| 研究概要 |
１． GFPを導入したマウス大腸癌細胞colon26細胞を作成し、同系のマウスへの足部皮下腫瘍作成モデルを確立した。
２． 所属リンパ節を採取し、その中の腫瘍細胞を同定するとともに、免疫細胞（リンパ球、抗原提示細胞）のphenotypeをFACSにて測定した。担癌マウスのリンパ節はコントロールマウスと比べ、CD11b+Gr1＋のmyeloid derived suppressor cells (MDSC),およびCD19(+)B細胞の分画が59%～120%程度に有意に増加しており、逆にCD3(+)CD4(+)のhelper T 細胞の比率が約1/4に低下していた。しかし、CD4(+) CTLA-4(+)の制御性T細胞の比率には変化がなかった。
３． リンパ節から分離したCD4リンパ球を、CD3抗体CD28抗体を用いて刺激する実験系にて、低酸素, 低栄養の影響を検討した。CD4(+)細胞の増殖は、0.1% O2条件で約50％、glucose除去条件で20%程度に有意に低下した。FACSを用いた細胞内サイトカインの測定では、IL-4産生細胞の比率は変化を認めなかったが、IFN-gの発現はglucose除去条件でほぼ完全に消失した。
４． GPF-colon26細胞とCD14(+)脾臓細胞の共培養系でHypoxia, Hypoglycemiaの影響を検討しところ、colon26の細胞内取り込みは0.1% O2条件、glucose除去条件で約20%程度に低下した。この作用はオートファジー阻害剤3MAで抑制されたが、クロロキンでは抑制されなかった。
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