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哺乳類における精子形成機構の分子レベルでの詳細は、今なお未解明の領域である。最近、我々は、精巣組織片を器官培養することに成功した。それによって精子幹細胞から精子産生までの精子形成の全過程をin vitroで再現することが可能になり、生体外で精子形成を解析することが可能となった。前年度までに幹細胞因子の欠如により精子幹細胞が分化できず、不妊となっているSl/Sldマウスの組織培養し、精子形成を誘発させる方法を開発した。これは、将来的に器官培養法が男性不妊の体外治療法へ応用可能であることを示す重要な結果であった。この培養法により、Colony stimulating factor-1(CSF1)とKit ligandと相乗的に作用し、精子形成が誘発され精子の産生されることが分かった。この培養により液性因子であるCSF1が精子形成に関与する可能性が示唆されたのに加え、CSF1レセプター(CSF1R)ノックアウトマウスは、精子産生が減少するとの報告も過去にあったため、精子形成への関与が強く示唆された。そこで本年度は、CSF1レセプター(CSF1R)ノックアウトマウスを入手し、精子形成におけるCSF1シグナルの役割を調査した。まず始めにCSF1シグナルが生殖系列細胞に直接働きかけるのか、あるいは間接的に近傍の体細胞へ働きかけることにより精子形成に関与するのかどうか明らかにすることにした。そのためCSF1Rノックアウトマウスをグリーンマウスとの交配により、GFPラベルし、そのマウスから培養精子幹細胞株を樹立した。それらの細胞株を正常なマウスへ移植し、精子形成がどのように変化するか調べた。その結果は、現在も解析中である。
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