エピジェネティクスリセットによる革新的ヒト肝発癌メカニズム解析

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24659593
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 外科学一般
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 関根 圭輔 横浜市立大学, 医学部, 助教 (00323569)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 癌 / エピジェネティクス

研究概要

HCC細胞株に対し山中4因子を導入したところ、約2週間後にiPS細胞様のコロニーが形成された。形成されたコロニーを顕微鏡下で取得し、独立に培養し形態観察、遺伝子発現解析、免疫不全マウスへの移植を行った。未分化マーカーおよび肝細胞マーカーの発現はHCC細胞株に較べ、肝細胞マーカーであるHNF4の発現低下と未分化マーカーであるSox2の発現上昇が見られた。しかしながら、未分化マーカーの発現はiPS細胞と較べ低かった。免疫不全マウス(NOD/scid)の精巣へ移植しテラトーマ形成の有無を検証した。すると樹立したクローンからテラトーマの形成は見られなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Tropism of cancer stem cells to a specific distant organ (2014)
  • 著者名/発表者名: Okuda R, Sekine K, Hisamatsu D, Ueno Y, Takebe T, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: In Vivo 巻: 28(3) ページ: 361-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] The CD133+CD44+ Precancerous Subpopulation of Oval Cells is a Therapeutic Target for Hepatocellular (2014)
  • 著者名/発表者名: Zheng YW, Tsuchida T, Shimao T, Li B, Takebe T, Zhang RR, Sakurai Y, Ueno Y, Sekine K, Ishibashi N, Imajima M, Tanaka T, Taniguchi H
  • 雑誌名: Carcinoma Stem Cells Dev 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescent labeling and visualization of human induced pluripotent stem cells with the use of transcription activatore like effector nucleases (2014)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) ページ: 1205-7
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2014.02.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ring1B promotes hepatic stem/ progenitor cell expansion via simultaneous suppression of Cdkn1a and Cdkn2a (2014)
  • 著者名/発表者名: Koike H, Ueno Y, Naito T, Shiina T, Nakata S, Ouchi R, Obana Y, Sekine K, Zheng YW,Takebe T, Isono KI, Koseki H, Taniguchi H
  • 雑誌名: Hepatology
  • DOI: 10.1002/hep.27046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Engineering of human hepatic tissue with functional vascular networks (2014)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Koike N, Sekine K, Fujiwara R, Amiya T, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: Organogenesis 巻: 10(2)(Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant (2014)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Zhang RR, Koike H, Kimura M, Yoshizawa E, Enomura M, Koike N, Sekine K, Taniguchi H
  • 雑誌名: Nature Protocols 巻: 9 ページ: 396-409
  • DOI: 10.1038/nprot.2014.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evidence of a sophisticatedly heterogeneous population of human umbilical vein endothelial cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Zheng YW, Nie YZ, Tsuchida T, Zhang RR, Aoki K, Sekine K, Ogawa M, Takebe T, Ueno Y, Sakakibara H, Hirahara F, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) ページ: 1251-3
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.11.077
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of proliferating human hepatic cells from human induced pluripotent stem cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Zhang R, Takebe T, Sekine K, Koike H, Zheng Y, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) ページ: 1201-4
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.12.021
  • 査読あり
• [雑誌論文] The development of humanized liver with Rag1 knockout rats (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchida T, Zheng YW, Zhang RR, Takebe T, Ueno Y, Sekine K, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) ページ: 1191-3
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.12.026
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-resolution intravital imaging for monitoring the transplanted islets in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Takebe T, Enomura M, Koike N, Lee S, Nemeno JG, Sekine K, Lee JI, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 46(4) ページ: 1166-8
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2013.11.089
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vascularized and functional human liver tissue from an induced pluripotent stem cell-derived organ bud transplant (2013)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Sekine K, Enomura M, Koike H, Kimura M, Ogaeri T, Zhang RR, Ueno Y, Zheng YW, Koike N, Aoyama S, Adachi Y, Taniguchi H
  • 雑誌名: Nature 巻: 499(7459) ページ: 481-484
  • DOI: 10.1038/nature12271
  • 査読あり
• [雑誌論文] The generation of pancreaticβ-cell spheroids in a simulated microgravity culture system (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka H, Tanaka S, Sekine K, Kita S, Okamura A, Takebe T, Zheng YW, Ueno Y, Tanaka J and Taniguchi H
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: 34(23) ページ: 5785-5791
  • DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.04.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitamin D Receptor in osteoblasts Is a negative regulator of bone mass control (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Y, Yoshizawa T, Fukuda T, Shirode-Fukuda Y, Yu T, Sekine K, Sato T, Kawano H, Aihara KI, Nakamichi Y, Watanabe T, Shindo M, Inoue K, Inoue E, Tsuji N, Hoshino M, Karsenty G, Metzger D, Chambon P, Kato S, Imai Y
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 154(3) ページ: 1008-1020
  • DOI: 10.1210/en.2012-1542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of Automated Culture System for Induced Pluripotent Stem Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Koike H, Kubota K, Sekine K, Takebe T, Zheng YW, Ueno Y, Tanigawa N, Taniguchi H
  • 雑誌名: BMC Biotechnol 巻: 12 ページ: 81
  • DOI: 10.1186/1472-6750-12-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of Stabilin-2 elevates the circulating hyaluronic acid level and prevents tumor metastasis (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirose Y, Saijou E, Sugano Y, Takeshita F, Nishimura S, Nonaka H, Chen YR, Sekine K, Kido T, Nakamura T, Kato S, Kanke T, Nakamura K, Nagai R, Ochiya T, Miyajima A
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A 巻: 109 (11) ページ: 4263-4268
  • DOI: 10.1073/pnas.1117560109
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regenerative medicine approach as an alternative treatment to islet transplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Enomura M, Matsui C, Tanaka H, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) ページ: 1104-1106
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly efficient generation of definitive endoderm lineage from human induced pluripotent cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Suzuki Y, Kamiya A, Nakauchi H, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) ページ: 1127-1129
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Self-organization of human hepatic organoid by recapitulating organogenesis in vitro (2012)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Sekine K, Suzuki Y, Enomura M, Tanaka S, Ueno Y, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) ページ: 1018-1020
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.02.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of human vascular network in vitro (2012)
  • 著者名/発表者名: Takebe T, Koike N, Sekine K, Enomura M, Ueno Y, Zheng YW, Taniguchi H
  • 雑誌名: Transplant Proc 巻: 44(4) ページ: 1130-1133
  • DOI: 10.1016/j.transproceed.2012.03.039
  • 査読あり
• [学会発表] 膵癌幹細胞の系譜解析に向けたin vitroアッセイ系の構築 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久松大介、奥田諒、関根圭輔、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20140304-06
• [学会発表] Pdx1陽性細胞は高い腫瘍形成能とスフィア形成能を有する癌幹細胞である (2013)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、関根圭輔、孫略、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20131003-05
• [学会発表] 膵幹/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20131003-05
• [学会発表] ヒト膵癌幹細胞における治療抵抗性機構の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 星野小百合、関根圭輔、孫略、中田晋、寺崎哲也、森永総一郎、宮城洋平、遠藤格、横瀬智之、倉田昌直、上野康晴、谷口英樹
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20131003-05
• [学会発表] Targeted proteomic absolute quantification on transporters of human pancreatic cancer cells with gemcitabine-resistance (2013)
  • 著者名/発表者名: Ueno Y, Hoshino S, Tsuchida N, Nakata S, Uchida Y, Sekine K, Zheng YW, Kurata M, Morinaga S, Miyagi Y, Yokose T, Endo I, Terasaki T, Hirano H, Taniguchi H
  • 学会等名: HUPO 12th annual world congress
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 年月日: 20130914-18
• [学会発表] Fluorescence visualizaiton of human induced pluripotent stem cells using transcription activator-like(TAL) effector nucleases (2013)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Takebe T, Zhang R, Taniguchi H
  • 学会等名: The 13th Congress of the Asian Society of Transplantation
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 20130902-06
• [学会発表] 膵癌幹細胞のin vitroアッセイ系の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 奥田諒、孫略、関根圭輔、松井智栄美、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20121211-14
• [学会発表] 膵癌モデルマウスを用いた膵癌幹細胞の細胞系譜解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 孫略、奥田諒、関根圭輔、盛武敬、坪井康次、谷口英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120919-21
• [学会発表] 膵肝/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120919-21
• [学会発表] Identification of pancreatic stem/progenitor cells expressing PDX1 reside in the CD133 positive pancreatic duct (2012)
  • 著者名/発表者名: Sekine K, Ishikawa M, Takebe T, Suzaki A, Kawashimo K, Matsui C, Taniguchi H
  • 学会等名: International Society for Stem Cell Research 10^<th> annual meeting
  • 発表場所: Yokohama,Japan
  • 年月日: 20120613-16