無血清エンブリオイドボディ培養法によるマウス・ヒトｉＰＳ細胞からの顎骨・歯胚誘導

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24659894
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 外科系歯学
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 岡本 哲治 広島大学, 医歯薬保健学研究院(歯), 教授 (00169153)
• 研究分担者: 福井 康人 広島大学, 大学院医歯薬保健学研究院, 助教 (90363085)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 無血清培養 / エンブリオボディー培養 / iPS 細胞 / 顎骨誘導 / 歯胚誘導 / テラトーマ / ３胚葉 / 多分化能

研究概要

ESF7培地を用いた無血清胚様体培養系でFGF-2はmiPSの歯胚前駆細胞への分化を誘導した。フィーダー細胞を用いずにhESF9培地でヒト歯髄細胞にretro virus vectorを用いてOct3/4, Sox2, Klf4, c-Myc遺伝子を導入しhiPSCsを誘導した。hiPSCsはpluripotencyを保持し胚様体およびテラトーマで3胚葉分化を示した。hESF9培地にTGF-β1を添加することでhiPSCsの多能性は長期間維持された。本培養系を用いることで細胞増殖因子などに対するiPS細胞の細胞分化への影響を明らかにし、病原体などのリスクを排除することができる。

研究成果

• [雑誌論文] 1α,25(OH)2D3 inhibits FGF-2 release from oral squamous cell carcinoma cells through downregulation of HBp17/FGFBP-1 (2014)
  • 著者名/発表者名: S. N. Zawani B. Rosli, Tomoaki Shintani, Shigeaki Toratani, Emiko Usui, Tetsuji Okamoto
  • 雑誌名: In Vitro Cell.Dev.Biol.-Animal 巻: (in press)
  • DOI: 10.1007/s11626-014-9787-5.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of human induced pluripotent stem (iPS) cells in serum- and feeder-free defined culture and TGF-β1 regulation of pluripotency (2014)
  • 著者名/発表者名: Sachiko YAMASAKI, Yuki TAGUCHI, Akira SHIMAMOTO, Hanae MUKASA, Hidetoshi TAHARA, Tetsuji OKAMOTO
  • 雑誌名: PlosONE, Published
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0087151.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term serial cultivation of mouse induced pluripotent stem cells in serum-free and feeder-free defined medium (2013)
  • 著者名/発表者名: YAMASAKI S, NABESHIMA K, SOTOMARU Y, TAGUCHI Y, MUKASA H, FURUE MK, SATO JD, OKAMOTO T
  • 雑誌名: International Journal of Developmental Biology 巻: 57(9-10) ページ: 715-24
  • DOI: 10.1387/ijdb.130173to.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biomedical advances from tissue culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Okamoto T, Sato JD, Barnes DW, Sato GH
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: 65(6) ページ: 967-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ectomesenchymal chondromyxoid tumor of the tongue : insight on histogenesis (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka Y, Ogawa I, Tsunematsu T, Sakaue T, Yamasaki S, Fukui Y, Hayashido Y, Toratani S, Okamoto T
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 巻: 115(2) ページ: 233-40
  • 査読あり
• [雑誌論文] 鎖骨頭蓋異形成症患者歯髄由来細胞を用いた疾患特異的ヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)の樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向笠英恵、山崎佐知子、田口有紀、嶋本顕、田原栄俊、岡本哲治
  • 雑誌名: 日本口腔組織培養学会誌 巻: 第22巻 ページ: 15-16
• [雑誌論文] Ameloblastic carcinoma, secondary type, of the mandible : a case report (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka Y, Toratani S, Ogawa I, Okamoto T
  • 雑誌名: J Oral Maxillofac Surg 巻: 71(1) ページ: 58-62
  • 査読あり
• [雑誌論文] 1α,25OH2D3 down-regulates HBp17/FGFBP-1 expression via NF-κB pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Rosli SN, Shintani T, Hayashido Y,Toratani S, Usui E, Okamoto T
  • 雑誌名: J Steroid Biochem Mol Biol. 2013 巻: Jul;136(Epub) ページ: 98-101
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel cytotoxic polyoxygenated steroids from an Okinawan sponge Dysidea sp (2012)
  • 著者名/発表者名: Govindam SV, Choi BK, Yoshioka Y, Kanamoto A, Fujiwara T, Okamoto T, Ojika M
  • 雑誌名: Biosci Biotechnol Biochem 巻: 76(5)(Epub) ページ: 999-1002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclolobatrienw, a novel prenylated germacrene diterpene, from the soft coral Lobophytum pauciflorum (2012)
  • 著者名/発表者名: Govindam SV, Yoshioka Y, Kanamoto A, Fujiwara T, Okamoto T, Ojika M
  • 雑誌名: Bioorg Med Chem 巻: 20(2) ページ: 687-92
  • 査読あり
• [学会発表] (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukasa H., Yamasaki S. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2nd International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima.
  • 年月日: 20130210-11
• [学会発表] (2013)
  • 著者名/発表者名: Taguchi Y., Yamasaki S., ShimamotoA., Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2nd International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 20130210-11
