| 研究課題/領域番号 |
24791402
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
木下 淳 金沢大学, 医学系, 協力研究員 (90584855)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| キーワード | EMT / HPMC / PSK |
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| 研究概要 |
近年、悪性腫瘍の浸潤、転移、線維化にEMTが重要な役割をはたしている事が明らかになった。これまで癌細胞側のEMTに関する報告は多いが、転移側のホスト細胞のEMT誘導に注目した報告はまれである。このホスト細胞のEMT誘導も転移成立における重要な要素であり、さらには癌間質の線維化にも深く関与する事が推察される。研究初年度である平成24年度は、胃癌細胞と腹膜転移のホスト細胞である腹膜中皮細胞(HPMC)を用い、細胞間相互作用によるEMT誘導を検証し、さらに代表的なBRM製剤のひとつであるPSKによる抗TGF-β作用に着目しEMT誘導の抑制効果の有無を in vitroにおいて以下の項目に関し研究を行った。
【研究①】TGF-β処理による胃癌細胞とHPMCのEMT誘導とPSKのTGF-β/Smad経路に対する阻害作用に関する研究
HPMCにTGF-β10 ng/mlを投与した結果、紡錘様の形態変化を呈し、E-cadの発現低下,α-SMA の発現亢進などのEMT様変化を呈した。これにPSK 100～500μg/mlを添加すると用量依存性に紡錘形への形態変化から敷石状となり、上記EMT markerの発現変化は抑制された。
【研究②】胃癌細胞株とHPMCの共培養によるEMTの誘導と、PSKによる抑制効果に関する研究
HPMCをMKN-45と共培養した結果、E-cadなどの上皮系マーカーの発現減弱、α-SMAなどの間葉系マーカーの発現亢進を認め、細胞間相互作用によるEMT誘導が確認された。また、共培養によるHPMCのEMT markerの発現変化はPSK500μg/mlの添加により抑制される事が証明された。PSKはsmad2 のリン酸化を阻害することで-βのシグナル伝達系をブロックし、EMT誘導を抑制する可能性が示唆され、現在検討中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
初年度は【研究①】TGF-β処理による胃癌細胞とHPMCのEMT誘導とPSKのTGF-β/Smad経路に対する阻害作用に関する研究、【研究②】胃癌細胞株とHPMCの共培養によるEMTの誘導と、PSKによる抑制効果に関する研究、に関して検討を行った。
実験成果は先述の如くであり、MKN-45とHPMCの共培養の結果誘導されたEMTにおけるTGF-β/Smad経路に対してPSKが与える影響に関して、現在検討中である。
当初、初年度に予定していた【研究3】TGF-β添加によるHPMC、胃癌細胞の浸潤能の亢進にPSKが与える影響、に関しても現在検討中であるが、実験系が確立し、手技が安定したため次年度において検証可能であると考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成24年度は昨年度の研究成果を学会発表する。同時にin vitroで得られたデータをもとに胃癌細胞とHPMCを同時移植させたマウス線維化皮下腫瘍モデルを用い、in vivoにおいてPSKのEMT抑制効果を検証すると共に、癌間質の抗線維化作用の有無を評価する。
また、胃癌細胞におけるEMT誘導と抗癌剤耐性獲得の関連性に関して検討し、PSKによって耐性解除が誘導されるかを研究し、それらの成果を、国内外の学会や論文で発表予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
次年度の研究費使用については当初の計画から変更はない。
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