マクロファージによる腎結石貪食作用の機能解析と溶解療法への応用

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24689060
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 岡田 淳志 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (70444966)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 尿路結石 / マクロファージ / op/op / M-CSF / M2 / 結晶貪食

研究実績の概要

[1]Mφ機能不全マウスへのM-CSF投与による腎結石予防効果：本年度は、このマウス腎から分離・抽出したマクロファージをマイクロアレイ解析でop/opで有意にM2関連遺伝子が発現低下していることを確認した。さらにマウス骨髄より抽出したマクロファージをLPS・GM-CSF投与でM1-Mφを誘導、IL-4・M-CSF投与でM2-Mφを誘導させ、各細胞にシュウ酸カルシウム一水和物(COM)結晶を暴露させた。この結果、M2のCOM結晶貪食率がM1よりも有意に多いことを確認した。加えて、本年、ここまでの成果を論文化した。
[2]結石形成に関わるヒト血中・尿中炎症関連蛋白のマルチプレックス解析：本年は追加解析並び、採取データの補正ソフトウェアによって、さらに正確なデータを採取し、測定項目による多変量解析によって、抗炎症性マクロファージ誘導因子であるIL-2が低値であることが、結石患者において有意に示された。
[3]共培養システムを用いたMφ結晶処理機能の制御法の開発：共焦点顕微鏡のZ-Stackイメージ(3次元階層イメージ解析)では、COM結晶が培養Mφ(J774.1)の中央に位置していることが観察された。貪食率の観察では、貪食阻害剤Cytochalasin Bを投与されていないJ774.1細胞は、投与された細胞よりも有意に高い貪食率を示した。次に、pH感受性色素pHrodoTMで標識されたS.aureus及びビーズは、J774.1に貪食されることによって、いずれも酸性環境を示す赤色に発色した。また、偏光顕微鏡によってJ774.1に貪食されたCOM結晶が同定された。また結晶と同部位にLysoTrackerで染色されたリソゾームが確認された。加えて、ガラスベースディッシュでの追跡観察において、J774.1の分裂に伴ってCOM結晶が細分化され、消失していく像が観察された。以上より、本研究の結果より、マクロファージはCOM結晶を能動的に貪食し、リソゾームの酸性環境下で処理する能力を有することが示された。現在この結果に関する論文を執筆中である。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

