)
|
|---|
| 研究分担者 |
大内田 守 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (80213635)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2013-03-31
|
| キーワード | 蛋白尿 / 細胞内輸送 / ポドシン / ネフリン / 腎炎 / ネフローゼ / ポドサイト / 輸送蛋白 |
|---|
| 研究概要 |
蛋白尿発症機序を明らかにし、診断治療に役立てるという全体構想に対して、2009-2011年の基盤研究Ｃでは 糸球体上皮細胞（ポドサイト）に発現し、ポドシン蛋白に結合する輸送蛋白ｘを同定した。この輸送蛋白ｘのin vivoにおける機能を確かめることが2012～挑戦的萌芽研究の目的である。
輸送蛋白ｘのＦ１ヘテロマウスからNeoカセットFLPカセットを除去し、輸送蛋白ｘのfloxヘテロマウスを作成し、これとポドシンのプロモーターを有しポドサイト特異的にCreを発現するB6.Cg-Tg(NPHS2-cre)295Lbh/Jをかけ合わせ、ポドサイト特異的ｘのヘテロ欠損マウスを作成した。まず このマウスにつき、６週齢時に、代謝ゲージにて蓄尿を行い、尿中TP アルブミン クレアチニンを測定 尿潜血もチェックしたが、有意な所見はえられなかった。このことから ポドシンにおける輸送蛋白xのヘテロ欠損では、６週齢において これらの検尿異常をおこさないと考えられた。このマウスを解剖し、腎組織について検討を行ったが、有意な病理変化をおこしておらず、ヘテロ欠損では腎病理変化もおこさないと考えられた。マウス作成が大幅に遅れたため、カップリング数を増やして対応し、ポドサイト特異的ｘのホモ欠損マウス作成に成功した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
ポドサイト特異的ｘのホモ欠損マウス作成に大幅な遅延が認められたため、このマウスを使用して行う実験が出来ていない。
|
| 今後の研究の推進方策 |
現在、ポドサイト特異的ホモ欠損マウスが作成できたので、今後 各年齢における検尿、腎臓を中心とした病理所見の検討を行う。病理所見を参考に、関連蛋白の免疫組織染色なども行う。必要に応じて、追加実験を行って行く。
|
| 次年度の研究費の使用計画 |
コンディショナルノックアウトマウスの作成が遅れたため、作成以後の計画が遂行出来ていない。本年度は、作成以後の計画を予定通り行う。マウスの交配、維持費用。マウスの尿や血液、組織などの解析費用、免疫染色を行う場合の 抗体を含めた必要物品の費用。これらの結果に従って、追加実験を行う場合の費用。（例えばネガティブなデータが出た場合、蛋白尿惹起モデルを使用するなど）
|
