| 研究概要 |
本研究においては、癌細胞に対し局所的炭酸ガス投与を行い、細胞内ミトコンドリア量を増加させ、ミトコンドリアのアポトーシス経路を活性化させることにより、癌細胞のアポトーシスへの誘導を証明、解析することを目的とした。
in vivoでの検討で、ヒト口腔扁平上皮癌由来細胞（HSC-3）を継代培養し、Nude Mouse背部に皮下移植した。CO2実験群とコントロール群に分け、開発したCO2吸収ゲルとCO2投与装置を用いて、週2回、投与時間20分で経皮的CO2投与を開始、移植28日後まで各回の腫瘍
体積を評価した。実験終了後、腫瘍を採取した。採取した組織よりRNA、タンパク質抽出を行い、Real-time PCR法、Western blot法を用いて、ミトコンドリア経路のアポトーシスの解析の解析を行った。また凍結組織切片を作製し、組織学的解析として、各染色を行った。
コントロール群と比較し、炭酸ガス投与群において、腫瘍体積の増殖抑制効果が認められ、ミトコンドリア経路のアポトーシス関連因子の上昇、転移抑制因子の減少を認めており、解析中である。また腋下リンパ節の転移数減少が認められた。
Real-time PCR法を用い、CO2投与群において、PGC-1αおよびTFAMの有意な遺伝子発現増加、ミトコンドリア数の増加傾向を認めた。Western blot法で、Caspase-3, -9, PARPすべてにおいて、CO2群での蛋白レベルの増加を確認した。
in vivoにおける炭酸ガス投与による、ミトコンドリア経路を介した癌細胞の増殖抑制および転移抑制効果が証明されつつある。
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