26年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Endoscopic combined intrarenal surgery for large calculi: Simultaneous use of flexible ureteroscopy and mini-percutaneous nephrolithotomy overcomes the disadvantageous of percutaneous nephrolithotomy monotherapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hamamoto Shuzo, Yasui Takahiro, Okada Atsushi, Taguchi Kazumi, Kawai Noriyasu, Ando Ryosuke, Mizuno Kentaro, Kubota Yasue, Kamiya Hiroyuki, Tozawa Keiichi, Kohri Kejiro
  • 雑誌名: Journal of Endourology 巻: 28 ページ: 28-33
  • DOI: 10.1089/end.2013.0361
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of prostate weight on perioperative outcomes of robot-assisted laparoscopic prostatectomy with a posterior approach to the seminal vesicle. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasui Takahiro, Tozawa Keiichi, Kurokawa Satoshi, Okada Atsushi, Mizuno Kentaro, Umemoto Yukihiro, Kawai Noriyasu, Sasaki Shoichi, Hayashi Yutaro, Kojima Yoshiyuki, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: Bio Med Central Urology 巻: 14 ページ: 6
  • DOI: 10.1186/1471-2490-14-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased crystal-cell interaction in vitro under co-culture of renal tubular cells and adipocytes by in vitro co-culture paracrine systems simulating metabolic syndrome. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ichikawa Jun, Okada Atsushi, Taguchi Kazumi, Fujii Yasuhiro, Li Zuo, Niimi Kazuhiro, Hamamoto Shuzo, Kubota Yasue, Umemoto Yukihiro, Itoh Yasunori, Yasui Takahiro, Kawai Noriyasu, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: Urolithiasis 巻: 42 ページ: 17-28
  • DOI: 10.1007/s00240-013-0612-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laparoendoscopic Single-Site Partial Nephrectomy Without Hilar Clamping Using a Microwave Tissue Coagulator. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawai Noriyasu, Yasui Takahiro, Umemoto Yukihiro, Kubota Yasue, Mizuno Kentaro, Okada Atsushi, Ando Ryosuke, Tozawa Keiichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: Journal of Endourology 巻: 28 ページ: 184-190
  • DOI: 10.1089/end.2013.0135
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term follow-up of nephrotoxicity in rats administered both melamine and cyanuric acid. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasui Takahiro, Kobayashi Takahiro, Okada Atsushi, Hamamoto Shuzo, Hirose Masahito, Mizuno Kentaro, Kubota Yasue, Umemoto Yukihiro, Kawai Noriyasu, Tozawa Keiichi, Bing Gao, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: BMC Research Notes 巻: 7 ページ: 87
  • DOI: 10.1186/1756-0500-7-87
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Paracrine Mechanism Involving Renal Tubular Cells, Adipocytes, and Macrophages Promotes Kidney Stone Formation in a Simulated Metabolic Syndrome Environment. (2014)
  • 著者名/発表者名: Li Zuo, Okada Atsushi, Yasui Takahiro, Taguchi Kazumi, Ito Yasuhiko, Hirose Yasuhiko, Fujii Yasuhiro, Niimi Kazuhiro, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Itoh Yasunori, Zuo Jiangang, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: The Journal of Urology 巻: 191 ページ: 1906-1912
  • DOI: 10.1016/j.juro.2014.01.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel effect of the inhibitor of mitochondrial cyclophilinD activation, N-methyl-4-isoleucine cyclosporine, on renal calcium crystallization. (2014)
  • 著者名/発表者名: Niimi Kazuhiro, Yasui Takahiro, Okada Atsushi, Hirose Yasuhiko, Kubota Yasue, Umemoto Yukihiro, Kawai Noriyasu, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: International Journal of Urology 巻: 21 ページ: 707-713
  • DOI: 10.1111/iju.12425
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gemcitabine and docetaxel, an effective second-line chemotherapy for lung metastasis of urothelial carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Naiki Taku, Kawai Noriyasu, Hashimoto Yoshihiro, Okamura Takehiko, Ando Ryosuke, Yasui Takahiro, Okada Atsushi, Etani Toshiki, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: International Journal of Clinical Oncology 巻: 19 ページ: 516-522
  • DOI: 10.1007/s10147-013-0574-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Developments in the technique of endoscopic combined intrarenal surgery in the prone split-leg position. (2014)
  • 著者名/発表者名: Shuzo Hamamoto, Takahiro Yasui, Atsushi Okada, Mitsuru Takeuchi, Kazumi Taguchi, Yuta Shibamoto, Yutaka Iwase, Noriyasu Kawai, Keiichi Tozawa, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: Urology 巻: 21 ページ: 565-570
  • DOI: 10.1016/j.urology.2014.04.020.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pitfalls of robot-assisted radical prostatectomy: A comparison of positive surgical margins between robotic and laparoscopic surgery. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tozawa Keiichi, Yasui Takahiro, Umemoto Yukihiro, Mizuno Kentaro, Okada Atsushi, Kawai Noriyasu, Takahashi Satoru, Kohri Kenjiro
  • 雑誌名: International Journal of Urology 巻: 21 ページ: 976-979
  • DOI: 10.1111/iju.12492
  • 査読あり
• [学会発表] A paracrine mechanism promotes kidney stone formation in a simulated metabolic syndrome environment using in vitro and in vivo studies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Okada Atsushi, Yasui Takahiro, Zou Li, Unno Rei, Fujii Yasuhiro, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Itoh Yasunori, Tozawa Keiichi, Sasaki Shoichi, Rodgers Allen, Kohri Kenjiro
  • 学会等名: 2nd of Experts in Stone Disease (ESD)
  • 発表場所: Cape Town（South Africa）
  • 年月日: 2014-12-10 – 2014-12-13
• [学会発表] ロボット支援腹腔鏡手術創の疼痛・満足度に関わる因子 (2014)
  • 著者名/発表者名: 岡田 淳志、黒川 覚史、水野 健太郎、安井 孝周、梅本 幸裕、河合 憲康、戸澤 啓一、佐々木 昌一、林 祐太郎、郡 健二郎
  • 学会等名: 第28回日本泌尿器内視鏡学会
  • 発表場所: ヒルトン福岡シーホーク（福岡県福岡市）
  • 年月日: 2014-11-26 – 2014-11-28
• [学会発表] Possible new urine markers for calcium oxalate “stone formers”: macrophage-related cytokines/chemokines detected by multiplex analysis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Okada Atsushi, Yasui Takahiro, Taguchi Kazumi, Fujii Yasuhiro, Niimi Kazuhiro, Hamamoto Shuzo, Hirose Masahito, Ando Ryosuke, Kubota Yasue, Itoh Yasunori, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
  • 学会等名: American Urological Association Annual Meeting 2014
  • 発表場所: Orlando（USA）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-21
• [学会発表] マルチプレックス解析を用いた尿路結石患者に特異的な尿中マクロファージ関連因子の同定 (2014)
  • 著者名/発表者名: 岡田 淳志、田口 和己、藤井 泰普、新美 和寛、濵本 周造、安井 孝周、広瀬 真仁、戸澤 啓一、郡 健二郎
  • 学会等名: 第102回日本泌尿器科学会総会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-27
• [学会発表] 2.尿路結石の再発予防（2）薬物療法。 (2014)
  • 著者名/発表者名: 岡田 淳志
  • 学会等名: 第102回日本泌尿器科学会総会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-27
  • 招待講演