研究課題
本計画では、ヒトセントロメア領域から産出されるnon-coding RNA, Satellite I RNAの染色体分離における機能を解析している。一年目に、satellite I RNAが、染色体分離のキー因子であるAurora Kinase Bと結合することを見出し、この結合を介してsatellite RNAがAurora Bのリン酸化活性とセントロメア局在を制御することで、染色体分離に関わることを示した。本年度では、Aurora Bと同様にsatellite I RNAに結合し、その活性、局在等を制御される染色体分離関連因子を探索、同定することを目指した。間期および分裂期の細胞から、アンチセンスオリゴを用いてSatellite I RNAと結合因子との複合体（satellite I RNP)をプルダウンし、一緒に落ちてきた結合因子を質量分析により同定した。複数のRNA結合因子が同定されたが、その複合体組成は細胞周期の間期と分裂期では異なっており、RNPの構成が細胞周期の進行と共に変動することが明らかとなった。同定されたRNP構成成分候補のうちの一つ、RBMXはスプライシング因子としての機能は報告されていたが、これまで染色体分離への関与は考えられていなかった。免疫共沈実験によりSatellite I RNAが、RBMXと共沈したこと、siRNAによるRBMXのノックダウン細胞が、Satellite I RNAノックダウン細胞と同様の染色体分離異常の表現型である葡萄房様小核を示したことから、RBMXがsatellite I RNAに結合し、染色体分離過程に関与することが見出された。RBMXの他にもsatellite I RNA結合因子が同定されており、これらを解析することを通して、satellite i RNPによる染色体分離の制御機構が解明されることが期待される
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Genes to Cells
巻: 19 ページ: 1-11
http://www.sci.kumamoto-u.ac.jp/bio/staff/tani/index.htm
