研究課題
αシヌクレイントランスジェニックマウス（A53変異；A53T-SNCA-TG）とp62ノックアウトマウス（p62-KO）を交配し、4系統のマウス（SNCA-/p62-、SNCA-/p62+、SNCA+/p62-、SNCA+/p62+）を作成した。病理組織学的科学的解析としてリン酸化αシヌクレインの抗体による免疫染色を行ったところ、p62の有無に関わらず、A53T変異遺伝子を導入したマウス（SNCA+/p62-、SNCA+/p62+）で脳内に封入体の形成が認められた。このことからp62がなくても封入体が形成されることが確認された。また「モーリス式水迷路試験法」を用いた空間記憶学習テストを行った結果、野生型（SNCA-/p62+）と比較して、遺伝子改変マウスではゴールへの到達時間が長くなる、または到達できない傾向があることが確認され、特にp62ノックアウトマウス（SNCA-/p62-、SNCA+/p62-）ではこの傾向が顕著であった。生化学的解析として、ドットブロット法を用いた封入体数の比較は次年度行う。
3: やや遅れている
授業や実習にかかる時間の関係上、また、交配により得られたマウスの離乳率、生存率の低さにより必要なマウスの数が揃い難いため、24年度に計画していたA53T-SNCA-TGとp62-KO交配マウスでの封入体数の比較、タウ変異遺伝子トランスジェニックマウスとp62ノックマウスの交配・解析が出来なかった。
24年度に実施できなかったαシヌクレイントランスジェニックマウス（A53T-SNCA-TG）とp62ノックアウトマウス（p62-KO）を交配して得られた4系統のマウス（SNCA-/p62-、SNCA-/p62+、SNCA+/p62-、SNCA+/p62+）での封入体数の定量比較、ならびにタウ変異遺伝子トランスジェニックマウス（P301L-Tau-TG）とp62（p62-KO）ノックマウスの交配による4系統のマウス（Tau-/p62-、Tau-/p62+、Tau+/p62-、Tau+/p62+）の作成と病理組織学的解析、リン酸化タウの生化学的定量比較、行動解析を行う。またNrf2が封入体形成に及ぼす影響を調べるため、αシヌクレイントランスジェニックマウスとNrf2ノックアウトマウスを交配した4系統のマウス（SNCA-/ Nrf2-、SNCA-/ Nrf2+、SNCA+/ Nrf2-、SNCA+/ Nrf2+）、ならびにタウトランスジェニックマウスとNrf2ノックアウトマウスを交配した4系統のマウス（Tau-/ Nrf2-、Tau-/ Nrf2+、Tau+/ Nrf2-、Tau+/ Nrf2+）を作成し、病理組織学的解析、封入体数の定量比較、行動解析を行う。さらに、p62、Nrf2の他に封入体形成に関与していると思われるNBR1（p62と相互作用するユビキチン化蛋白レセプター・アダプター）およびKeap1（p62、Nrf2と相互作用するユビキチンリガーゼ複合体）のαシヌクレイン封入体形成への関与を調べるため、24年度で得られたマウスの病変部位を用い、それぞれの抗体を用いた免疫組織化学的検討、ウェスタンブロットによる生化学的検討を行う。
・24年度に実施出来なかったA53T-SNCA-TGとp62-KO交配マウスを用いた脳内封入体数の定量比較、タウ変異遺伝子トランスジェニックマウスとp62ノックマウスの交配・解析に必要なマウスならびに試薬・抗体の購入費に前年度より繰り越した研究費を使用する。・研究結果の発表のための支出として、学会参加費およびそれに伴う旅費、論文投稿の為の英文校正・論文投稿費に使用する。
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Biochemical and Biophysical Research Communications
巻: 430 ページ: 394-399
10.1016/j.bbrc.2012.11.034
Journal of Neuropathology & Experimental Neurology
巻: 72 ページ: 18-28
10.1097/NEN.0b013e31827b5713
Neurobiology of Disease
巻: 49 ページ: 190-198
10.1016/j.nbd.2012.08.017
Neuroscience Letters
巻: 522 ページ: 134-138
10.1016/j.neulet.2012.06.026
