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2012 年度 実施状況報告書

Src型チロシンキナーゼによるG2期DNA損傷チェックポイントリカバリー制御機構

研究課題

研究課題/領域番号 24790067
研究機関千葉大学

研究代表者

福本 泰典  千葉大学, 薬学研究科(研究院), 講師 (10447310)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
キーワード薬学 / シグナル伝達 / 癌 / DNA損傷 / 細胞周期
研究概要

【具体的内容】Src型チロシンキナーゼ(SFK)によるDNA損傷チェックポイントリカバリー制御機構の解析のために以下の項目を行った。(1)チェックポイントリカバリーにおけるSFKによるCdc5Lチロシンリン酸化について検討を行った。SFKによるCdc5Lチロシンリン酸化部位のリン酸化ミミック変異体はATRとのタンパク質-タンパク質相互作用が減弱していることを見出した。またSFKによるDNA損傷チェックポイント抑制の過程でCdc5Lがチロシンリン酸化を受けることを見出した(2)SFKによるDNA複製チェックポイントリカバリー制御について検討を行った。SFKの阻害に加えて、SFKの活性の亢進によってもやはりDNA複製チェックポイントリカバリーが遅延することを見出した。さらにSFK活性亢進による遅延の際にもやはりATR-Chk1経路の制御が関わっていることを見出した。(3)c-AblによるG2期DNA損傷チェックポイントリカバリー制御について検討を行った。その結果c-AblはSFKとは異なる機構でDNA損傷チェックポイントリカバリーを制御すること、またSFKおよびc-Ablに加えて新たにPDGFR/c-Kit様のチロシンキナーゼがDNA損傷チェックポイントリカバリーに関わることを見出した。
【意義】以上の解析からSFKを始めとするチロシンキナーゼがDNA損傷チェックポイントリカバリーの制御に重要であることが示された。【重要性】がんの治療効果に関わるDNA損傷チェックポイントリカバリー機構を人為的に制御する手段としてSFKを始めとするチロシンキナーゼの制御が有効な手段となりえることを示している。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

現在までに平成24年度の研究実施計画を遂行している。
(1)チェックポイントリカバリーにおけるSFKによるCdc5Lチロシンリン酸化を介したATR制御についての解析からは、ATR―Chk1経路におけるCdc5Lの制御に関するデータを得ている。さらにCdc5L以外にも、SFKによるATRーChk1経路制御に関連する可能性のあるチロシンリン酸化タンパク質を見出している。これらのチロシンリン酸化タンパク質のATR制御への関与についての解析は今後の研究の端緒となることが期待できる。(2)SFKによるDNA複製チェックポイントリカバリー制御についての解析からは、当初見出していたSFK阻害だけでなくSFKの活性亢進によってもDNA複製チェックポイントリカバリーの遅延が起きることが見出された。これはDNA複製反応そのものの制御にSFK活性の制御が重要であることを示しており、DNA複製反応制御のための新規のシグナル伝達機構として今後の発展が期待される。(3)c-AblによるG2期DNA損傷チェックポイントリカバリー制御についての解析からはSFKおよびc-Ablに加えてPDGFR・c-Kit様のチロシンキナーゼがDNA損傷チェックポイントリカバリー制御に関わる可能性が示されている。PDGFR・c-Kitは一部の消化管癌において発現が亢進していることが知られており、その治療戦略のなかで重要な分子標的となる可能性が臨床研究から示唆されている。DNA損傷チェックポイントリカバリー制御と癌治療の接点として今後の展開が期待される。

