高感度ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法によるＣ型肝炎ウイルス遺伝子型の同定

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24790367
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 塩竈 和也 藤田保健衛生大学, 医学部, 助教 (10387699)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: in situハイブリダイゼーション法 / C型肝炎ウイルス / locked nucleic acid / ビオチンフリーチラミド増感法 / ヒト肝臓型HCV感染キメラマウス

研究概要

ロックド核酸/DNAキメラプローブとチラミド増感法を組み合わせた高感度in situハイブリダイゼーション法により、ホルマリン固定パラフィン切片上でのHCV-RNAの検出に成功した。ヒト肝臓型HCV感染キメラマウスおよび慢性C型肝炎の9/11例（98%）で陽性シグナルが認められた。慢性B型肝炎、脂肪肝、自己免疫性肝炎および肝細胞癌では、いずれも陰性だった。ネステッド逆転写PCR法では、8/11例（73%）でHCV-RNAが確認された（1b型6例、2a型2例）。高感度in situハイブリダイゼーション法によるHCV遺伝子型の同定は、HCV遺伝子型間での交差反応が生じたため鑑別困難だった。

研究成果

• [雑誌論文] Demonstration of Hepatitis C virus RNA with in situ hybridization employing a locked nucleic acid probe in humanized liver of infected chimeric mice and in needle-biopsied human liver (2013)
  • 著者名/発表者名: Shiogama K, Inaka KI, Kohara M, Teramoto H, Mizutani Y, Onouchi T, Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Int J Hepatol 巻: 249535
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ono S, Kodashima S, Fujishiro M, Tsutsumi Y, Ichinose M, Koike K. Cathepsin E is a marker of gastric differentiation and signet-ring cell carcinoma of stomach : a novel suggestion on gastric tumorigenesis (2013)
  • 著者名/発表者名: Konno-Shimizu M, Yamamichi N, Inada K, Kageyama-Yahara N, Shiogama K, Takahashi Y, Asada-Hirayama I, Yamamichi-Nishina M, Nakayama C
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 (2) ページ: e56766
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-sensitivity epidermal growth factor receptor immunostaining for colorectal carcinomas, compared with EGFR PharmDxTM : A study of diagnostic accuracy (2013)
  • 著者名/発表者名: Shiogama K, Wongsiri T, Mizutani Y, Inada K, Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Int J Clin Exp Pathol 巻: 6 (1) ページ: 24-30
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel approach to identifying autoantibodies in rheumatoid synovitis with a biotinylated human autoantigen library and the enzyme-labeled antigen method (2013)
  • 著者名/発表者名: Mizutani Y, Matsuoka K, Takeda H, Shiogama K, Inada KI, Hayakawa K, Yamada H, Miyazaki T, Sawasaki T, Endo Y, Tsutsumi Y
  • 雑誌名: J Immunol Method 巻: 387 (1-2) ページ: 57-70
  • 査読あり
• [雑誌論文] 病理標本の伸展および乾燥条件が染色性に与える影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山口大、塩竈和也、竹内沙弥花、水谷泰嘉、尾之内高慶、稲田健一、堤寛
  • 雑誌名: 検査と技術 巻: 41 (8) ページ: 698-702
  • 査読あり
• [学会発表] In situ hybridization AT-tailing法による重症熱性血小板減少症候群ウイルスの証明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塩竈和也、水谷泰嘉、尾之内高慶、小川博久、馬原文彦、稲田健一、堤寛
  • 学会等名: 第6回日本リケッチア症臨床研究会・第20回リケッチア研究会合同研究発表会
  • 発表場所: 大津市
  • 年月日: 2014-01-12
• [学会発表] 環境にやさしい染色法の確立 : グロコット染色およびアザン染色の改良 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩竈和也、水谷泰嘉、尾之内高慶、稲田健一、堤寛
  • 学会等名: 第45回藤田学園医学会
  • 発表場所: 豊明市
  • 年月日: 20131003-04
• [学会発表] すぐに実践できる環境にやさしいグロコット染色とアザン染色 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩竈和也、北沢佳代、磯崎勝、水谷泰嘉、尾之内高慶、稲田健一、堤寛
  • 学会等名: 第54回日本組織細胞化学会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 20130927-28
• [学会発表] 長期ホルマリン固定肝組織からのHCVゲノムの証明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩竈和也、寺本英已、水谷泰嘉、尾之内高慶、稲田健一、牧野正直、堤寛
  • 学会等名: 第102回日本病理学会総会
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 20130606-08
• [学会発表] 環境にやさしいグロコット染色の確立 : 無水クロム酸に依存しない改良法の技術開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩竈和也、水谷泰嘉、尾之内高慶、稲田健一、堤寛
  • 学会等名: 第102回日本病理学会
  • 発表場所: 札幌市
  • 年月日: 20130606-08
• [学会発表] HCV感染モデルマウスを用いた高感度in situ hybridization法によるHCVの検出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 稲田健一、塩竈和也、小原道法、水谷泰嘉、堤寛
  • 学会等名: 第101回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザ(東京都)
  • 年月日: 20120426-28
• [備考] 塩竈和也、堤寛.固定および包埋による抗原性の失活・流出.免疫染色玉手箱、技術.ニチレイバイオサイエンス、東京, 2013
  • URL: http://www.nichirei.co.jp/bio/tamatebako/index.html