膵がんに対するがん幹細胞標的ペプチドワクチン療法の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24659592
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 平田 公一 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50136959)
• 研究分担者: 佐藤 昇志 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50158937) ; 鳥越 俊彦 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (20301400) ; 田村 保明 北海道大学, その他部局等, その他 (80322329) ; 廣橋 良彦 札幌医科大学, 医学部, 講師 (30516901) ; 水口 徹 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (30347174) ; 木村 康利 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (80311893) ; 九冨 五郎 札幌医科大学, 医学部, 講師 (10404625) ; 河野 剛 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (50516664) [辞退] ; 小川 宰司 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (70516658)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 癌 / 膵 / 免疫 / 幹細胞 / side population

研究実績の概要

これまでの研究において我々は膵癌細胞株SU86.86.およびBxPCからSP(side population)法より細胞を分離し、SP細胞は各種幹細胞遺伝子の過剰発現と高度の造腫瘍能を有しており幹細胞の形質を有していることを証明した。一方で我々は同じくSP法により分離した大腸癌幹細胞より、がん幹細胞に特異的に発現する遺伝子であるOR7C1を同定していたOR7C1は正常組織では嗅球以外に発現を認めず、かつ癌細胞において過剰な発現を認めることから新しい癌幹細胞特異的抗原の候補となると考え、これを膵癌にも応用することを計画した。
まず3種類の膵癌細胞株SU86.86.、HIP、Panc1に対し無血清培地による３次元培養を行い幹細胞性の濃縮された細胞塊(tumorsphere)を回収しPCR法で遺伝子発現につき解析したところ、tumorsphereでは血清存在下の通常培養と比較し幹細胞遺伝子とともにOR7C1の高い発現を認め癌幹細胞ではOR7C1が過剰に発現していることが確認された。また同様にウェスタンブロットも行い、３次元培養細胞群において高いOR7C1のタンパク発現も確認され、OR7C1の幹細胞性への関連が示唆された。次に抗OR7C1抗体を用い、フローサイトメトリーによりOR7C1過剰発現細胞を分離し遺伝子発現および造腫瘍能についての解析を試みたが分離後の細胞生存率が不良であり培養が進まず以降の解析を行うことができなかった。細胞株を変えても同様となり、原因として手技的な問題のほかOR7C1交代により細胞死が誘導されてしまった可能性も考えられた。結果として上記事由につきその後の研究が遅れ、OR7C1特異的に反応するCTLの誘導の段階へは達成できなかった。
最後に、OR7C1は大腸癌おいては癌幹細胞ともいえる細胞集団に特に強く発現しており、遺伝子発現の多寡により造腫瘍能および薬剤耐性に差を認めることは確認できており、幹細胞性の関与について今後も研究を継続する方針である。