• [学会発表] Down-regulation of HBp17/FGFBP-1 by 1α,25(OH)_2 D_3 inhibits FGF-2 distribution in oral squamous cell carcinoma cell line (2013)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z.、新谷智章、虎谷茂昭、笛吹恵美子、岡本哲治
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2013-12-04
• [学会発表] センダイウイルスを用いた無血清培養系におけるhiPS細胞の樹立と維持 (2013)
  • 著者名/発表者名: 濱田充子、山崎佐知子、赤木恵理、向笠英恵、田口有紀、大高真奈美、西村健、中西真人、岡本哲治
  • 学会等名: 第50回日本口腔組織培養学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-11-24
• [学会発表] 扁平上皮癌細胞でのオートファジーによるインテグリンαvのプロセシング (2013)
  • 著者名/発表者名: 末松美玲、林堂安貴、坂上泰士、藤井隆彦、岡本哲治
  • 学会等名: 第50回日本口腔組織培養学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-11-24
• [学会発表] Generation of disease-specific human induced pluripotent stem (iPS) cells from dental pulp cells of a patient with Cleidocranial dysplasia in serum- and feeder-free culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukasa H., Yamasaki S., Taguchi Y., Shimamoto A., Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: 5th Hiroshima Conference on Education Science in Dentistry
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-10-13
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells from dental pulp cells in serum free and feeder-free culture condition (2013)
  • 著者名/発表者名: Taguchi Y., Yamasaki S., Shimamoto A., Mukasa H., Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: 5th Hiroshima Conference on Education Science in Dentistry
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-10-13
• [学会発表] Generation of human induced pluripotent stem (iPS) cells in serum- and feeder-free defined culture from dental pulp cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamasaki S. and Okamoto T
  • 学会等名: 5th Hiroshima Conference on Education Science in Dentistry
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-10-13
• [学会発表] Participation of heterodimer formation with integrinαv subunit in the stability of integrinβ6 subunit in squamous cell carcinoma cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujii T., Hayashido Y., Sakaue T., Hamana T. and Okamoto T
  • 学会等名: 5th Hiroshima Conference on Education Science in Dentistry
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-10-13
• [学会発表] Immunoexpression of HBp17/ FGFBP-1, FGF-1, FGF-2 and CD34 in ameloblastomas (2013)
  • 著者名/発表者名: Nguyen T.T.,福井康人、笛吹恵美子、虎谷茂昭、岡本哲治
  • 学会等名: 第46回広島大学歯学会総会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2013-06-29
• [学会発表] 1α,25(OH)_2D_3 down-regulates HBp17/FGFBP-1 expression in oral squamous cell carcinoma cell line through VDR-NF-κB pathway (2013)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z.、新谷智章、林堂安貴、虎谷茂昭、笛吹恵美子、岡本哲治
  • 学会等名: 第46回広島大学歯学会総会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2013-06-29
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells from dental pulp cells in serum free and feeder-free culture condition (2013)
  • 著者名/発表者名: Taguchi Y., Yamasaki S., Shimamoto A., Mukasa H, Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: 2013 World congress on In Vitro Biology
  • 発表場所: Providence, Rhode Island, USA
  • 年月日: 2013-06-18
• [学会発表] Generation of disease-specific human induced pluripotent stem (iPS) cells from dental pulp cells of a patient with Cleidocranial dysplasia in serum- and feeder-free culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukasa H., Yamasaki S., Taguchi Y., Shimamoto A., Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: 2013 World congress on In Vitro Biology
  • 発表場所: Providence, Rhode Island, USA
  • 年月日: 2013-06-18
• [学会発表] Down-regulation of HBp17/FGFBP-1 by 1α,25(OH)_2D_3 inhibits FGF-2 activity in oral squamous cell carcinoma cell line (2013)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z., Shintani T., Toratani S., Usui E. and Okamoto T
  • 学会等名: 16th Workshop on Vitamin D
  • 発表場所: Sanfrancisco, California, USA
  • 年月日: 2013-06-13
• [学会発表] Immunohistochemical expression of FGFBP-1/HBp17, p53, Ki67 and CD34 in ameloblastomas (2013)
