Ｐｔｆ１ａ遺伝子改変マウスを用いた視床下部の発生および機能の解析

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24800088
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 藤山 知之 筑波大学, 分子行動科学研究コア, 研究員 (00635089)
• 研究期間 (年度): 2012-08-31 – 2014-03-31
• キーワード: 視床下部 / 神経発生 / 遺伝学 / エネルギーバランス / マウス / Ptf1a / Nkx2.1 / GnRH

研究概要

視床下部の発生機構の解明、およびこれまでに知られていない視床下部神経細胞の機能の解明を研究目的として実験を行った。平成２５年度の研究実績として、引き続きPtf1a遺伝子発現細胞系譜を標識し分子マーカー等を用いてその形質を解析し、Ptf1aノックアウトで発現が変化する遺伝子群について調べた。また、Ptf1a完全欠失アリル（Ptf1a Δ）を用いて新たにコンディショナルノックアウトマウス（cKO）を作成したところ、これまで観察されていた表現型とは若干異なることがわかった。具体的な遺伝子型は、従来のものがPtf1a flox/yfp; Nkx2.1-creで、新たに作成したものがPtf1a flox/Δ; Nkx2.1-creである。Ptf1a yfp/+; Nkx2.1-creの遺伝子型においても野生型とは異なる表現型がみられたため、今後は新たに作成したcKOを用いて解析することにする。これまでに確認された表現型としては、①雌雄ともに不妊（雄で外性器発達不全、停留睾丸、雌で子宮発育不全）、②雌で体重増加（雄では変化無し，高脂肪食飼育下でも同様）、③エネルギーバランスについては、雌雄ともに摂食量（Food intake）に変化は無く、暗期に活動量（Locomotor activity）が低下していた。総酸素消費量（O2 consumption）については機材のセットアップ中であるため、これから解析を行う。おそらく、雌雄ともに基礎的なエネルギー消費が低下していると考えられる。また今後は、最近の神経科学的手法として脚光を浴びている光遺伝学（Optogenetics）、薬理遺伝学（Pharmacogenetics）を用いるためのPtf1a遺伝子改変マウスを作成したので、これらのマウスを用いてPtf1a遺伝子発現細胞系譜が持つ機能についても解析していく予定である。

現在までの達成度 (区分)

理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Temporal identity transition from Purkinje cell progenitors to GABAergic interneuron progenitors in the cerebellum. (2014)
  • 著者名/発表者名: Seto Y, Nakatani T, Masuyama N, Taya S, Kumai M, Minaki Y, Hamaguchi A, Inoue YU, Inoue T, Miyashita S, Fujiyama T, Yamada M, Chapman H, Campbell K, Magnuson MA, Wright CV, Kawaguchi Y, Ikenaka K, Takebayashi H, Ishiwata S, Ono Y, Hoshino M
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 5 ページ: -
  • DOI: 10.1038/ncomms4337.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Atoh1 directs hair cell differentiation and survival in the late embryonic mouse inner ear. (2013)
  • 著者名/発表者名: Chonko KT, Jahan I, Stone J, Wright MC, Fujiyama T, Hoshino M, Fritzsch B, Maricich SM
  • 雑誌名: Developmental Biology 巻: 381(2) ページ: 401-410
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2013.06.022.
  • 査読あり
• [学会発表] A genetic analysis of hypothalamic development and function by using Ptf1a-genetically modified mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujiyama T, Nagaoka M, Kumanogoh H, Hayase Y, Funato H, Yanagisawa M, Tanaka T, Imura A, Yanagawa Y, Magnuson MA, Wright CVE, Obata K, Nabeshima Y, Hoshino M
  • 学会等名: 43th Annual Meeting of the Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 20131109-20131113
• [備考] 病態生化学研究部 研究業績リスト
  • URL: http://www.ncnp.go.jp/nin/guide/r_diag/Publications.html