肝癌幹細胞の細胞死回避機構の解析

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24790694
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 清水 聡 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (90623041)
• キーワード: 肝癌

研究概要

前年度に我々は転移性肝癌モデルマウスを用いて、5-FUの投与により腫瘍部のNK細胞活性化レセプターNKG2DのリガンドであるRae-1/H60の発現が上昇することを明らかにした。またaGalCerと5-FUにより併用治療実験を行ったところ、a-GalCer/5-FU併用治療群がa-GalCer単独もしくは5-FU単独治療と比較して治療効果が優れていた。今回我々は5-FU投与がMC38細胞に対するNK細胞傷害活性に与える影響について検討した。5-FU投与群のMC38細胞においてはNK細胞に対する感受性が亢進しており、その効果は抗Rae-1抗体もしくは抗H60抗体により減弱した。続いて転移性肝癌腫瘍モデルマウスを用いてNK細胞除去実験を行ったところ、NK細胞除去群においては5-FUの効果減弱が認められ、5-FUの効果への先天免疫の関与が示唆された。今回の我々の検討により5-FU治療時における先天免疫の関与が明らかとなり、a-GalCer/5-FU併用治療の可能性が示された。
前年度にソラフェニブが肝癌細胞に細胞死を誘導する機序としてネクロプトーシスの関与について検討し、ネクロプトーシス阻害剤添加もしくはネクロプトーシス関連分子であるRIPK1に対するsiRNAにより生細胞が増加することを明らかにした。今回我々はソラフェニブがネクロプトーシスへ与える影響について検討するため関連分子であるRIPK3の発現を検討した。ウェスタンブロット法によりRIPK3の蛋白発現量を検討したところ、ソラフェニブを添加後6時間よりRIPK3の発現上昇が認められた。mRNAの発現量についても検討したところ、ソラフェニブ添加後早期よりRIPK3 mRNAの発現上昇が認められた。今回の我々の検討により、ソラフェニブが肝癌細胞に細胞死を誘導する機序としてネクロプトーシスの関与が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Sorafenib enhances proteasome inhibitor-induced cell death via inactivation of Akt and stress-activated protein kinases. (2014)
  • 著者名/発表者名: Honma Y, Shimizu S, Takehara T, Harada M.
  • 雑誌名: J Gastroenterol. 巻: 49 ページ: 517-526
  • DOI: 10.1007/s00535-013-0796-z.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The combination therapy of α-galactosylceramide and 5-fluorouracil showed antitumor effect synergistically against liver tumor in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Aketa H, Tatsumi T, Kohga K, Tsunematsu H, Aono S, Shimizu S, Kodama T, Nawa T, Shigekawa M, Hikita H, Sakamori R, Hosui A, Miyagi T, Hiramatsu N, Kanto T, Hayashi N, Takehara T.
  • 雑誌名: Int J Cancer. 巻: 133 ページ: 1126-1134
  • DOI: 10.1002/ijc.28118.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Valine, the branched-chain amino acid, suppresses hepatitis C virus RNA replication but promotes infectious particle formation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishida H, Kato T, Takehana K, Tatsumi T, Hosui A, Nawa T, Kodama T, Shimizu S, Hikita H, Hiramatsu N, Kanto T, Hayashi N, Takehara T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 437 ページ: 127-133
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.06.051.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Carbamazepine promotes liver regeneration and survival in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi T, Kodama T, Hikita H, Tanaka S, Shigekawa M, Nawa T, Shimizu S, Li W, Miyagi T, Hiramatsu N, Tatsumi T, Takehara T.
  • 雑誌名: J Hepatol. 巻: 59 ページ: 1239-1245
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2013.07.018.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Bcl-2 homology domain 3 (BH3)-only proteins Bim and bid are functionally active and restrained by anti-apoptotic Bcl-2 family proteins in healthy liver. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kodama T, Hikita H, Kawaguchi T, Saito Y, Tanaka S, Shigekawa M, Shimizu S, Li W, Miyagi T, Kanto T, Hiramatsu N, Tatsumi T, Takehara T.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 288 ページ: 30009-30018
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.443093.
  • 査読あり
• [学会発表] Hepatitis C virus infection reduces chemo-sensitivity of the hepatocellular carcinoma cells through enhancing cancer stem cell characters. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takatoshi Nawa, Tomohide Tatsumi, Akira Nishio, Seiichi Tawara, Yoshiki Ohnishi, Satoshi Aono, Satoshi Shimizu, Hayato Hikita, Ryotaro Sakamori, Takuya Miyagi, Naoki Hiramatsu, Tetsuo Takehara
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the American Association for the study of Liver Disease.
  • 発表場所: Washington D.C.
  • 年月日: 20131102-20131105
• [学会発表] 大腸癌細胞のp53欠損は間質細胞進展に寄与する (2013)
  • 著者名/発表者名: 林義人、辻井正彦、赤坂智史、重川稔、清水聡、疋田隼人、阪森亮太郎、新崎信一郎、宮城琢也、巽智秀、竹原徹郎
  • 学会等名: 第72回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] Ras経路が活性化されている進行肝細胞癌におけるSTAT3シグナルの意義 (2013)
  • 著者名/発表者名: 重川稔、疋田隼人、巽智秀、齋藤義修、清水聡、林義人、阪森亮太郎、宮城琢也、辻井正彦、竹原徹郎
  • 学会等名: 第72回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20131003-20131005
• [学会発表] 肝細胞癌におけるCD26分子発現の意義 (2013)
  • 著者名/発表者名: 川口司、疋田隼人、巽智秀、田中聡司、青野悟志、向井香織、清水 聡、宮城琢也、友國晃、永野浩昭、土岐祐一郎、森 正樹、竹原徹郎
  • 学会等名: 第４９回肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130606-20130607
• [学会発表] 進行肝細胞癌においてSTAT3シグナルは有用な治療ターゲットとなりうる (2013)
  • 著者名/発表者名: 重川稔、疋田隼人、巽智秀、岩橋潔、池澤賢治、清水聡、阪森亮太郎、宮城琢也、平松直樹、竹原徹郎
  • 学会等名: 第４９回肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130606-20130607