植物の宿主特異的抵抗性における抵抗性タンパク質(R)による病原体非病原力エフェクター(Avr)の認識機構を分子レベルで理解する為,トウガラシ属のLタンパク質ファミリーと,これらに認識されるトバモウイルスの外被タンパク質(CP)をモデル実験系として,認識特異性並びに抵抗性反応強度とL-CP間相互作用のアフィニティとの関連性について解析した。 前年度までに,抵抗性タンパク質L4のLRRドメインのβシートモチーフへの変異導入により認識可能なCPの範囲が狭小化する変異体の作出と複数の変異箇所の組合せによって,認識特異性並びに抵抗性反応強度とL-CPタンパク質間相互作用のアフィニティの相関性があることを明らかにした。 本年度は,CP側の被認識部位の特定を目指し,L1およびL2に認識されず,L3およびL4に認識される野生型のトウガラシ微斑ウイルス岩手系統(PMMoV-Iw)のCP遺伝子配列にランダムに点変異を導入することによってLタンパク質による被認識アミノ酸残基又は部位を探索した。はじめにL3又はL4に認識されなくなる変異体を選抜した結果,L3またはL4の認識に必要なCP上のアミノ酸部位が異なることが明らかとなった。さらにL2に認識されるようになる変異体を選抜したところ,得られた変異体のアミノ酸変異部位は多様であり,立体構造上の部位は一部に集約されず全体に分散した。すなわち,LによるCP認識の標的部位は,特定の部位ではなく,複数の部位がターゲットになりうるものと考えられた。
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