| 研究実績の概要 |
平成24年度は、EGFR変異肺癌細胞株PC9, H1975, H3255, KRAS変異肺癌細胞株H358, A549, PIK3CA変異肺癌細胞株H460, AKT活性化を示さない肺癌細胞株H1299, H838の8株を使用して、2種類のHsp90阻害剤 (17-DMAG, NVP-AUY922) に対してHsp90阻害剤単独・放射線単独・両者の併用による抗腫瘍効果をMTSアッセイ・コロニーフォーメーションアッセイで評価し、放射線増感作用および非増感作用を示す細胞株群の同定を行った。
平成25年度は、EGFR変異肺癌細胞株HCC827, PC-9と、それぞれより作成したEGFRチロシンキナーゼ阻害剤 (gefitinib) に対する耐性株 (HCC827-GRmet, HCC827-GRstem, PC-9-GRt790m) を用いてHsp90阻害剤NVP-AUY922の抗腫瘍効果を、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤耐性株とその親株との差に注目して評価し、さらに放射線療法との併用による抗腫瘍効果も検討した。Hsp90阻害剤は耐性株 (HCC827-GRmet, PC-9-GRt790m) においても抗腫瘍効果を示し放射線増感作用も認めたが、癌幹細胞様の性質を持った耐性株 (HCC827-GRstem) においては抗腫瘍効果・放射線増感作用ともに乏しかった。
最終年度では、Hsp90阻害剤単独治療群・放射線単独治療群・併用療法群について、腫瘍細胞におけるDNA修復能を評価した。具体的には、ヒストン蛋白gamma-H2AXのリン酸化を免疫染色により評価した。HCC827およびHCC827-GRmetでは併用療法群で腫瘍細胞におけるDNA修復能の低下を認めたが、HCC-827-GRstemではDNA修復能の低下を認めなかった。また、Hsp90阻害剤の抗腫瘍効果を、細胞周期にも注目して検討した。HCC827およびHCC827-GRmetでは併用療法群でG2/M arrestを認めたが、HCC-827-GRstemでは認めなかった。
以上の結果を踏まえ、研究成果をOncology Reports誌に投稿し、掲載された (Hashida and Yamamoto et al. Oncol Rep 2015 33:1499-1504) 。
|
