| 研究課題/領域番号 |
24791406
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
山田 豪 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (30467287)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| キーワード | 一塩基多型 / 膵癌 / IPMN / VEGF |
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| 研究概要 |
VEGF SNPとしては、Talar-Wojnarowska Rらの報告した、「C-460T」と「G+405C」を検索することとし（J Physiol Pharmacol. 2010）、Restriction fragment-length polymorphism（RFLP）法により行った。まずは、膵癌細胞株と膵良性腫瘍細胞株を使用し、これらのVEGF SNPをRFLP法により調べた。
次に、膵癌（約100例）およびIPMN（約20例）、同時に良性疾患（胆石症、慢性膵炎、膵嚢胞など約10例）の切除標本よりDNAを抽出した。これらのDNAを用い、同様にVEGFに関するジェノタイピングを行った。
VEGF SNPと膵癌及びIPMNの臨床病理学的因子、予後との相関に関して解析を行った。これまで、膵癌約100例による解析を行ったが、まだ症例数が十分ではないため、臨床病理学的因子や生存成績との差は認められていない。今後、症例を蓄積することにより、再度解析を試みる予定である。
IPMN症例に関しては、組織学的分類をHE染色にて行った。今後、これらのデータを利用して解析をする予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
膵癌、IPMN及びコントロールにおけるFFPEからのDNA抽出を開始しているが、抽出されたDNAの精度が不安視されたため、その確認作業に時間を要している。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続き、切除標本のFFPEからのDNA抽出を続け、当初計画した症例数までVEGFのジェノタイピングを行う。
次に、膵癌、IPMNおよび良性疾患の凍結標本から、RNeasy Mini Kit（QIAGEN）によりRNAの抽出を行い、これらからcDNAを作成した後、real-time PCR法により組織レベルでのVEGF発現を調べる。さらに、血清を使用することにより、Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）法にて血中でのVEGFレベルも測定する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
基本的には消耗品による使用となる。膵癌、IPMN、良性腫瘍の検体のFFPEからのDNA抽出、凍結標本からのRNA抽出、また、ジェノタイピングを行い、組織および血中のVEGFレベルを測定する予定である。従って、各種キットや試薬だけでなく、実験器具などの消耗品が必要となる。
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