スーパーエンハンサー標的抗癌治療に対する耐性獲得機構の解明とそれに基づく新規戦略

2024 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 24K22193
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 清島 保 九州大学, 歯学研究院, 教授 (20264054)
• 研究分担者: 自見 英治郎 九州大学, 歯学研究院, 教授 (40276598) ; 藤井 慎介 九州大学, 歯学研究院, 准教授 (60452786) ; 長谷川 佳那 九州大学, 大学病院, 助教 (30793989) ; 田尻 祐大 九州大学, 歯学研究院, 共同研究員 (30820659)
• 研究期間 (年度): 2024-06-28 – 2027-03-31
• キーワード: 口腔扁平上皮癌（OSCC） / スーパーエンハンサー（SE） / BETファミリー蛋白 / BET阻害剤 / 耐性獲得 / 細胞死

研究実績の概要

スーパーエンハンサー（SE）は強力なエンハンサー領域で、BETファミリー蛋白が”epigenetic reader”として働き、口腔扁平上皮癌（OSCC）の形質に影響する複数の因子を引き寄せて複合体を形成し、癌幹細胞の自己複製制御、癌化や転移を促進する。SCCには最初化学療法に反応するが、その後薬剤耐性を獲得し、再発し死に至る例がある。従って、OSCCの新規治療法の開発が求められ、治療標的や癌幹細胞排除の点からSE制御薬、特にBET阻害剤の応用が注目されている。また、我々が解析を進めているOSCCの形質に影響するTP63、YAP1やNF-κBp65などもSE複合体に関与し大変興味深い。
本研究では、SE制御薬の抗癌作用機序の解明に加え、SE標的治療に対する耐性を獲得したOSCC細胞株を樹立し、その形質解析に基づいた治療耐性獲得機構の解明を行う。そして、複数因子を同時に標的とする、マルチターゲット型新規治療法の開発の足掛かりとする。令和6年度は予定していた”I. BET阻害剤耐性OSCC細胞株の樹立”の開始に当たり、以下の研究結果を得た。
薬剤剤耐性OSCC細胞株を樹立するため、まずは複数のBET阻害剤によるOSCC細胞株細胞の細胞生存率検定を行うこととした。複数のOSCC細胞株における適正な播種細胞数の確認を行い、BET阻害剤の溶媒による影響についても確認を行った。その上で、使用予定のBET阻害剤の濃度依存的および計時的にOSCC細胞株に細胞死が誘導されることを確認した。また、各濃度における細胞形態変化も併せて確認した。新規購入細胞株を用いて再現性を確認する。

現在までの達成度

3: やや遅れている

理由

計画した実験を展開中に使用予定の細胞株の感染疑いが発覚し、感染の疑われた細胞株の廃棄および細胞培養の再開に合わせて、複数回の感染有無の確認を行うことにより多大な時間を要した。
また、研究分担者の海外研修があり、それによる業務等の再分担と研究計画の調整を行い、研究の遅れを取り戻すよう努める。

今後の研究の推進方策

BET阻害剤による複数のOSCC細胞株の細胞生存率の検索を踏まえて、予定通り実験計画”II.OSCC細胞株におけるBET制御シグナル伝達ネットワークの同定”の着手に入る。
作業担当を調整し並行して、遅れている実験計画”I. BET阻害剤耐性OSCC細胞株の樹立”を進めることとしている。

次年度使用額が生じた理由

使用細胞株への病原性微生物の感染疑いのため、培養細胞株の感染有無の確認と細胞培養の再開に多大な時間を要したため、予定していた薬剤抵抗性細胞株樹立実験が延期となった。薬剤耐性細胞株の樹立のためには長期細胞培養を要するため、予定期間中の細胞培養用試薬、細胞数計測用の試薬および阻害剤の購入等に充てる予定である。また、細胞株の新規購入し、再現性の確認を行う。

