Ｓｒｃ型チロシンキナーゼによるＧ２期ＤＮＡ損傷チェックポイントリカバリー制御機構

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24790067
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 福本 泰典 千葉大学, 薬学研究科(研究院), 講師 (10447310)
• キーワード: 薬学 / シグナル伝達 / 癌 / DNA損傷 / 細胞周期

研究概要

【具体的内容】Src型チロシンキナーゼ（SFK）によるDNA損傷チェックポイントリカバリー制御機構の解析のために、以下の項目を行った。
（１）チェックポイントリカバリーにおけるSFKによるATM-Chk2経路制御について解析を行った。G2期DNA損傷チェックポイントリカバリーの過程で、ATM依存的Chk2およびKap1のリン酸化がSFK阻害によって亢進した。SFK阻害によるATM-Chk2活性亢進は、G2期損傷チェックポイント活性化の際にも観察された。またG2期に加えて非同調培養時においても観察された。
（２）SFKによるChk1翻訳後修飾の制御の解析のために、v-SrcによるATR-Chk1経路制御について解析を行った。v-SrcがATR依存的Rad17およびChk1のリン酸化を抑制することを見出した。またこの分子機構として、v-SrcがRad17複合体とRad9複合体の相互作用を阻害することを見出した。
（３）SFKによるKap1制御について解析を行った。Kap1がSFKによってチロシンリン酸化を受けることを見出した。またこのチロシンリン酸化はKap1のY449, Y458, Y517において誘導されることを見出した。さらにこのチロシンリン酸化によってDNA損傷応答後のATM依存的KAPのリン酸化が促進されることを見出した。この成果は誌上発表した。
【意義】以上の解析からSFKがATR-Chk1経路およびATM-Chk2経路の制御を担っていることが示された。
【重要性】化学療法の治療効果に関わるDNA損傷チェックポントの活性を人為的に操作する手段として、SFK阻害剤が有効である可能性が考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Activation of the pre-replication complex is blocked by mimosine through reactive oxygen species-activated ATM without DNA damage (2014)
  • 著者名/発表者名: Shoichi Kubota, Yasunori Fukumoto, Kenichi Ishibashi, Shuhei Soeda, Sho Kubota, Ryuzaburo Yuki, Yuji Nakayama, Kazumasa Aoyama, Noritaka Yamaguchi, and Naoto Yamaguchi
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 289 ページ: 5730-5746
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.546655
  • 査読あり
• [雑誌論文] Src family kinases promote silencing of ATR-Chk1 signaling in termination of DNA damage (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasunori Fukumoto, Mariko Morii, Takahito Miura, Sho Kubota, Kenichi Ishibashi, Takuya Honda, Aya Okamoto, Noritaka Yamaguchi, Atsushi Iwama, Yuji Nakayama, Naoto Yamaguchi
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1074/jbc.M113.533752
  • 査読あり
• [雑誌論文] v-Src causes delocalization of Mklp1, Aurora B, and INCENP from the spindle midzone during cytokinesis failure (2013)
  • 著者名/発表者名: Shuhei Soeda, Yuji Nakayama, Takuya Honda, Azumi Aoki, Naoki Tamura, Kohei Abe, Yasunori Fukumoto, and Naoto Yamaguchi
  • 雑誌名: Exp. Cell Res 巻: 319 ページ: 1382-1397
  • DOI: 10.1016/j.yexcr.2013.02.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of KRAB-associated Protein 1 (KAP1) at Tyr-449, Tyr-458, and Tyr-517 by Nuclear Tyrosine Kinases Inhibits the Association of KAP1 and Heterochromatin Protein 1 (HP1) with Heterochromatin (2013)
  • 著者名/発表者名: Sho Kubota, Yasunori Fukumoto, Kazumasa Aoyama, Kenichi Ishibashi, Ryuzaburo Yuki, Takao Morinaga, Takuya Honda, Noritaka Yamaguchi, Takahisa Kuga, Takeshi Tomonaga, Naoto Yamaguchi
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: 288 ページ: 17871-17883
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.437756
  • 査読あり
• [学会発表] 細胞周期G2/M期進行に及ぼすv-Src誘導発現の影響 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山口千尋、本田拓也、添田修平、久保田将一、長谷川仁美、福本泰典、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] Csk の Breast tumor kinase (Brk) に対するチロシンリン酸化と制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 井出 雄大,青山 和正,久保田 翔,幸 龍三郎,九鬼 和雅,山口 憲孝,福本 泰典,山口 直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] mimosineによるATM活性化を介したG1-S期境界への細胞周期停止 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久保田将一, 福本泰典, 石橋賢一, 添田修平, 久保田翔, 幸龍三郎, 青山和正, 山口憲孝, 山口直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] KAP1のチロシンリン酸化によるHP1αのヘテロクロマチン領域への結合阻害 (2014)
  • 著者名/発表者名: 久保田 翔、福本 泰典、青山 和正、石橋 賢一、幸 龍三郎、盛永 敬郎、本田 拓也、森井 真理子、山口 憲孝、久家 貴寿、朝長 毅、山口 直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] 分裂期に起こるactivating transcription factor (ATF) のスレオニンリン酸化による細胞周期進行への関与 (2014)
