新規モデルマウスを用いた肥満細胞や好塩基球のアトピー性皮膚炎における役割の解明

2012 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24659528
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 宮地 良樹 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30127146)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: Atopic dermatitis / mast cell / basophils

研究概要

Mas TRECK TgマウスDT処理後、肥満細胞のみ除去された状態で接触皮膚炎を確認したところ野生型に比べ接触皮膚炎反応が減弱していることが明らかとなった。更に異なる２つのハプテンを用いて検証したところ、どちらのハプテンでも接触皮膚炎反応が減弱することが明らかとなった。さらにoxazoloneの濃度を低濃度もしくは高濃度と変えて感作を行ったところ、どちらの濃度においても接触皮膚炎反応が減弱することが明らかとなった。今回、我々はMas TRECK Tgマウスを用いて、肥満細胞が接触皮膚炎反応に大きな影響を与えていることを証明した。
一方、「循環する肥満細胞」と表現され肥満細胞の代用としか考えられてこなかった好塩基球が、近年、ある状況下でTh２分化を誘導する重要な働きを担うことが明らかになった。そこで、Bas TRECKマウスにおいて、ハプテンを用いた接触過敏反応およびハプテン反復塗布モデルにて好塩基球の役割を検証した。好塩基球欠損マウスにおいてハプテンを用いた接触皮膚炎を誘導したところ耳介腫脹は変化がないことが明らかとなった。これは肥満細胞欠損マウスと異なる結果となった。一方、ハプテン反復塗布モデルでは好塩基球欠損マウスにおいて急性期の炎症反応が有意に減弱している事が明らかとなった。しかしながら、オボアルブミン（OVA）誘発皮膚炎モデルでは皮膚炎に野生型マウスと好塩基球マウスの差が見られなかった。
以上より、皮膚免疫において肥満細胞は接触皮膚炎において重要な働きを担う事が明らかとなり、好塩基球は接触皮膚炎では役割を担わないもののハプテン反復塗布モデルでは重要な細胞という事が明らかとなった。我々は本研究において肥満細胞および好塩基球の皮膚免疫における役割の違いを明らかとした。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

平成２４年度は新規肥満細胞欠損マウス(Mas TRECKマウス)において、ハプテンの種類、濃度問わず接触皮膚炎に肥満細胞が関与していることを明らかとした。更に新規好塩基球欠損マウス(Bas TRECKマウス)では、抗原の違いでTh2誘導に関与しているかどうか明らかとした。つまり好塩基球はハプテン抗原に対してはTh2誘導に重要な役割を担うもののタンパク抗原に対してはTh2誘導に関与しないことがわかった。以上の新規発見に関しては文献15において報告している。このことは当初の研究計画以上に進展している内容である。

今後の研究の推進方策

Flaky tailマウスとMas TRECK TgマウスもしくはBas TRECK Tgマウスを掛け合わせることで、アトピー性皮膚炎の病態形成における肥満細胞、好塩基球の役割を検証していく。肥満細胞除去時、もしくは好塩基球除去時のクリニカルスコア、皮膚組織所見、更には病変部への浸潤細胞の評価を行う。更にはこれらマウスにダニタンパク抗原を塗布し惹起される炎症を検証する。また、MaS TRECK TgマウスもしくはBas TRECK Tgマウス単独で用いたハプテン反復塗布によるアトピー性皮膚炎モデルでの解析結果と照らし合わせ、皮膚バリア機能の異常もしくはフィラグリン遺伝子変異存在下での肥満細胞、好塩基球の炎症時の働きの違いを検証していく。
さらに、上記の研究成果をもとに、肥満細胞、好塩基球とＴ細胞や樹状細胞などとの相互作用やアトピー性皮膚炎病態形成における肥満細胞もしくは好塩基球の重要分子同定を行う。
アトピー性皮膚炎モデルマウスで得られた結果をもとにヒト臨床検体を用いた検証を行う（倫理委員会承認済み、課題名：免疫・アレルギー性皮膚疾患の免疫学的解析、申請番号：第E778番）。具体的には、アトピー性皮膚炎患者の血液および血清、また皮膚病理組織をもとに健常人の検体との比較を行う。モデルマウスを用いて明らかとなった新規重要分子の発現レベル、機能解析を行うことでヒトにおける実際の疾患での関連性を明らかにする。

