キメラ抗原レセプターを遺伝子導入したリンパ球細胞の作成方法の至適化

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24790969
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 寺倉 精太郎 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (40625141)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: キメラ抗原レセプター / 遺伝子導入T細胞療法 / CD8陽性Tリンパ球 / Tリンパ球

研究実績の概要

1.同種の細胞を用いた系における改良 CMV pp65/IE-1抗原に対するoverlapping peptideを用いて検討を行ったが、ひとつひとつのpeptideに対する反応は弱かった。良好な反応を得るため、あらかじめdominantな反応を惹起するようなpeptideを選択して実験を行った。培養系の検討としてIL-2/IL-15/IL-21などのサイトカインの至適組み合わせについて検討した。その結果IL-2/IL-21の組み合わせが良好であった。
2.自家の細胞を用いた系における改良 手持ちのCD19-CARの細胞内ドメインの至適化とその評価: 評価にあたって刺激後のCAR-T細胞の分泌するInterferon-gamma/Interleukin-2などを測定した。細胞内シグナルを細胞レベルで見るにあたって細胞内リン酸化タンパクの染色を行った。
3．CD19CAR発現の薬剤によるコントロール　薬剤を用いて自由にCD19CARの発現をコントロールするため、tet-on systemを用いて検討を行った。ドキシサイクリンを投与することによってCD19CARの発現をコントロールすることが出来た。発現のkineticsについて、SUPT1に遺伝子導入して検討した。また、発現したCD19CARが機能的な分子であるのかどうか、細胞傷害活性・サイトカイン産生能・刺激後の分裂能などについてさらにこのシステムの検討を進める必要があると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Target antigen density governs the efficacy of anti-CD20-CD28-CD3 ζ chimeric antigen receptor-modified effector CD8+ T cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watanabe K, Terakura S, Martens AC, van Meerten T, Uchiyama S, Imai M, Sakemura R, Goto T, Hanajiri R, Imahashi N, Shimada K, Tomita A, Kiyoi H, Nishida T, Naoe T, Murata M.
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 194 ページ: 911-920
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1402346.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simple and efficient generation of virus-specific T cells for adoptive therapy using anti-4-1BB antibody. (2015)
  • 著者名/発表者名: Imahashi N, Nishida T, Goto T, Terakura S, Watanabe K, Hanajiri R, Sakemura R, Imai M, Kiyoi H, Naoe T, Murata M.
  • 雑誌名: Journal of Immunotherapy 巻: 38 ページ: 62-70
  • DOI: 10.1097/CJI.0000000000000069.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chimerism status after unrelated donor bone marrow transplantation with fludarabine-melphalan conditioning is affected by the melphalan dose and is predictive of relapse. (2015)
  • 著者名/発表者名: Imahashi N, Ohashi H, Terakura S, Miyao K, Sakemura R, Kato T, Sawa M, Yokohata E, Kurahashi S, Ozawa Y, Nishida T, Kiyoi H, Watamoto K, Kohno A, Kasai M, Kato C, Iida H, Naoe T, Miyamura K, Murata M
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: - ページ: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Successful unrelated cord blood transplantation for adult acquired aplastic anemia using reduced intensity conditioning without ATG. (2014)
  • 著者名/発表者名: Terakura S, Nishida T, Inamoto Y, Ohashi H, Naoe T, Murata M.
  • 雑誌名: Immunology Letters 巻: 60 ページ: 99-101
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2014.01.013.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dexamethasone palmitate ameliorates macrophages-rich graft-versus-host disease by inhibiting macrophage functions. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishiwaki S, Nakayama T, Murata M, Nishida T, Terakura S, Saito S, Kato T, Mizuno H, Imahashi N, Seto A, Ozawa Y, Miyamura K, Ito M, Takeshita K, Kato H, Toyokuni S, Nagao K, Ueda R, Naoe T.