  • 著者名/発表者名: 長谷川 仁美, 石橋 賢一, 久保田 将一, 山口 千尋, 青山 和正, 幸 龍三郎, 福本 泰典, 山口 憲孝, 横山 和尚, 山口 直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] 密度勾配遠心法における Lyn の二峰性膜分布を介した活性制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 盛永敬郎、阿部紘平、本田拓也、福本泰典、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] Src型チロシンキナーゼによるATM依存的DNA損傷チェックポイントからのリカバリー促進 (2014)
  • 著者名/発表者名: 福本泰典, 九鬼 和雅, 森井 真理子, 三浦 崇仁, 本田 拓也, 石橋 賢一, 長谷川仁美, 久保田 翔, 井出 雄大, 山口憲孝, 中山 祐治, 山口 直人
  • 学会等名: 日本薬学会 第134年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20140327-20140330
• [学会発表] Tyrosine phosphorylation of KAP1 inhibits the association of KAP1 and HP1 with heterochromatin (2013)
  • 著者名/発表者名: Sho Kubota, Yasunori Fukumoto, Kazumasa Aoyama, Kenichi Ishibashi, Ryuzaburo Yuki, Takao Morinaga, Takuya Honda, Noritaka Yamaguchi, Takahisa Kuga, Takeshi Tomonaga, and Naoto Yamaguchi
  • 学会等名: 2013 ASCB annual meeting
  • 発表場所: New Orleans, LA, USA
  • 年月日: 20131214-20131218
• [学会発表] Src型チロシンキナーゼによるATM及び下流分子の活性制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 九鬼 和雅、福本 泰典、森井 真理子、長谷川 仁美、石橋 賢一、久保田 翔、三浦 崇仁、井出 雄大、山口 憲孝、山口 直人
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131203-20131206
• [学会発表] 極性細胞におけるSrc 型チロシンキナーゼの局在解析：誘導発現可能な細胞株の樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 柳瀬 さゆり、岩本 遼、大牟田 舞、岡本 彩、福本 泰典、山口 憲孝、山口 直人
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131203-20131206
• [学会発表] Analysis for Csk-mediated tyrosine phosphorylation of Breast tumor kinase (Brk) (2013)
  • 著者名/発表者名: Y. Ide, K. Aoyama, S. Kubota, R. Yuki, K. Kuki, N. Yamaguchi, Y. Fukumoto, N. Yamaguchi
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20131203-20131206
• [学会発表] Src 型チロシンキナーゼの細胞内膜分布制御機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 盛永敬郎、阿部紘平、本田拓也、福本泰典、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 第35回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131121-20131122
• [学会発表] スニチニブのDNA損傷応答に対する影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 米谷詩織、森井真理子、福本泰典、武田祐美、九鬼和雅、大牟田舞、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 第57回日本薬学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131026-20131026
• [学会発表] ATFファミリーのスレオニンリン酸化による細胞分裂期への影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 長谷川 仁美、石橋 賢一、久保田 将一、山口 千尋、福本 泰典、山口 憲孝、横山 和尚、山口 直人
  • 学会等名: 第57回日本薬学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131026-20131026
• [学会発表] mimosineによるチェックポイントを介したG1-S期移行阻害の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 久保田将一、福本泰典、石橋賢一、添田修平、久保田翔、幸龍三郎、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 第57回日本薬学会関東支部大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20131026-20131026
• [学会発表] 細胞浮遊化における Lyn の膜分布制御を介した活性化機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 盛永敬郎、阿部紘平、福本泰典、山口憲孝、山口直人
  • 学会等名: 第12回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム2013
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130914-20130915
• [学会発表] c-Srcのチロシンリン酸化活性に依存したリソソームの凝集 (2013)
  • 著者名/発表者名: 阿部 紘平、盛永 敬郎、久保田 翔、幸 龍三郎、本田 拓也、山口 憲孝、福本 泰典、久家 貴寿、橋本 裕希、朝長 毅、山口 直人
  • 学会等名: 第12回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム2013
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130914-20130915
• [学会発表] 細胞分裂期におけるATF2のスレオニンリン酸化の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 長谷川仁美, 石橋賢一, 久保田将一, 山口千尋, 福本泰典, 山口憲孝, 横山和尚, 山口直人
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20130911-20130913
• [学会発表] KAP1のチロシンリン酸化によるクロマチン構造変化と転写制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 久保田 翔、福本 泰典、青山 和正、石橋 賢一、幸 龍三郎、盛永 敬郎、本田 拓也、山口 憲孝、久家 貴寿、朝長 毅、山口 直人
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20130911-20130913
• [学会発表] Srcキナーゼ活性亢進による細胞質分裂阻害 (2013)
  • 著者名/発表者名: 添田修平，門脇志穂子，土橋遼，齊藤洋平，山岸伸行，福本泰典，山口直人, 中山祐治
  • 学会等名: 第60回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20130518-20130518