| 研究課題/領域番号 |
24791621
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| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
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研究代表者 |
丹下 和晃 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (70405471)
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| キーワード | トラマドール / フローサイトメトリー |
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| 研究概要 |
敗血症における低血圧は、体血管のアデノシン三リン酸感受性カリウム（KATP）チャネルの活性化や過剰発現によって引き起こされる。また、トラマドールはKATPチャネルを介する血管拡張反応を阻害する作用を有するとされる。よって今回我々は、トラマドールが敗血症による血管拡張反応を抑制し、さらには炎症性サイトカインの産生を抑制するという仮説を立て、敗血症モデルラットを用い検討することを目的とした。方法として、初年度は、まず、CLP敗血症モデルラットにおけるモルヒネおよびトラマドールの循環動態に対する影響を検討することを目標とした。
Wistar雄性ラットをハロセン麻酔下およびトラマドール（0.03-0.3mg/kg）あるいはモルヒネ（0.3-3mg/kg）腹腔内投与下に開腹し、CLPを施行するCLP群と盲腸をmanupirationするコントロール群を作成し、閉腹する。モルヒネあるいはトラマドールは3時間おきに同量の投与を繰り返す。開腹手術後、6時間、12時間、24時間、48時間で動脈血採血とノルエピネフリン（1µg/kg）を行い血圧変化を記録する。途中で死亡した場合は、経過時間を記録する。採取した血液は、フローサイトメトリー法（BDTM Cytometric Beads Array）を用いて、インターフェロン（IFN）γ、インターロイキン（IL）-1α、IL-4、IL-6、IL-10、およびTNFを測定して各群間で比較し、敗血症モデルの確立、および敗血症に及ぼすモルヒネとトラマドールの作用を検証するつもりであった。
しかし、初年度に引き続き昨年度も、方法論の中心となるフローサイトメトリー法の習得に時間を要してしまっている状況であった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
フローサイトメトリーの操作、技術の習得に予想以上に時間を要しているためと思われる。対策として、勉強会や技術習得のための講習会には積極的に参加している。
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| 今後の研究の推進方策 |
フローサイトメトリー法を習得できれば、初年度の目標に沿って、敗血症モデルの確立や、モルヒネおよびトラマドールの影響を検討していく方針である。もし、今後もフローサイトメトリー法の習得が難しい状況であれば、他の方法論である等尺性張力変化やreal
time PCRなどを検討する予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
当初の予定通り研究が進行しておらず、必要な実験器具、試薬を購入する過程まで至らなかったため。
実験動物の購入費や、各研究の試薬などに使用する予定である。
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