研究概要 |
これまでの研究によって、我々は歯髄中に歯髄幹細胞と呼ばれる多能性を有した細胞が存在していることを明らかにしてきた。その中で、歯髄幹細胞株(SP細胞)を血小板由来増殖因子(PDGF-BB)で刺激することによってオリゴデンドロサイトマーカーであるPlp-1やolig2のmRNAの発現が有意に誘導されることがわかり、PDGFに着目したオリゴデンドロサイトへの分化誘導メカニズムの解析を本研究の目的とした。 これまでに、PDGF-AAでSP細胞を刺激すると象牙芽細胞の分化マーカーであるDSPPのmRNAの発現が上昇し、一方でPDGF-BBで刺激するとオリゴデンドロサイトマーカー遺伝子の発現は上昇するが、DSPP、ALP、osterix、Runx2のmRNAの発現は減少することが明らかとなった。さらに、PDGF-BBにより前処理した細胞ではBMP2によるDSPPのmRNAの発現上昇を抑制していることが明らかとなった。 ウェスタンブブロット法を用いて、PDGF受容体下のシグナル伝達経路を解析したところ、PDGF-AAでp38のリン酸化が強く誘導される一方で、PDGF-BBで刺激した場合にはERK1/2、p38、Aktが強くリン酸化されることが明らかになった。さらには、PDGF-BBはBMP2によるsmad5のリン酸化を抑制することが明らかになった。 PDGF-BB により前処理した細胞では, BMP2 による象牙芽細胞分化促進を抑制し, それはsmad5 のリン酸化促進の抑制によることが示唆され、分化マーカーの発現の違いと合わせて、PDGF-BBが、象牙芽細胞ではなくオリゴデンドロサイト分化に関与している可能性が考えられた。
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