  • 雑誌名: Plos One 巻: 9 ページ: e96252
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0096252. eCollection 2014.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Comparison of cord blood transplantation with unrelated bone marrow transplantation in patients older than fifty years. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka M, Miyamura K, Terakura S, Imai K, Uchida N, Ago H, Sakura T, Eto T, Ohashi K, Fukuda T, Taniguchi S, Mori S, Nagamura-Inoue T, Atsuta Y, Okamoto S.
  • 雑誌名: Biol Blood Marrow Transplant. 巻: 21 ページ: 517-525
  • DOI: 10.1016/j.bbmt.2014.11.685.
  • 査読あり
• [学会発表] 40-55歳に対するリン酸フルダラビンとメルファランを前処置とした非血縁間骨髄移植の有用性 (2015)
  • 著者名/発表者名: 渡邊慶介、澤正史、河野彰夫、飯田浩充、内田俊樹、大西康、大橋春彦、熱田由子、鈴木律朗、寺倉精太郎、西田徹也、村田誠、宮村耕一、森下 剛久
  • 学会等名: 第37回日本造血細胞移植学会総会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-03-05 – 2015-03-07
• [学会発表] 非血縁骨髄移植後のキメリズム状態は前治療強度に影響され、再発の予測因子となりうる (2015)
  • 著者名/発表者名: 寺倉精太郎、今橋伸彦、大橋春彦、宮尾康太郎、酒村玲央奈、澤正史、横畠恵美、倉橋信悟、小澤幸泰、西田徹也、清井仁、綿本浩一、河野彰夫、笠井雅信、加藤千明、飯田浩充、宮村耕一、村田誠
  • 学会等名: 第37回日本造血細胞移植学会総会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-03-05 – 2015-03-07
• [学会発表] Excessively High-Affinity Single-Chain Fragment Variable Region in a Chimeric Antigen Receptor Can Counteract T-Cell Proliferation (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe K, Terakura S, Uchiyama S, Martens AC, van Meerten T, Nishida T, Naoe T, Kiyoi H, Murata M
  • 学会等名: 第56回米国血液学会
  • 発表場所: サンフランシスコ、米国
  • 年月日: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [学会発表] Comparison of outcomes of unrelated BM and CB transplants in young adult leukemia patients. An Updated Results of Japanese Registration Data (2014)
  • 著者名/発表者名: Terakura S, Atsuta Y, Tsukada N, Kobayashi T, Tanaka M, Kanda J, Ohashi K, Fukuda T, Uchida N, Takahashi S, Nagamura-Inoue T, Morishima Y, Miyamura K
  • 学会等名: 第56回米国血液学会
  • 発表場所: サンフランシスコ、米国
  • 年月日: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [学会発表] Comparison of unrelated bone marrow and umbilical cord blood transplants in young adult leukemia (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺倉精太郎、熱田由子、塚田信弘、小林武、田中正嗣、諫田淳也、大橋一輝、福田隆浩、内田直之、高橋聡、長村登紀子、森島泰雄、宮村耕一
  • 学会等名: 第76回日本血液学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場（大阪府大阪市）
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] Anti-CD20 chimeric antigen receptor+ T cells can recognize remarkably low target antigen expression (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡邊慶介、寺倉精太郎、内山進、今井美沙、酒村玲央奈、後藤辰徳、葉名尻良、島田和之、西田徹也、直江知樹、冨田章裕、清井仁、村田誠
  • 学会等名: 第76回日本血液学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場（大阪府大阪市）
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] キメラ抗原レセプター遺伝子導入T細胞を用いた細胞治療の今後 (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺倉精太郎
  • 学会等名: 第63回日本輸血・細胞治療学会東海支部例会
  • 発表場所: 名古屋第一赤十字病院（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2014-09-20
  • 招待講演
• [学会発表] キメラ抗原受容体単鎖抗体部分の強すぎる親和性は抗原刺激後のT細胞増殖を阻害する (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡邊慶介、寺倉精太郎、今井美沙、酒村玲央奈、後藤辰徳、葉名尻良、今橋伸彦、島田和之、冨田章裕、西田徹也、村田誠、清井仁
  • 学会等名: 第6回血液疾患免疫療法研究会学術集会
  • 発表場所: 京都国際会議場（京都府京都市）
  • 年月日: 2014-09-06