翻訳後修飾アセチル化に着目した「新規関節リウマチ検査」の確立

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24790563
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 有戸 光美 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教 (00509911)
• キーワード: プロテオミクス / 翻訳後修飾 / アセチル化 / 関節リウマチ / 臨床検査

研究概要

関節リウマチ診断のための臨床血液検査では、血清中の抗シトルリン化ペプチド抗体・リウマチ因子の検出などが採用されているが、十分とは言えない。従って、従来の検査項目を補完するような新規検査項目が必要とされている。申請者は、前年度の研究で、関節リウマチ患者の末梢血においてalpha-enolase (ENO1)とイソクエン酸デヒドロゲナーゼのアセチル化が亢進していることを突き止めた。そこで、平成25年度は、1)ENO1のアセチル化の測定法の確立を含め、2)診断的意義を明らかにすることを目的とした。
上記1)の目的を達成するにあたり、アセチル化ENO1の診断指標としての有用性を評価する目的で、アセチル化ENO1の「アセチル化を受けているリジン残基とその周辺のアミノ酸配列」を認識する抗体を作製するために、関節リウマチ特異的に亢進しているENO1のアセチル化部位（リジン残基）の特定を試みた。被験試料であるENO1の調製法（ENO1量やプロテアーゼの種類など）や質量分析の条件等を複数検討し、関節リウマチ由来末梢血リンパ球由来ENO1のアセチル化部位の特定を試みたが、アセチル化ペプチドの検出は困難であった。次に、上記2)を遂行するにあたり、ENO1が、関節リウマチ特異的な自己抗体の抗原となりうるかについて調べるために、ENO1およびアセチル化ENO1を抗原とし（アセチル化ENO1は、リコンビナントで作製したENO1に、in vitroでアセチル化酵素およびアセチルCoAを作用させ、効率的にアセチル化させることで調製した。）、関節リウマチ患者血清を用いて、ウエスタンブロッティングを行ったところ、ENO1に反応する血清がいくつか認められが、アセチル化依存的な反応強度の変化は認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Proteomic analysis of whole glomeruli in patients with IgA nephropathy using microsieving. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kojima S, Koitabashi K, Iizuka N, Okamoto K, Arito M, Sato T, Kurokawa MS, Suematsu N, Shibagaki Y, Yasuda T, Kimura K, Kato T
  • 雑誌名: American journal of nephrology. 巻: 39 ページ: 36-45
  • DOI: 10.1159/000357788.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autoantigenicity of carbonic anhydrase 1 in patients with abdominal aortic aneurysm, revealed by proteomic surveillance (2013)
  • 著者名/発表者名: Ando T, Iizuka N, Sato T
  • 雑誌名: Human Immunology 巻: 74 ページ: 852-7
  • DOI: 10.1016/j.humimm.2013.02.009.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel anti-citrullinated peptide autoantibodies identified by proteomics with in vitro citrullinated proteins in patients with rheumatoid arthritis (2013)
  • 著者名/発表者名: Mitsui H, Arito M, Sato T, Yokoyama MK, Suematsu N, Okamoto K, Kurokawa MS, Yudo K, Nakamura H, Beppu M, Kato T
  • 雑誌名: Inflammation and Regeneration 巻: 33 ページ: 121-130
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative proteomic analysis of neutrophils from patients with microscopic polyangiitis and granulomatosis with polyangiitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchida T, Nagai K, Sato T, Iizuka N, Arito M, Takakuwa Y, Nakano H, Ooka S, Kurokawa MS, Suematsu N, Okamoto K, Ozaki S, Kato T.
  • 雑誌名: Journal of proteomics. 巻: 91C ページ: 259-269
  • DOI: 10.1016/j.jprot.2013.07.021.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel effects of edaravone on human brain microvascular endothelial cells revealed by a proteomic approach. (2013)
  • 著者名/発表者名: Onodera H, Arito M, Sato T, Ito H, Hashimoto T, Tanaka Y, Kurokawa MS, Okamoto K, Suematsu N, Kato T.
  • 雑誌名: Brain Res 巻: 1534 ページ: 87-94
  • DOI: 10.1016/j.brainres
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein profiles of peripheral blood mononuclear cells as a candidate biomarker for Behcet’s disease. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka T, Kurokawa MS, Sato T, Nagai K, Iizuka N, Arito M, Takakuwa Y, Nakano H, Ooka S, Suematsu N, Okamoto K, Yudoh K, Nakamura H, Suzuki N, Ozaki S, Kato T
  • 雑誌名: Clin Exp Rheumatol 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of serum fibrinogen α chain-derived peptides in Alzheimer’s disease. (2013)
  • 著者名/発表者名: Noguchi M, Sato T, Nagai K, Utagawa I, Suzuki I, Arito M, Iizuka N, Suematsu N, Okamoto K, Kato T, Yamaguchi N, Kurokawa MS.
  • 雑誌名: International Journal of Geriatric Psychiatry 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1002/gps.4047
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of sulfasalazine and tofacitinib on the protein profile of articular chondrocytes. (2013)
  • 著者名/発表者名: Endo W, Arito M, Sato T, Kurokawa MS, Omoteyama K, Iizuka N,Okamoto K, Suematsu N, Nakamura H, Beppu M, Kato T.
  • 雑誌名: Modern Rheum. 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.3109/14397595.2013.864225
  • 査読あり
• [学会発表] Serum peptides, represented by complement 3f des-arginine, are useful for prediction of the response to pegylated interferon-α plus ribavirin in patients with chronic hepatitis C (2013)