次年度の研究費の使用計画

該当なし

研究成果

• [雑誌論文] Prostaglandin E2 increase in pachydermoperiostosis without 15-hydroprostaglandin dehydrogenase mutations (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakahigashi K, Otsuka A, Doi H, Tanaka S, Okajima Y, Niizeki H, Hirakiyama A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: 93(1) ページ: 118-119
  • DOI: 10.2340/00015555-1398
  • 査読あり
• [雑誌論文] No basophil infiltration in alopecia areata irrespective of the intensity of eosinophil infiltration (2013)
  • 著者名/発表者名: Ono S, Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: 93(2) ページ: 185-186
  • DOI: 10.2340/00015555-1430
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sarcoidosis of the scalp presenting as patchy alopecia; analysis of transforming growth factor-b expression in the affected area by immunostaining (2013)
  • 著者名/発表者名: Nonomura Y, Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Eur J Dermatol. 巻: 23(1) ページ: 115-116
  • DOI: 10.1684/ejd.2012.1910
  • 査読あり
• [雑誌論文] Subcorneal pustular dermatosis exhibiting a high serum TARC/CCL17 level (2013)
  • 著者名/発表者名: Ono S, Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Case Reports in Dermatology 巻: 5(1) ページ: 38-42
  • DOI: 10.1159/000348241
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of basophil infiltration into the skin lesions of tick bites (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakahigashi K. Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Case Reports in Dermatology 巻: 5(1) ページ: 48-51
  • DOI: 10.1159/000348650
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extranodal NK/T-cell lymphoma, nasal type, presenting pseudoepitheliomatous hyperplasia as a mimic of squamous cell carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Nonomura Y, Otsuka A, Endo Y, Fujisawa A, Miyagawa-Hayashin A, Sumiyoshi S, Kabashima K, Miyachi Y, Tanioka M
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 22(5) ページ: 688-689
  • DOI: 10.1684-ejd.2012.1815
  • 査読あり
• [雑誌論文] Treatment of intractable oral lichen planus with intravenous immunoglobulin therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakashima C, Otsuka A, Sonobe H, Kitoh A, Kato M, Kore-Eda S, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 22(5) ページ: 693
  • DOI: 10.1684/ejd.2012.1827
  • 査読あり
• [雑誌論文] No filaggrin gene mutation in a patient with a combination of atopic dermatitis, alopecia areata, and food allergy (2012)
  • 著者名/発表者名: Ono S, Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 22(6) ページ: 785-786
  • DOI: 10.1684/ejd.2012.1875
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clostridium difficile colitis and neutropenic fever associated with docetaxel chemotherapy in a patient with advanced extramammary Paget’s disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Nonomura Y, Otsuka A, Endo Y, Fujisawa A, Tanioka M, Kabashima K, Miyachi Y
  • 雑誌名: Case Reports in Dermatology 巻: 4(2) ページ: 177-180
  • DOI: 10.1159/000342069
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sparganosis mansoni on the abdominal skin mimicking folliculitis diagnosed by analysis of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 gene using polymerase chain reaction (2012)
  • 著者名/発表者名: Nonomura Y, Otsuka A, Endo Y, Fujisawa A, Nakajima N, Minamiguchi S, Miyagawa-Hayashino A, Yamada M, Tegoshi T, Yamasaki H, Kabashima K, Miyachi Y, Tanioka M
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 22(6) ページ: 806-807
  • DOI: 10.1684/ejd.2012.1876
  • 査読あり
• [雑誌論文] Incomplete POEMS syndrome presenting for years solely with scleredema and hyperpigmentation (2012)
  • 著者名/発表者名: Ono S, Otsuka A, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: J Dermatol 巻: 40(1) ページ: 77-78
  • DOI: 10.1111/j.1346-8138.2012.01683.x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improvement of anti-TNF-a antibody-induced palmoplantar pustular psoriasis using a 308-nm excimer light (2012)
  • 著者名/発表者名: Iga N, Otsuka A, Tanioka M, Miyachi Y, Kabashima K
  • 雑誌名: Case Reports in Dermatology 巻: 4(3) ページ: 261-264
  • DOI: 10.1159/000345468
  • 査読あり
• [雑誌論文] Female pattern hair loss possibly caused by tamoxifen: Androgen receptor expression in the outer root sheath in the affected area. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nonomura Y, Otsuka A, Inui S, Miyachi Y, Kabashima K.
  • 雑誌名: J Dermatol 巻: 39(12) ページ: 1060-1061
  • DOI: 10.1111/j.1346-8138.2012.01632.x.
  • 査読あり