| 研究課題/領域番号 |
24792233
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
松村 香織 九州大学, 大学病院, 医員 (20615794)
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| 研究期間 (年度) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| キーワード | 国際情報交換 |
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| 研究概要 |
1. 口蓋癒合に関わる遺伝子のスクリーニング：口蓋突起癒合前 (E13.5) のC57BL/6J マウスの口蓋突起より total RNA を抽出した。二本鎖cDNAの合成を行い、MouseWG-6 Expression Beadchips (illmina社) へハイブリダイゼーション後、データスキャンしマイクロアレイのデータ解析を行った。
2. 標的遺伝子の設定：口蓋突起挙上時期に特異的に発現する遺伝子のうち、口蓋突起挙上前後で発現量の変動が大きい複数の遺伝子を標的遺伝子として設定した。FGFシグナル下流に存在する転写因子などの分子にターゲットを絞っている。
3. 標的遺伝子の口蓋における発現量確認：定量的real-time PCR にて口蓋癒合時期のターゲット遺伝子のmRNAレベルでの発現量確認を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
標的遺伝子候補が複数あり、絞り込みに時間を要したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
・ 標的遺伝子の機能阻害実験
ターゲット遺伝子の口蓋間葉細胞における役割について検討するため、ターゲット遺伝子のsiRNAを添加して細胞培養を行い、細胞増殖実験、TUNEL染色、アネキシンV染色などにより口蓋突起挙上への関与が報告されている細胞増殖やアポトーシスの観点から観察する。
・ 標的遺伝子KOマウスの表現型解析
標的遺伝子の口蓋癒合への直接的な関与が示唆される場合はKOマウスの口蓋表現型を解析する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
主にマウス購入費、細胞増殖実験や口蓋器官培養に必要な試薬類に使用する予定である。
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