研究概要 |
消化器癌の切除標本および術前後や再発時の患者血清を用いて, 膵癌における HMGB-1 の役割を明らかにすることを目的に,免疫染色, Real-time PCR, フロー サイトメトリーなどの種々の免疫学的・分子生物学的手法により, HMGB-1 に関連する獲得免疫機構の全容を解明すべく包括的に解析を開始している. 現在,膵癌の切除標本を用いたHMGB-1 の免疫染色を開始しているが,安定した免疫染色を施行するに至っていない.そのため,染色に用いる一次,二次抗体の変更,さらには,染色条件の変更など詳細にわたり,再検討を行っているところである.結果として,膵癌切除検体を用いたHMGB-1 発現と予後, 再発形式, 臨床病理学的因子との関連が評価できるに至っていない,また,ヒト膵癌細胞株 ( PANC-1, MIAPaCa-2 ) におけるHMGB-1 発現の有無の検討においても,RT-PCR, Western blot の手法を用いて,開始しているところであるが,発現の多寡に比較的大きなばらつきが生じており,発現の有無を評価するに至っていない.そのため,膵癌細胞株を用い行うsiRNA の手法を用いたHMGB-1 knock down による研究は進行しておらず,よって,免疫不全マウス(SCID マウス等)に皮下移植し, in vivoにおけるHMGB-1 knock down による抗腫瘍効果を経時的に比較することは施行できていない.しかしながら,膵癌標本,膵癌細胞株において,HMGB-1の発現確認が安定して可能となった際には,速やかに,次実験に移行可能な状況を準備している.
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