抗糸球体上皮細胞抗体の同定とその障害機序の解明

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24790852
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 長濱 清隆 横浜市立大学, 医学部, 助教 (00336538)
• キーワード: 糸球体上皮細胞 / ネフリン / 自己抗体 / SLE

研究概要

血中自己抗体の測定を行うため、小麦胚芽を用いた無細胞タンパク質合成技術を用いてマウスinteglin β1の組換えタンパク質の作製を行った。この組換え蛋白質を利用して、western blottingを施行したところ、モデルマウス血中においてintegrin β1と反応するIgGの存在が明らかであった。また組換え蛋白質を用いたELISA測定系を行ったところ、western blottingと同様、脾細胞移入後2週目よりモデルマウス群血中に抗intagrin β1抗体が有意差を持って出現し、4週目をpeakとし以降漸減することを明らかにした。
抗体価がpeakとなる脾細胞移入後4週目のモデルマウスおよびコントロールマウスの腎凍結切片を用いて蛍光免疫染色を施行し共焦点レーザー顕微鏡にて観察したところ、モデルマウス腎臓にはintegrin β1とIgGがcolocalizeしていることが明らかであった。一方、コントロールマウスではIgGの沈着は認めなかった。
蛋白尿出現の機序は糸球体上皮細胞がその一因と考えられている。抗integrin β1抗体による糸球体上皮細胞障害の機序を明らかにするため、不死化細胞株の樹立にしばしば利用されるImmortomouseより腎糸球体上皮細胞を単離し、不死化条件にて培養を行い不死化型糸球体上皮細胞株の細胞株の樹立に成功した。
今後、ヒトSLE患者検体を用いて血中抗integrin β1抗体の有無、および腎予後との相関について検討を行う予定である。また、糸球体上皮細胞株に対して抗integrin β1抗体を作用させることで糸球体上皮細胞障害の機序の解明を行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Rituximab treatment for adult purpura nephritis with nephrotic syndrome (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishiguro, H. Hashimoto, T. Akata, M. Suzuki, S. Azushima, K. Kobayashi, Y. Kanaoka, T. Yoshida, S. Wakui, H. Oshikawa, J. Nagahama, K. Inayama, Y. Tamura, K. Toya, Y. Umemura, S.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 52 ページ: 1079-1083
  • DOI: DN/JST.JSTAGE/internalmedicine/52.9325
  • 査読あり
• [雑誌論文] A case of synchronous mucinous metaplasia and neoplasia of the female genital tract without an STK11 or KRAS mutation (2013)
  • 著者名/発表者名: Nagahama, K. Yamanaka, S. Nakayama, T. Tokinaga, A. Asai-Sato, M. Miyagi, E. Tanaka, R. Furuya, M.
  • 雑誌名: Gynecol Oncol Case Rep. 巻: 5 ページ: 4-5
  • DOI: 10.1016/j.gynor.2013.02.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relapsing proliferative glomerulonephritis with monoclonal IgG deposits showing circumferential crescentic glomerulonephritis (2013)
  • 著者名/発表者名: Oshio, M. Fujii, T. Kusaura, T. Nagahama, K.
  • 雑誌名: Clinical Kidney Journal 巻: 6 ページ: 635-638
  • DOI: 10.1093/ckj/sft121
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced angiotensin receptor-associated protein in renal tubule suppresses angiotensin-dependent hypertension (2013)
  • 著者名/発表者名: Wakui, H. Tamura, K. Masuda, S. Tsurumi-Ikeya, Y. Fujita, M. Maeda, A. Ohsawa, M. Azushima, K. Uneda, K. Matsuda, M. Kitamura, K. Uchida, S. Toya, Y. Kobori, H. Nagahama, K. Yamashita, A. Umemura, S.
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 61 ページ: 1203-1210
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.111.00572
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biopsy-proven drug-induced tubulointerstitial nephritis in a patient with acute kidney injury and alcoholic severe acute pancreatitis (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka, W. Mori, T. Nagahama, K. Tamura, T.
  • 雑誌名: BMJ Case Reports 巻: 3 ページ: 1-4
  • DOI: 10.1136/bcr-2013-008557
  • 査読あり
• [学会発表] SLEモデルマウスにはintegrin β1に対する自己抗体が存在する
  • 著者名/発表者名: 長濱清隆, 古屋充子, 山中正二, 長嶋洋治, 青木一郎.
  • 学会等名: 第56回日本腎臓学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（東京都千代田区）
• [図書] 臨床腎臓内科学 (2013)
  • 著者名/発表者名: 長濱 清隆
  • 総ページ数: 356-365
  • 出版者: 南山堂