今後の研究の推進方策

(1)チェックポイントリカバリーにおけるSFKによるATM-Chk2経路制御  ATR-Chk1経路に加えて、G2期DNA損傷チェックポイントリカバリーの過程でATM-Chk2経路もやはりSFK阻害によって活性が亢進することを見出した。生理的意義付けのために、このSFK阻害依存的ATM-Chk2経路活性亢進に起因する表現系の探索として、Chk2依存的G2期DNA損傷チェックポイントリカバリーの解析を行う。
(2)チェックポイントリカバリーにおける核内SFKによるChk1翻訳後修飾の制御  G2期DNA損傷チェックポイントリカバリーの過程でSFKによる核内チロシンリン酸化依存的にChk1が翻訳後制御を受けることを見出した。このChk1翻訳後修飾はSFKによるChk1不活性化の際に観察されることから、SFKによるチェックポイントリカバリー制御に関連したものであると考えている。さらに、この翻訳後修飾と同時にChk1タンパク質量が増加することを見出している。Chk1のユビキチン依存的タンパク質分解との関連を中心に、チェックポイントリカバリーへの影響について細胞生物学的・生化学的に解析する。
(3)チェックポイントリカバリーにおけるSFKによるKap1制御  Kap1はDNA損傷応答の際にATMによってリン酸化されクロマチン構造制御に関与する。上記のChk1、Chk2に加えて、G2期DNA損傷チェックポイントリカバリーの過程でKap1のATM依存的リン酸化がSFK阻害によって亢進すること、またSFKによってKap1がチロシンリン酸化を受けることを見出している(日本薬学会関東支部大会2010)。生理的意義付けのために、SFK阻害によるATM依存的Kap1リン酸化亢進のクロマチン構造とチェックポイントリカバリーへの影響について解析する。

次年度の研究費の使用計画

平成25年度の研究費の使用計画として以下のものを予定している。
物品費: 1,200,000, 旅費: 50,000, 人件費・謝金: 50,000, その他: 100,000
物品費は牛血清・細胞培養用試薬・生化学用試薬・細胞生物学用試薬・遺伝子工学用試薬等の購入を予定している。
H24年度末未使用分として\1,480,781-が発生している。これは各種の経費節減策の結果である。試薬については海外メーカーからの価格の安い同一品の購入、培養については細胞培養の主なコストである牛胎児血清の仕様削減などを行っている。

  • 研究成果

    (35件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (32件)

  • [雑誌論文] v-Src causes delocalization of Mklp1, Aurora B, and INCENP from the spindle midzone during cytokinesis failure2013

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Soeda, Yuji Nakayama, Takuya Honda, Azumi Aoki, Naoki Tamura, Kohei Abe, Yasunori Fukumoto, Naoto Yamaguchi
    • 雑誌名

      Exp Cell Research

      巻: Epub ahead of print ページ: Apr 4

    • DOI

      10.1016/j.yexcr.2013.02.023.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nuclear ErbB4 signaling through H3K9me3 is antagonized by EGFR-activated c-Src2012

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Ishibashi, Yasunori Fukumoto, Hitomi Hasegawa, Kohei Abe, Shoichi Kubota, Kazumasa Aoyama, Sho Kubota, Yuji Nakayama, and Naoto Yamaguchi
    • 雑誌名

      J. Cell Sci

      巻: 126 ページ: 625-637

    • DOI

      10.1242/jcs.116277

    • 査読あり
  • [雑誌論文] c-Src but Not Fyn Promotes Proper Spindle Orientation in Early Prometaphase2012

    • 著者名/発表者名
      Yuji Nakayama, Yuki Matsui, Yumi Takeda, Mai Okamoto, Kohei Abe, Yasunori Fukumoto, and Naoto Yamaguchi
    • 雑誌名

      The Journal of Biological Chemistry

      巻: 287 ページ: 24905-24915

    • DOI

      10.1074/jbc.M112.341578

    • 査読あり
  • [学会発表] v-Src誘導発現によるS期遅延とcyclin Eの分解阻害2013

    • 著者名/発表者名
      本田 拓也、中山 祐治、添田 修平、阿部 紘平、森井 真理子、山口 千尋、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] ErbB4 によるヒストン修飾の誘導とチロシンリン酸化を介した制御2013

    • 著者名/発表者名
      石橋賢一, 福本泰典, 長谷川仁美, 久保田将一, 阿部紘平, 幸龍三郎, 青山和正, 久保田翔, 山口直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼFynの中心体局在と紡錘体形成における機能2013

    • 著者名/発表者名
      岡本 麻依, 長谷川 智津,中山 祐治, 武田 祐美, 盛永 敬郎, 福本 泰典, 山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] 分裂期スピンドル形成におけるSrcシグナリング2013

    • 著者名/発表者名
      武田 祐美,中山 祐治, 松井 優紀、岡本 麻依, 阿部 紘平, 福本 泰典, 山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] ATF2を介した細胞分裂期におけるリン酸化シグナリング2013

