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2012 年度 実施状況報告書

自然発症関節炎モデルにおける関節炎惹起性CD4T細胞の認識する自己抗原の同定

研究課題

研究課題/領域番号 24790996
研究種目

若手研究(B)

研究機関京都大学

研究代表者

伊藤 能永  京都大学, 再生医科学研究所, 助教 (60614013)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
キーワード自己抗原
研究概要

自己免疫性関節炎を起こすSKGマウスの、関節炎惹起性TCRとその認識抗原に関して、解析を行っている。
平成24年度の成果としては、関節炎惹起性TCRを発現するハイブリドーマを確立し、そのTCRが認識する自己抗原をスクリーニングする方法を確立した。具体的には、ハイブリドーマと抗原提示細胞の共培養系に、抗原の候補となる蛋白質を加えて24時間培養し、その上清を回収する。その上清中のIL-2濃度をELISAで測定することで、ハイブリドーマが活性化したかどうかを確認することができる。
さらに、このスクリーニング法を用いて、SKGマウスの関節炎罹患関節から樹立した滑膜細胞から調整した細胞破砕液中に、抗原の候補となる蛋白質が含まれることを明らかにした。さらに抗原を絞り込むために、現在その細胞破砕液から抗原の含まれる分画を抽出しようとしている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成24年度の研究計画に記載していた通り、関節炎惹起性抗原スクリーニングシステムの確立と、抗原の候補蛋白質を含む細胞破砕液の同定は完了した。
現在、抗原同定のためのスクリーニングを精力的に行っている。

今後の研究の推進方策

研究計画書に記載していたように、今後は、抗原の候補蛋白質を含む細胞破砕液の分画化を進め、各々の分画に抗原が含まれているかどうかを検討する。
また、自己抗体を利用した抗原同定も同時に試みる。

次年度の研究費の使用計画

次年度の研究費は、上記の生化学的、細胞分子生物学的実験を遂行するために必要な消耗品を購入することに主に使用する。
学会参加費や、論文発表時にも適宜使用する。

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公開日: 2014-07-24  

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