  • 著者名/発表者名: Yohei Noguchi, Manae S. Kurokawa, Chiaki Okuse, Nobuyuki Matsumoto, Kouhei Nagai, Toshiyuki Sato, Mitsumi Arito, Naoya Suematsu, Kazuki Okamoto, Michihiro Suzuki, Fumio Itoh, Tomohiro Kato
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Comprehensive analysis of aberrantly glycosylated proteins in rheumatoid arthritis (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Arito M, Kurokawa MS, Takakuwa Y, Ooka S, Nagai K, Nakamura H, Iizuka N, Suematsu N, Okamoto K, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Serum peptide profiles as a candidate biomarker for dementia with Lewy bodies (2013)
  • 著者名/発表者名: Itsuku Suzuki, Manae S. Kurokawa, Miwa Noguchi, Toshiyuki Sato, Itaru Utagawa, Mitsumi Arito, Nobuko Iizuka, Kazuki Omoteyama, Naoya Suematsu, Kazuki Okamoto, Noboru Yamaguchi, Tomohiro Kato
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Protein profiles of peripheral blood mononuclear cells as a biomarker for Behcet’s disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Takuya Yoshioka, Kurokawa MS, Sato T, Nagai K, Iizuka N, Arito M, Takakuwa Y, Nakano H, Ooka H, Suematsu N, Okamoto K, Nakamura H, Suzuki N, Ozaki S, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Comparative croteomic analysis of neutrophils from patients with microscopic polyangiitis and granulomatosis with polyangiitis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Uchida T, Nagai K, Sato T, Iizuka N, Arito M, Takakuwa Y, Nakano H, Ooka S, Kurokawa MS, Suematsu N, Okamoto K, Ozaki S, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Proteomic analysis of effects of antirheumatic drugs on exosomes derived from synovial sarcoma cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsuno H, Suematsu N, Sato T, Arito M, Iizuka N, Omoteyama K, Kurokawa MS, Okamoto K, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] 2D-DIGE analysis of cell surface proteins reveals characteristic proteome profiles for effects of sulfasalazine in human synovial sarcoma cell line (2013)
  • 著者名/発表者名: Omoteyama K, Arito M, Sato T, Iizuka N, Kurokawa MS, Okamoto K, Suematsu N, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Investigation of effects of angiotensin II (ATII) on human articular chondrocytes by proteomic approach (2013)
  • 著者名/発表者名: Endo W, Arito M, Sato T, Kurokawa MS, Okamoto K, Suematsu N, Omoteyama K, Beppu M, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Investigation of effects of Edaravone on human brain microvascular endothelial cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Onodera H, Arito M, Sato T, Kurokawa1 MS, Okamoto K, Suematsu N, Tanaka Y, Hashimoto T, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Proteomic analysis of whole glomeruli in patients with IgA nephropathy using micro-sieving (2013)
  • 著者名/発表者名: Kojima S, Koitabashi K, Iizuka N, Okamoto K, Arito M, Sato T, Kurokawa MS, Suematsu N, Yasuda T, Kimura K, Kato T
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] A peptide profile of amniotic fluid in a fetal lamb model of gastroschisis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohyama K, Sato T, Arito M, Iizuka N, Omoteyama K, Kurokawa MS, Okamoto K, Suematu N, Kitagawa H, Kato T.
  • 学会等名: HUPO2013
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] Protein profiles of peripheral blood mononuclear cells as a biomarker for Behcet’s Disease. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurokawa MS, Yoshioka T, Sato T, Nagai K, Iiduka N, Arito M, Takakuwa Y, Nakano H, Ooka S, Suematsu N, Okamoto K, Nakamura H, Suzuki N, Ozaki S, Kato T.
  • 学会等名: American College of Rheumatology. Annual meeting 13
  • 発表場所: San Diego）
  • 年月日: 20130914-20130918
• [学会発表] ANCA関連血管炎患者における好中球ミエロペルオキシダーゼの酸化修飾 (2013)
  • 著者名/発表者名: 永井宏平, 内田貞輔、高桑由希子、大岡正道、有戸光美、佐藤利行、黒川真奈絵、岡本一起、加藤智啓
  • 学会等名: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都市（京都国際会館）
  • 年月日: 20130418-20130420
• [学会発表] ベーチェット病患者の末梢血単核球に発現している蛋白質の網羅的解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 黒川真奈絵, 吉岡拓也、佐藤利行、永井宏平、飯塚進子、有戸光美、高桑由希子、中野弘雅、大岡正道、岡本一起、中村洋、鈴木登、尾崎承一、加藤智啓
  • 学会等名: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都市（京都国際会館）
  • 年月日: 20130418-20130420
• [学会発表] 関節リウマチにおける糖蛋白質の糖鎖構造の変異 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐藤利行, 高桑由希子、大岡正道、永井宏平、有戸光美、飯塚進子、黒川真奈絵、岡本一起、加藤智啓
  • 学会等名: 第57回日本リウマチ学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都市（京都国際会館）
  • 年月日: 20130418-20130420