    • 著者名/発表者名
      長谷川 仁美, 石橋 賢一, 九鬼 和雅, 福本 泰典, 横山 和尚, 山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] Zinc-finger 型タンパク質 Lastin の機能: 細胞密度に依存した細胞増殖の抑制2013

    • 著者名/発表者名
      幸 龍三郎、青山 和正、石橋 賢一、福本 泰典、福田 道子、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] 極性細胞におけるSrc型チロシンキナーゼの局在解析:Lynの輸送2013

    • 著者名/発表者名
      柳瀬 さゆり、岩本 遼、千代 理恵子、岡本 彩、福本 泰典、中山 祐治、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] mimosineを用いたG1-S期境界への細胞周期同調2013

    • 著者名/発表者名
      久保田将一, 福本泰典, 石橋賢一, 三浦崇仁, 山口直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] イマチニブによるDNA損傷チェックポイントの増強とG2期停止の延長2013

    • 著者名/発表者名
      森井 真理子、福本 泰典、久保田 翔、青山 和正、三浦 崇仁、本田 拓也、中山 祐治、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] Lyn 細胞内膜分布のキナーゼ活性制御における役割2013

    • 著者名/発表者名
      盛永 敬郎, 阿部 紘平, 幸 龍三郎, 福本 泰典, 中山 祐治, 山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] SrcによるKAP1のチロシンリン酸化を介したヘテロクロマチン構造変換2013

    • 著者名/発表者名
      久保田 翔、福本 泰典、青山 和正、石橋 賢一、盛永 敬郎、本田 拓也、久家 貴寿、朝長 毅、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] G1期DNA損傷応答におけるSrc型チロシンキナーゼを介したATM-Chk2経路の制御2013

    • 著者名/発表者名
      九鬼 和雅、福本 泰典、森井 真理子、長谷川 仁美、石橋 賢一、久保田 翔、三浦 崇仁、山口 直人
    • 学会等名
      日本薬学会第133年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      20130327-20130330
  • [学会発表] Synbiotics 投与がリウマチ疾患モデルマウスにおける病態に及ぼす影響2013

    • 著者名/発表者名
      竹田真理子、渡辺健太、八木聡子、内田雅士、中里有希、鈴木佐季、竹内美穂、福本泰典、新井健一、山本晃平、増田和司、古川勝規、中村裕義、鈴木貴明、仲佐啓詳、有吉範高、北田光一、石井伊都子
    • 学会等名
      第28回日本静脈経腸栄養学会学術集会
    • 発表場所
      石川県立音楽堂他(金沢)
    • 年月日
      20130221-20130222
  • [学会発表] Chromatin structural changes by nuclear c-Abl-mediated tyrosine phosphorylation through histone deacetylation2012

    • 著者名/発表者名
      K. Aoyama, S. Kubota, R. Yuki, K. Ishibashi, Y. Horiike, M. Morii, Y. Fukumoto, and N. Yamaguchi
    • 学会等名
      The American Society for Cell Biology, 2012 Annual Meeting
    • 発表場所
      San Francisco, CA, USA
    • 年月日
      20121215-20121219
  • [学会発表] v-Src 発現によるAurora B 局在異常と分裂期への影響2012

    • 著者名/発表者名
      添田修平、中山祐治、本田拓也、山口千尋、福本泰典、山口直人
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場・マリンメッセ福岡(福岡)
    • 年月日
      20121214-20121216
  • [学会発表] 核内ErbB4 チロシンリン酸化によるH3K9me3 の誘導2012

    • 著者名/発表者名
      石橋賢一、福本泰典、長谷川仁美、阿部紘平、久保田将一、青山和正、久保田翔、中山祐治、山口直人
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場・マリンメッセ福岡(福岡)
    • 年月日
      20121214-20121216
  • [学会発表] DNA複製チェックポイントリカバリーにおけるSrc型チロシンキナーゼによるChk1制御2012

    • 著者名/発表者名
      三浦 崇仁、福本 泰典、久保田 将一、森井 真理子、本田 拓也、中山 祐治、山口 直人
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場・マリンメッセ福岡(福岡)
    • 年月日
      20121211-20121214
  • [学会発表] c-Abl チロシンキナーゼによる核内 F-actin の形成2012

