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【目的】脂肪酸は細胞死誘導能を持つと共に，プロテインキナーゼ（PKC）を活性化する．本研究では，脂肪酸で活性化され，細胞小器官に移行するPKCに注目し，脂肪酸を利用して，細胞小器官でのPKCの活性化機構と細胞死制御機構の解明，及びPKCが関与する疾患の病態解明や治療法を提示することを目指す．
【方法】細胞死への関与が報告されている代表的なPKCサブタイプ（alpha，gamma，delta，epsilon，zeta）を選択し，遺伝子クローニングと，Venus（蛍光タンパク質）融合タンパク質の発現ベクターを作製した．培養細胞を用いた過剰発現系を構築し，脂肪酸処理後の種々PKCサブタイプの局在変化や，脂肪酸自体の局在を，共焦点レーザー顕微鏡やラマン顕微鏡を用いて観察した．
【最終年度の成果】脂肪酸を細胞に処理すると，核近傍で観察される脂肪油滴（lipid droplet）が出現することを，lipid dropletを染色するNile Redを用いて確認した．ラマン顕微鏡を用いた解析から，細胞死を誘導する脂肪酸であるGLAやドコサヘキサエン酸（DHA）は，lipid dropletに局在する様子が観察された．
【期間全体の成果】検討したPKCサブタイプの内，PKCdeltaはGLAを処理すると，lipid dropletに局在するように見えたが，lipid dropletを染色するNile Redとの共局在は観察されなかった．またPKCepsilonは細胞質全体に広がる様子が観察され，PKCzetaは核近傍に集積する様子が観察された．
【今後の展開に関する計画】細胞内局在の判定のため各種オルガネラマーカーとの共染色と，脂肪酸処理後に見られるlipid dropletとの関係について調べる必要がある．
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