研究成果

• [雑誌論文] Expression of hepatocyte growth factor in prostate cancer may indicate a biochemical recurrence after radical prostatectomy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nishida S, Hirohashi Y, Torigoe T., Nojima M, Inoue R, Kitamura H, Tanaka T, Asanuma H, Sato N, Masumori N.
  • 雑誌名: Anticancer Res 巻: 35 ページ: 413-418
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cancer-Associated Oxidoreductase ERO1-alpha Drives the Production of Tumor-Promoting Myeloid-Derived Suppressor Cells via Oxidative Protein Folding. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Kajiwara T, Torigoe T., Okamoto Y, Sato N, Tamura Y.
  • 雑誌名: J Immunol 巻: 194 ページ: 2004-2010
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1402538
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Phase I Clinical Study of Survivin-Derived Peptide Vaccine for Patients with Advanced Gastrointestinal Cancers. (2015)
  • 著者名/発表者名: Satomi F, Shima H, Mizuguchi T, Torigoe T, Kutomi G, Kimura Y, Hirohashi Y, Tamura Y, Tsukahara T, Kanaseki T, Takahashi A, Asanuma H, Ito Y, Hayashi H, Sugita O, Sato N and Hirata K.
  • 雑誌名: Int J Cancer Clin Res 巻: 2 ページ: in press
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Prognostic value of HLA class I expression in patients with colorectal cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iwayama Y, Tsuruma T, Mizuguchi T, Furuhata T, Toyota N, Matsumura M, Torigoe T, Sato N, Hirata K.
  • 雑誌名: World Journal of Surgical Oncology 巻: 13 ページ: in press
  • DOI: 10.1186/s12957-015-0456-2
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A dose-escalation study of oxaliplatin/capecitabine/irinotecan (XELOXIRI) and bevacizumab as a first-line therapy for patients with metastatic colorectal cancer. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sato Y, Ohnuma H, Hirakawa M, Takahashi M, Osuga T, Okagawa Y, Murase K, Takada K, Kawano Y, Iyama S, Hayashi T, Sato T, Miyanishi K, Takimoto R, Kobune M, Okita K, Mizuguchi T, Furuhata T, Hirata K, Kato J
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 巻: 75 ページ: 587-597
  • DOI: 10.1007/s00280-014-2672-9.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Trials of vaccines for pancreatic ductal adenocarcinoma: Is there any hope of an improved prognosis? (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizuguchi T, Torigoe T, Satomi F, Shima H, Kutomi G, Ota S, Ishii M, Hayashi H, Asakura S, Hirohashi Y, Meguro M, Kimura Y, Nishidate T, Okita K, Ishino M, Miyamoto A, Hatakenaka M, Sato N, Hirata K.
  • 雑誌名: Surg Today 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1007/s00595-015-1120-8
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Prognostic impact of human leukocyte antigen class I expression and association of platinum resistance with immunologic profiles in epithelial ovarian cancer. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mariya T, Hirohashi Y, Torigoe T., Asano T, Kuroda T, Yasuda K, Mizuuchi M, Sonoda T, Saito T, Sato N
  • 雑誌名: Cancer Immunol Res 巻: 2 ページ: 1220-1229
  • DOI: 10.1158/2326-6066
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Heat shock protein DNAJB8 is a novel target for immunotherapy of colon cancer-initiating cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Morita R, Nishizawa S, Torigoe T., Takahashi A, Tamura Y, Tsukahara T, Kanaseki T, Sokolovskaya A, Kochin V, Kondo T, Hashino S, Asaka M, Hara I, Hirohashi Y, Sato N
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 105 ページ: 389-395
  • DOI: 10.1111/cas.12362.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Specific targeting of a naturally presented osteosarcoma antigen, papillomavirus binding factor peptide, using an artificial monoclonal antibody. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukahara T, Emori M, Murata K, Hirano T, Muroi N, Kyono M, Toji S, Watanabe K, Torigoe T., Kochin V, Asanuma H, Matsumiya H, Yamashita K, Himi T, Ichimiya S, Wada T, Yamashita T, Hasegawa T, Sato N.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 289 ページ: 22035-22047
  • DOI: 10.1074/jbc.M114.568725
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Fibroblasts induce expression of FGF4 in ovarian cancer stem-like cells/cancer-initiating cells and upregulate their tumor initiation capacity. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasuda K, Torigoe T., Mariya T, Asano T, Kuroda T, Matsuzaki J, Ikeda K, Yamauchi M, Emori M, Asanuma H, Hasegawa T, Saito T, Hirohashi Y, Sato N.
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 94 ページ: 1355-1369
  • DOI: 10.1038/labinvest.2014.122
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Targeting tight junctions during epithelial to mesenchymal transition in human pancreatic (2014)
  • 著者名/発表者名: Kyuno D, Yamaguchi H, Ito T, Kono T, Kimura Y, Imamura M, Konno T, Hirata K, Sawada N,
  • 雑誌名: World J Gastroenterol. 巻: 30 ページ: 10813-10824
  • DOI: 10.3748/wjg.v20.i31.10813.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Exploration of cancer stem cell/cancer-initiating cell antigens and clinical application to peptide vaccine therapy (2014)
  • 著者名/発表者名: 鳥越 俊彦
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 2014-09-26
• [学会発表] The latest finding from SUCCESS : A phase I study of SVN-2B vaccination for metastatic gastrointestinal cancer patients (2014)
  • 著者名/発表者名: 島 宏彰、水口 徹、里見 蕗乃、九冨 五郎、信岡 隆幸、木村 康利、古畑 智久、廣橋 良彦、鳥越 俊彦、佐藤 昇志、平田 公一
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 2014-09-26
• [学会発表] SVN-2Bペプチドがんワクチン療法：第Ⅰ相臨床試験”SUCCESS"から得た最新の知見 (2014)
  • 著者名/発表者名: 島 宏彰、水口 徹、里見 蕗乃、九冨 五郎、信岡 隆幸、木村 康利、古畑 智久、亀嶋 秀和、高橋あかり、塚原 智英、金関 貴幸、廣橋 良彦、鶴間 哲弘、岩山 祐司、田村 保明、鳥越 俊彦、佐藤 昇志、平田 公一
  • 学会等名: 第18回日本がん免疫学会総会
  • 発表場所: ひめぎんホール（松山市）
  • 年月日: 2014-07-31