2013 年度研究成果報告書

ＤＳＢ誘導実験系を用いたジーンターゲッティング効率向上因子のスクリーニング

研究課題

研究課題/領域番号	24780010
研究種目	若手研究(B)
配分区分	基金
研究分野	育種学
研究機関	独立行政法人農業生物資源研究所
研究代表者	遠藤真咲独立行政法人農業生物資源研究所, ゲノム機能改変研究ユニット, 研究員 (40546371)
研究期間 (年度)	2012-04-01 – 2014-03-31
キーワード	形質転換 / ジーンターゲッティング / 植物 / アグロバクテリウム / DNA二重鎖切断
研究概要	ゲノム中の特定の部位に任意のタイミングでDNA二重鎖切断を導入する為、誘導型I-SceI発現カセットならびに、I-SceI認識配列を内部に有するLuciferase遺伝子を形質転換したシロイヌナズナを作出し、標的遺伝子切断がジーンターゲッティング効率に及ぼす影響を評価した。その結果、相同組換えの鋳型を形質転換する際、同時に標的遺伝子切断を行うことでジーンターゲッティング効率が5-10倍上昇することが明らかとなった。またプロトプラストにおけるタンパク質の一過的発現系とDNA二重鎖切断誘導を組み合わせ、ChIP法によって発現タンパク質とDNA二重鎖切断部位との結合を評価する系を構築した。