| 研究課題/領域番号 |
24791774
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
花本 敦 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (20625917)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| キーワード | ガレクチン３ |
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| 研究概要 |
頭頸部癌の培養細胞株を入手し継続して培養できる環境が整った。培養細胞株を用いて、ウェスタンブロット、免疫染色、フローサイトメトリー、が可能となった。さらには細胞周期アッセイや増殖アッセイ等も可能となった。頭頸部癌の組織切片にての免疫染色ができるシステムを構築した。現在ジェントルマックスを用い、組織を単離化する手技を現在構築中である。現段階では頭頸部扁平上皮癌の単離化は困難であり、この理由としては細胞間の結合力が扁平上皮癌では他癌種と比較して強いのではないかと推察される。アクターゼ等を用いて今後の条件設定の最適化を検討中である。この手技が確立すれば腫瘍組織からの浸潤リンパ球のポジティブセレクションも容易になると推察される。今後はガレクチンー３発現による腫瘍の免疫回避を調べるため、以下の検討を行う予定である。生理的な濃度のガレクチンー３がリンパ球のアポトーシスを誘導するか否か末梢血より採取したリンパ球を用いて検討を行う。実際の腫瘍組織におけるガレクチンー３と腫瘍浸潤リンパ球の関連を調べるため、パラフィン包埋標本を用いて、免疫染色などにより検討を行う。ガレクチンー３の腫瘍浸潤リンパ球の機能への影響を調べるため、腫瘍組織から分離したリンパ球をガレクチンー３のアンタゴニストで処理し、機能の変化を調べる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
頭頸部癌の細胞株の入手でき、また実験手技の確立等が一年間でかなり進んだと考える。２５年度は更なる実験の進行が期待できると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後はジェントルマックスを用いた単離化の手技を確立し、腫瘍からのリンパ球をポジティブセレクション行い、それらとガレクチン－３で更なる研究を進めていく。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
各種抗体、免疫染色用試薬、アポトーシス解析用試薬、細胞培養用の試薬、消耗品、リンパ球機能測定用試薬に使用予定としている。
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