| 研究概要 |
本研究は、ヒト腫瘍培養細胞で高発現を確認した機能性分子安定発現系を分子プローブのスクリーニングに利用し、ポストFDG製剤の有力候補である標識アミノ酸製剤のアミノ酸トランスポータ及び薬物トランスポータに対する親和性の評価を目的とする。
既に、DNAチップを用いて4万配列以上の遺伝子発現レベルを測定し、16種類のヒト腫瘍培養細胞における機能分子の遺伝子発現プロファイリングを直接比較可能なデータベースを構築した。このデータベースからアミノ酸トランスポータの発現レベルが異なる数種のヒト腫瘍培養細胞を選択し、既に臨床使用されている11C-L-Metとその光学異性体11C-D-Metの細胞集積機序を検討した。その結果、L-体はsystem L、D-体ではsystem ASCの寄与も大きく、qPCRにより絶対定量したAATの発現量は細胞集積率と良い相関を示した(Nucl.Med.Biol,39:1213-1218,2012)。
また、ポストFDG 製剤の最有力候補である18F-FACBCの前立腺癌細胞への集積に関与を確認したアミノ酸トランスポータ(J.Nucl.Med.,52:822-829,2011)について、単一発現細胞を作成して集積阻害を実施した結果、前立腺癌細胞で高発現を示したNa+依存性AATであるASCT2とSNAT2の内、FACBCはASCT2に高親和性を示した(Nucl.Med.Biol.,40:670-675,2013)。
さらに、排泄型薬物トランスポータによる排泄機序解明のモデル化合物として、肝胆道系診断薬として臨床使用されている99mTc-PMTの胆汁排泄に関与するABCトランスポータの単一発現ベシクルを用いて検討し、P-glycoprotein(P-gp)及びMRP2の関与が明らかにした(Nucl.Med.Biol.,41:338-342,2014)。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
DNAチップを用いて細胞集積実験に用いられる16種類のヒト培養腫瘍細胞の遺伝子発現データベースを構築し、発現プロファイリングが直接比較可能となった。また、主要な中性アミノ酸トランスポータ発現量に関してリアルタイムPCRによる絶対定量系を確立した。これらのトランスポータ遺伝子発現量と細胞集積性との比較検討のモデルとして、既に臨床使用されている11C-L-Metとその光学異性体11C-D-Metの細胞集積機序を検討した結果、標識体の細胞集積に寄与していたアミノ酸トランスポータの発現量はこれらの細胞集積率と良い相関を示した(Nucl.Med.Biol,39:1213-1218,2012)。
また、ポストFDG 製剤の最有力候補である18F-FACBCの前立腺癌細胞への集積に関与を確認したアミノ酸トランスポータについて、単一発現細胞を作成して集積阻害を実施した。その結果、前立腺癌細胞で高発現を示したNa+依存性アミノ酸トランスポータであるASCT2とSNAT2の中でも、FACBCはASCT2に高い親和性を示した。またNa+非依存性アミノ酸トランスポータであるLAT1も取込みに一部寄与することが判明した(Nucl.Med.Biol.,40:670-675,2013)。
さらに、薬剤の胆汁排泄に関与する薬物トランスポータによる排泄機序解明のモデル化合物として、肝胆道系診断薬として臨床使用されている99mTc-PMTの胆汁排泄に関与するABCトランスポータの単一発現ベシクルを用いて検討した結果、P-glycoprotein(P-gp)及びMRP2の関与による輸送が明らかとなった(Nucl.Med.Biol.,41:338-342,2014)。
このように、当初の研究計画通りの成果を得るとともに、その成果を論文投稿し、すべて関連国際学術誌に掲載された。
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