研究成果

• [国際共同研究] University of Turku/Abo Akademi University/Turku University Hospital(フィンランド)
  • 国名: フィンランド
  • 外国機関名: University of Turku/Abo Akademi University/Turku University Hospital
• [国際共同研究] University of MP-HCMC(ベトナム)
  • 国名: ベトナム
  • 外国機関名: University of MP-HCMC
• [雑誌論文] Oral metastatic tumor (renal cell carcinoma) in maxillary gingiva: A case report and systematic review (2025)
  • 著者名/発表者名: Nakako Yusuke、Fujimoto Tatsufumi、Wada Hiroko、Yoshihama Naoya、Kami Yukiko、Fujii Shinsuke、Kohashi Kenichi、Kumamaru Wataru、Chikui Toru、Moriyama Masafumi、Kiyoshima Tamotsu
  • 雑誌名: Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, Medicine, and Pathology 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.ajoms.2025.01.004
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Image findings and pathological findings of lymphoepithelial cysts with hyper internal echo?a comparison with dermoid cysts (2025)
  • 著者名/発表者名: Yasaka Misa、Okamura Kazutoshi、Shimizu Mayumi、Sagiyama Koji、Kiyoshima Tamotsu、Kawano Shintaro、Moriyama Masafumi、Chikui Toru
  • 雑誌名: Oral Radiology 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s11282-025-00818-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Imaging findings in a case of primary intraosseous carcinoma arising from a mandibular cyst (2024)
  • 著者名/発表者名: Kami Yukiko、Chikui Toru、Fujii Shinsuke、Fujimoto Tatsufumi、Kumamaru Wataru、Hasegawa Kana、Nakamatsu Koji、Okamura Kazutoshi、Yasaka Misa、Kiyoshima Tamotsu、Yoshiura Kazunori
  • 雑誌名: Oral Radiology 巻: 41 ページ: 302～309
  • DOI: 10.1007/s11282-024-00788-w
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of Serine 536 of p65(RelA) Downregulates Inflammatory Responses (2024)
  • 著者名/発表者名: Aoki Tsukasa、Gao Jing、Li Aonan、Huang Fei、Tu Yiran、Wu Wei、Matsuda Miho、Kiyoshima Tamotsu、Nishimura Fusanori、Jimi Eijiro
  • 雑誌名: Inflammation 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s10753-024-02140-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wnt/β-catenin-YAP axis in the pathogenesis of primary intraosseous carcinoma NOS, deriving from odontogenic keratocyst (2024)
  • 著者名/発表者名: Nakako Yusuke、Hasegawa Kana、Fujii Shinsuke、Kami Yukiko、Sakamoto Taiki、Sakamoto Mizuki、Moriyama Masafumi、Kurppa Kari J.、Heikinheimo Kristiina、Yoshiura Kazunori、Kawano Shintaro、Kiyoshima Tamotsu
  • 雑誌名: Pathology - Research and Practice 巻: 260 ページ: 155420～155420
  • DOI: 10.1016/j.prp.2024.155420
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Elucidation of the mechanism to promote tumorigenesis of adenoid cystic carcinoma: A cancer-neuro interaction (2025)
  • 著者名/発表者名: Tatsufumi Fujimoto, Shinsuke Fujii, Tamotsu Kiyoshima
  • 学会等名: Kyudai Oral Bioscience, OBT Research Center & DDR Research Center 8th Joint International Symposium 2024
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Multistep activation of p63 and the MEK/ERK induces ARL4C expression to promote oral squamous cell carcinoma cell proliferation (2025)
  • 著者名/発表者名: Dania Alkhatib, Shinsuke Fujii, Tamotsu Kiyoshima
  • 学会等名: Kyudai Oral Bioscience, OBT Research Center & DDR Research Center 8th Joint International Symposium 2024
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] The oral tumor-stromal interaction in the induction of jaw bone destruction (2025)
  • 著者名/発表者名: Shinsuke Fujii, Tamotsu Kiyoshima
  • 学会等名: Kyudai Oral Bioscience, OBT Research Center & DDR Research Center 8th Joint International Symposium 2024
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Oligoclonally-expanded cytotoxic T cells and activated MKI67+B cells are potential drivers of IgG4-related disease (2025)
  • 著者名/発表者名: Risako Koga, Takashi Maehara, Ryuichi Aoyagi1, Ryusuke Munemura, Yuka Murakami, Atsushi Doi, Michihito Kono, Hidetaka Yamamoto, Hiroaki Niiro, Tamotsu Kiyoshima, Mika Tanabe, Toshiaki Nakano, Yuta Matsukuma, Mitsuhiro Kawano, John H. Stone, Shiv Pillai, Shintaro Kawano, Seiji Nakamura
  • 学会等名: Kyudai Oral Bioscience, OBT Research Center & DDR Research Center 8th Joint International Symposium 2024
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Wnt/β-cateninによるYAPシグナルの活性化が原発性骨内癌の病因に関与する (2024)
  • 著者名/発表者名: 長谷川 佳那、藤井 慎介、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] 腺様嚢胞癌における神経浸潤を促進するシグナル伝達の同定とその機能解析 (2024)
  • 著者名/発表者名: 藤井 慎介、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] 口腔病理診断が先行した腎由来口腔転移性悪性腫瘍の１例と口腔転移性悪性腫瘍の文献的比較検討 (2024)
  • 著者名/発表者名: 藤本 龍史、仲子 勇祐、和田 裕子、藤井 慎介、森山 雅文、川野 真太郎、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] The involvement of Arl4c in tooth germ development (2024)
  • 著者名/発表者名: TRUONG THI KIM THINH、藤井 慎介、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] p63 and the MEK/ERK pathway induces the expression of ARL4C to promote oral squamous cell carcinoma cell proliferation (2024)
  • 著者名/発表者名: アルカティブ ダニヤ、藤井 慎介、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] IL-1β-p65シグナルはTGF-βシグナルの抑制により歯根嚢胞における裏装上皮の細胞増殖を促す (2024)
  • 著者名/発表者名: 仲子 勇祐、藤井 慎介、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会
• [学会発表] 歯の発生におけるメカノセンサー Piezo1 のエナメル質形成への影響 (2024)
  • 著者名/発表者名: 和田 裕子、城戸 瑞穂、清島 保
  • 学会等名: 第66回歯科基礎医学会学術大会