    • 著者名/発表者名
      青山 和正、幸 龍三郎、堀池 保善、久保田 翔、石橋 賢一、森井 真理子、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム
    • 発表場所
      九州大学病院(福岡)
    • 年月日
      20120915-20120916
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼによるKAP1のチロシンリン酸化2012

    • 著者名/発表者名
      久保田 翔、福本 泰典、青山 和正、石橋 賢一、久家 貴寿、朝長 毅、山口 直人
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム
    • 発表場所
      九州大学病院(福岡)
    • 年月日
      20120915-20120916
  • [学会発表] Zinc-finger タンパク質 Lastin による細胞密度依存的な細胞増殖抑制2012

    • 著者名/発表者名
      幸 龍三郎、石橋 賢一、青山 和正、久保田 将一、福本 泰典、福田 道子、山口 直人
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム
    • 発表場所
      九州大学病院(福岡)
    • 年月日
      20120915-20120916
  • [学会発表] 分裂期スピンドル動態制御におけるSrc型チロシンキナーゼFynの機能2012

    • 著者名/発表者名
      岡本 麻依、中山 祐治、長谷川 智津、武田 祐美、盛永 敬郎、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      第11回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム
    • 発表場所
      九州大学病院(福岡)
    • 年月日
      20120915-20120916
  • [学会発表] v-Srcによるリン酸化を介した細胞周期異常と細胞周期制御タンパク質の増加

    • 著者名/発表者名
      本田 拓也、中山 祐治、添田 修平、青木 杏未、阿部 紘平、森井 真理子、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      生化学会関東支部例会
    • 発表場所
      群馬大学昭和キャンパス刀城会館(群馬)
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼFynによるスピンドル安定化を介した分裂期制御

    • 著者名/発表者名
      岡本 麻依、中山 祐治、武田 祐美、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      生化学会関東支部例会
    • 発表場所
      群馬大学昭和キャンパス刀城会館(群馬)
  • [学会発表] 分裂期におけるスピンドル近傍でのSrcシグナリング

    • 著者名/発表者名
      武田 祐美、中山 祐治、松井 優紀、岡本 麻依、阿部 紘平、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] イマチニブによるKAP1制御を介したG2期細胞周期停止の延長

    • 著者名/発表者名
      森井 真理子、福本 泰典、久保田 翔、青山 和正、三浦 崇仁、本田 拓也、中山 祐治、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] 極性細胞におけるSrc型チロシンキナーゼの局在解析:c-SrcとLynの比較検討

    • 著者名/発表者名
      柳瀬 さゆり、岩本 遼、千代 理恵子、岡本 彩、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼFynの細胞周期依存的なセントロソーム局在の解析

    • 著者名/発表者名
      長谷川 智津、中山 祐治、岡本 麻依、盛永 敬郎、福本 泰典、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] 細胞分裂期同調におけるv-Src誘導発現の影響

    • 著者名/発表者名
      山口千尋、中山祐治、本田拓也、添田修平、福本泰典、山口直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] G1/S 細胞周期同調における mimosine と thymidine の比較検討

    • 著者名/発表者名
      久保田 将一、福本 泰典、石橋 賢一、三浦 崇仁、中山 祐治、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼBrkの局在について

    • 著者名/発表者名
      井出雄大、福本泰典、久保田翔、長谷川仁美、久保田将一、長谷川智津、森井真理子、三浦崇仁、中山祐治、山口直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] Src型チロシンキナーゼLynの局在制御: Lynキナーゼドメイン会合分子の役割

    • 著者名/発表者名
      千代理恵子、岡本彩、小幡裕希、柳瀬さゆり、福本泰典、中山祐治、山口直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)
  • [学会発表] DNA損傷応答におけるATM-Chk2経路へのSrc型チロシンキナーゼの関与

    • 著者名/発表者名
      九鬼 和雅、福本 泰典、森井 真理子、長谷川 仁美、三浦 崇仁、山口 直人
    • 学会等名
      第56回日本薬学会関東支部大会
    • 発表場所
      昭和大学旗の台キャンパス(東京)

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公開日: 2014-07-24  

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