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2012 年度 実績報告書

口腔内細菌菌体破砕物及び外傷性咬合の歯周ポケット形成への関与の検討

研究課題

研究課題/領域番号 24890169
研究種目

研究活動スタート支援

研究機関長崎大学

研究代表者

藏本 明子  長崎大学, 大学病院, 医員 (30631478)

研究期間 (年度) 2012-08-31 – 2014-03-31
キーワード歯周炎 / アタッチメントロス / 免疫複合体 / 外傷性咬合
研究概要

LPSを用いたラット歯周炎モデルに外傷性咬合を付与した実験を行った。1)LPSによる歯周炎誘発と咬合性外傷誘発 LPSで免疫感作後、LPSを歯肉溝へ滴下し、同時に臼歯部咬合面に過高なinlayを装着することで外傷性咬合を与えた。その後屠殺し、組織標本を作製して病理組織学的検討を行い、外傷性咬合と歯周組織破壊の関係を検討した。H.E.染色切Jを用いて、セメントエナメル境(CEJ)から接合上皮の根面に接した歯冠側端までの距離をattachment lossとして計測した。また、破骨細胞の同定のため、各群の切片を用いてTRAP染色を行った切片にて、歯槽骨頂部から500 μmの骨面上に存在する多核のTRAP陽性細胞を、破骨細胞として計測した。免疫複合体検出のために、免疫複合体に最初に結合する補体成分であるC1の免疫組織化学的染色を行い、その局在部位を観察した。2)血清抗LPS IgG抗体レベル測定(ELISA法) 眼窩下静脈叢から血液サンプルを得た。血清中の抗LPS IgG抗体レベルは各々の血清サンプルを用いてELISA法により測定した。
S. a.およびA. a.による歯周炎誘導実験を行った。1)細菌培養 S. a.培養:37℃で嫌気的に24時間培養した。 A. a.培養:37℃で嫌気的に24時間培養した。これらのS. a.および A. a.を遠心心分離して凍結乾燥した。2)A. a.およびS. a.による歯周炎誘発 A. a.およびS. a.の菌体破砕物で免疫感作後、A. a.およびS. a.を歯肉溝へ滴下し、歯周炎を誘発した。組織標本を用いてattachment lossを計測した。2)血清抗S. a.およびA. a. IgG抗体レベル測定(ELISA法) 眼窩下静脈叢から血液サンプル中の抗S. a.およびA. a. IgG抗体レベルをELISA法により測定した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

免疫複合体形成の確認のための実験結果を分析した結果、期待した差異が対象間で見られなかったため、使用する抗体のスクリーニング及び実験条件の検討が必要となった。現在この問題は解決している。

今後の研究の推進方策

追加として線維性コラーゲンの観察を行う予定である。また、細菌による歯周炎誘発モデルに咬合性外傷を誘発させる予定である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Gram-positive bacteria as an antigen topically applied into gingival sulcus of immunized rat accelerates periodontal destruction2013

    • 著者名/発表者名
      Nagano, F., Kaneko, T., Yoshinaga, Y.,  Ukai, T., Kuramoto, A.,, Nakatsu, S., Oshino, K., Ichimura, I., Hara, Y.
    • 雑誌名

      J Periodontal Res

      巻: 4 ページ: 420-427

    • DOI

      10.1111/jre.12021

    • 査読あり
  • [学会発表] occlusal trauma accelerates attachment loss at the onset of experimental periodontitis2012

    • 著者名/発表者名
      中津晋、吉永泰周、藏本明子、長野史子、鵜飼孝、市村育久、押野一志、吉村篤利、矢納義高、原宜興
    • 学会等名
      10th asian pacific society of periodontology meeting
    • 発表場所
      奈良県奈良市 奈良県新公会堂
    • 年月日
      20120903-20120904
  • [学会発表] 咬合性外傷は実験的歯周炎の開始期におけるアタッチメントロスを誘導する

    • 著者名/発表者名
      中津晋、吉永泰周、藏本明子、長野史子、市村育久、押野一志、矢納義高、原宜興
    • 学会等名
      日本歯周病学会九州五大学 日本臨床歯周病学会九州支部合同研修会
    • 発表場所
      福岡県福岡市 アクロス福岡
  • [学会発表] ラットにおけるグラム陽性細菌の感作および歯肉溝内滴下は歯周組織破壊を促進する

    • 著者名/発表者名
      長野史子、金子高士、吉永泰周、鵜飼孝、藏本明子、高森雄三、野口惠司、原宜興
    • 学会等名
      第5回口腔環境制御研究カテゴリー集会
    • 発表場所
      長崎県長崎市 長崎大学医学部ポンペ会館

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公開日: 2015-05-28  

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