研究課題/領域番号 |
24687020
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研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
田中 秀明 大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (40346169)
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研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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キーワード | ボルト / 脂質ラフト / X線結晶構造解析 |
研究概要 |
我々が2009年に報告した3.5オングストローム分解能のボルトの構造では、ウェスト周辺の電子密度がディスオーダーしており、このことからボルトのウェスト部分(MVPのN末端同士)の会合は非常に弱く、そのために高分解能結晶を得る事が難しいのではないかと考えた。そこで、MVPのN末端上流をロイシンジッパー(LZ)で固定した粒子(LZボルト)を作成することを考え、昆虫細胞を用いた大量発現系の構築に成功した。その結果、非常に均一な安定したボルト粒子を作成することができ、本試料を用いて作成した結晶はSPring-8のBL44XUにおける回折実験で最高2.8オングストローム分解能の回折点を与えた。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
MVPのN末端上流をロイシンジッパーで固定したLZボルトを結晶化試料として用いることにより、SPring-8のBL44XUにおける回折実験で最高2.8オングストローム分解能の回折点を得る事に成功しており、平成26年度内の高分解能回折強度データ収集および構造決定の見通しが立った。
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今後の研究の推進方策 |
今後、さらに結晶凍結条件を最適化することで平成26年度内の高分解能回折強度データ収集が可能となるので、26年度前半に高分解能回折強度データ収集を完了し、後半には構造決定を成功させたい。
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次年度の研究費の使用計画 |
基金分の次年度に90万円を繰り越したため。 平成26年度の人件費として使用する。
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