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2013 年度 実施状況報告書

色素性乾皮症A群患者の神経障害に及ぼす酸化的DNA損傷サイクロプリンの役割

研究課題

研究課題/領域番号 24790895
研究機関奈良県立医科大学

研究代表者

岩本 顕聡  奈良県立医科大学, 医学部, 研究員 (20448773)

キーワード酸化的DNA損傷サイクロプリン / 色素性乾皮症 / ヌクレオチド除去修復 / 神経障害
研究概要

色素性乾皮症A群(XP-A)は常染色体劣性遺伝病で、ヌクレオチド除去修復(NER)を欠損する。症状の中でも、知能低下や運動失調など進行性の神経障害の発症機序は不明で、内因性のNER型DNA損傷の神経細胞への蓄積が神経障害発症の原因であると考えられ、最有力候補は酸化的DNA損傷サイクロプリンである。そこで、我々はサイクロプリン特異的モノクローナル抗体(CdA-1)を駆使して、この損傷が神経障害の発症に関係しているかを明らかにする。
本年度において、CdA-1のより詳細な性能解析を行った。その結果、(5'S)-cyclo-dAだけでなく、異性体の(5'R)-cyclo-dAにも強く結合し、正常DNA、紫外線照射DNA、AAF-DNAおよび8-oxo-dA、cyclo-dGに結合しないことがわかった。また、裸のDNAに銅イオン200μM、アスコルビン酸16mM、過酸化水素1.6mMを最大24時間処理することで、(5'S)-cyclo-dAや(5'R)-cyclo-dAが濃度依存的に最大10<5>塩基中70個まで増加することがわかった。この実験系を基に、正常細胞に銅イオン500μM、アスコルビン酸40mM、過酸化水素4mMを加え、37℃、3時間処理し、ゲノムDNA中にサイクロプリンを誘発させELISAで検出を試みた。その結果、検出感度を下回っているためか、検出には至らなかった(現ELISAの検出限界:10<5>塩基中1個)。
XP-Aマウスは、NERを欠損しているため、加齢とともにサイクロプリンを蓄積していくと考えられる。そこで、種々の年齢のXP-Aマウスの臓器(肝臓、腎臓、精巣、脳)中のサイクロプリン量の測定を試みる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

細胞におけるサイクロプリン誘発法が、まだ確立されていない。

今後の研究の推進方策

XP-Aマウスは、NERを欠損しているため、加齢とともにサイクロプリンを蓄積していくと考えられる。そこで、種々の年齢のXP-Aマウスの臓器(肝臓、腎臓、精巣、脳)中のサイクロプリン量の測定を試みる。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Quantitative and in situ detection of oxidatively generated DNA damage 8,5'-cyclo-2'-deoxyadenosine using an immunoassay with a novel monoclonal antibody2014

    • 著者名/発表者名
      T. Iwamoto, P.J. Brooks, T. Nishiwaki, K. Nishimura, N. Kobayashi, S. Sugiura and T. Mori
    • 雑誌名

      Photochem. Photobiol.

      巻: 90 ページ: 829-836

    • DOI

      10.1111/php.12239.

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Quantitative and in situ detection of oxidatively generated DNA damage 8,5'-cyclo-2'-deoxyadenosine using an immunoassay with a novel monoclonal antibody2014

    • 著者名/発表者名
      T. Iwamoto, P.J. Brooks, N. Kobayashi, S. Sugiura and T. Mori
    • 学会等名
      International symposiumon xeroderma pigmentosum and related diseases: Disorders of DNA damage response-Bench to bedside-
    • 発表場所
      Kobe
    • 年月日
      20140305-20140307

URL: 

公開日: 2015-05-28  

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