  • 著者名/発表者名: Nguyen T.T.、福井康人、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] 鎖骨頭蓋異形成症患者歯髄由来細胞を用いた疾患特異的ヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)の樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向笠英恵、山崎佐知子、田口有紀、嶋本顕、田原栄俊、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] 単層無血清培養系での歯髄由来細胞を用いたヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)の樹立および維持 (2013)
  • 著者名/発表者名: 田口有紀、山崎佐知子、嶋本顕、向笠英恵、田原英俊、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] 口腔扁平上皮癌におけるインテグリンβ6サブユニットの安定化に与えるαVサブユニットとの二量体形成の影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤井隆彦、林堂安貴、坂上泰士、浜名智昭、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] 口腔扁平上皮癌細胞におけるユビキチン/プロテアソーム系によるインテグリンβ8の翻訳後修飾 (2013)
  • 著者名/発表者名: 坂上泰士、林堂安貴、浜名智昭、藤井隆彦、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] Down-regulation of HBp17/FGFBP-1by 1α,25(OH)2D3 inhibits FGF-2 Activity in Oral Squamous Cell Carcinoma Cell Line (2013)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z.、新谷智章、林堂安貴、虎谷茂昭、笛吹恵美子、岡本哲治
  • 学会等名: 第67回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: 宇都宮
  • 年月日: 2013-05-23
• [学会発表] Analysis of binding site of ubiquitin ligase, human double minute 2 in integrinβ8 in oral squamous cell carcinoma cell lines (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakaue T., Hayashido Y., Hamana T., Fujii T. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2th International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-01-11
• [学会発表] 1α,25(OH)_2D_3 down-regulates FGF-BP expression through NFκB pathway (2013)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z., Shintani T., Hayashido Y., Toratani S., Usui E. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2th International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-01-11
• [学会発表] Generation of disease-specific human induced pluripotent stem (iPS) cells from dental pulp cells of a patient with Cleidocranial dysplasia in serum-and feeder-free culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukasa H., Yamasaki S. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2th International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-01-11
• [学会発表] Generation of induced pluripotent stem cells from dental pulp cells in serum-free and feeder-free culture condition (2013)
  • 著者名/発表者名: Taguchi Y., Yamasaki S., ShimamotoA., Tahara H. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2th International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-01-11
• [学会発表] Participation of heterodimer formation with integrinαv subunit in the stability of integrinβ8 subunit in squamous cell carcinoma cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujii T., Hayashido Y., Hamana T., Sakaue T. and Okamoto T
  • 学会等名: The 2th International Symposium Suggestion for the Renaissance from Radiation Disaster
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 2013-01-11
• [学会発表] YamasakiS., ShimamotoA., TaharaH. and Okamoto T (2012)
  • 著者名/発表者名: Generation of human induced pluripotent stem (iPS) cells in serum- and feeder-free defined culture from fetal lung fibroblasts and dental pulp
  • 学会等名: World congress on In Vitro Biology
  • 発表場所: Bellevue,Washington,USA
  • 年月日: 20120623-27
• [学会発表] 1α,25(OH)2D3down-regulates FGF-BP expression through NFκB pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Rosli S.N.Z., Shintani T., Hayashido Y., Toratani S., Usui E. and Okamoto T
  • 学会等名: 15th Workshop on Vitamin D
  • 発表場所: Houston, Texas, USA
  • 年月日: 20120620-22
• [学会発表] ヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)の単層無血清培養系の確立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田口有紀山、崎佐知子、嶋本顕、田原栄俊、岡本哲治
  • 学会等名: 第66回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 20120517-18
• [学会発表] 鎖骨頭蓋異形成症患者歯髄由来細胞を用いた疾患特異的ヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)の樹立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山崎佐知子、嶋本顕、田原栄俊、岡本哲治
  • 学会等名: 第66回NPO法人日本口腔科学会学術集会
  • 発表場所: Hiroshima
  • 年月日: 20120517-18
• [学会発表] 口腔がんに対する細胞治療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岡本哲治
  • 学会等名: 日中歯科医学大会
  • 発表場所: 中国・四川省・成都
  • 年月日: 20120427-0430
  • 招待講演