ＮＬＲＰ３モザイクによる疾患発症、炎症波及機序の解明

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 24890096
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 井澤 和司 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 医員 (90634931)
• 研究期間 (年度): 2012-08-31 – 2014-03-31
• キーワード: 自己炎症性疾患 / サイトカイン

研究概要

自己炎症性疾患であるCINCA症候群は、発熱、蕁麻疹様発疹、慢性髄膜炎、感音難聴などの症状を呈する。NLRP3遺伝子の機能獲得型変異によって産生される過剰なIL-1βが疾患発症に関連していると考えられている。常染色体優性遺伝形式をとるが、de novoの変異もおおい。ヘテロ変異を認めない患者の約7割はモザイク変異により発症するが、その一部は低頻度の体細胞モザイクによって発症すると考えられる。しかしながら、低頻度のモザイクによる疾患発症機序は不明である。そのため、我々は単細胞培養系を用いたサイトカイン測定により、その発症機序を解明することを目指した。まずは健常者の血液から単球を分離し、LPS、ATP刺激を行い単細胞から分泌されるIL-1βをリアルタイムで測定することができた。また単球はLPS、ATP刺激により細胞死を起こしやすいことがしられているが、リアルタイム測定により細胞死(loss of membrane integrity)直後に、IL-1β放出がおこることが確認された ("Real-time single-cell imaging of protein secretion" 　2014年Scientific Reports)。
また健常者、NLRP3ヘテロ患者、NLRP3モザイク患者の単球におけるIL-1βの測定も現在、進行中であるが、体細胞モザイクにおける変異陽性細胞は、変異陰性細胞より、過剰なIL-1βを産生すると考えられる。
ノックマウスによる解析を行うことはできなかった。

現在までの達成度 (区分)

理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Real-time single-cell imaging of protein secretion (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Shirasaki, Mai Yamagishi, Nobutake Suzuki, Kazushi Izawa, Asahi Nakahara, Jun Mizuno, Shuichi Shoji, Toshio Heike, Yoshie Harada Ryuta Nishikomori, and Osamu Ohara
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 未定 ページ: 未定
  • 査読あり
• [雑誌論文] Somatic NLRP3 mosaicism in Muckle-Wells syndrome. A genetic mechanism shared by different phenotypes of cryopyrin-associated periodic syndromes. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa K, Gonzalez-Roca E, Souto A, Kawai T, Umebayashi H, Campistol JM, Canellas J, Takei S, Kobayashi N, Callejas-Rubio JL, Ortego-Centeno N, Ruiz-Ortiz E, Rius F, Anton J, Iglesias E, Jimenez-Trevino S, Vargas C, Fernandez-Martin J, Calvo I, Hernandez-Rodriguez J, Mendez M, Dordal MT et al.
  • 雑誌名: Annals of the Rheumatic Diseases 巻: 未定 ページ: 未定
  • 査読あり
• [学会発表] Real-time single-cell imaging of IL-1β secretion by Inflammasomes (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Shirasaki, Mai Yamagishi, Kazushi Izawa, Hirotsugu Oda, Toshio Heike, Ryuta Nishikomori, Osamu Ohara
  • 学会等名: Gene Expression&Signaling in the Immune System meeting
  • 発表場所: New York
  • 年月日: 20140422-20140426