炎症性疾患を重篤化させるＨＭＧＢ１－ＩＬ‐１β複合体の形成様式と立体構造の解明

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 24890263
• 研究種目: 研究活動スタート支援
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 大阪大学 (2013); 武蔵野大学 (2012)
• 研究代表者: 杉木 俊彦 大阪大学, たんぱく質研究所, 助教 (70635698)
• 研究期間 (年度): 2012-08-31 – 2014-03-31
• キーワード: 構造生物学 / HMGB

研究概要

HMGB1は転写補助因子として核内で機能するが、ネクローシスなどによって細胞外に漏出すると周囲の細胞に炎症性応答を惹起する。この炎症性応答は、HMGB1が炎症性サイトカインIL-1βと結合するとさらに憎悪し、自己免疫疾患などの重篤化の一因となる。本課題はHMGB1とIL-1βの相互作用様式を分子レベルで解明することを目的とした。
組換えHMGB1タンパク質と組換えIL-1βタンパク質の大腸菌発現系での大量発現に成功した。各種クロマトグラフィーにより両タンパク質を高純度に精製することに成功した。精製したHMGB1およびIL-1β組換えタンパク質の結合親和性を蛍光偏光解消度測定法により解析した。

研究成果

• [雑誌論文] Perdeuteration and methyl-selective (1)H,(13)C-labeling by using a Kluyveromyces lactis expression system (2013)
  • 著者名/発表者名: Mayumi Miyazawa-Onami, Koh Takeuchi, Toshiaki Takano, Toshihiko Sugiki, Ichio Shimada, Hideo Takahashi
  • 雑誌名: J.Biomol.NMR 巻: 57 ページ: 297-304
  • DOI: 10.1007%2Fs10858-013-9789-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Site-specific aspartic acid isomerization regulates self-assembly and neurotoxicity of amyloid-β (2013)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Sugiki, Naoki Utsunomiya-Tate
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun 巻: 441 ページ: 493-498
  • URL: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0006291X13017658
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for the Golgi association by the pleckstrin homology domain of the ceramide trafficking protein (CERT) (2012)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Sugiki, Koh Takeuchi, Toshiyuki Yamaji
  • 雑誌名: J.Biol.Chem 巻: 287 ページ: 33706-33718
  • URL: http://www.jbc.org/content/287/40/33706.long
  • 査読あり
• [学会発表] HMGBタンパク質の立体構造形成とDNA結合機構に関する研究 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉木俊彦
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-29
• [学会発表] HMGBタンパク質の立体構造形成の分子基盤に関する構造化学的解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉木俊彦
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-15