研究課題
1.膜交通の可視化による選別分子機構の解明:主に酵母を材料に用い,さらに高性能化した超解像共焦点ライブイメージング顕微鏡(SCLIM)を駆使して次のような研究を進めた。(1) ゴルジ体槽成熟の分子機構:積荷マーカーと同時に小胞体,ゴルジ体マーカーを発現する株で,積荷タンパク質が分泌経路を進んでいく過程を詳細に調べ,輸送装置の変異体等を用いてそのメカニズムを探った。可視化マーカーを増やし,超解像4D解析(高分解能3D + 高速ライブ)による解析を進め,異なる槽間で積荷が受け渡されていることを可視化した。(2) 小胞体からゴルジ体シス槽を形成する分子機構:小胞体のCOPII小胞出芽部位(ERES)とゴルジ体cis槽マーカーのhug & kissアクションをさらに解析し,積荷選別の理解を深めた。(3) ポストゴルジ交通網:トランスゴルジ網の可視化を進め,異なる因子が時空間的に異なるゾーンで機能することを明らかにした。(4) 共焦点レーザー顕微鏡の改良開発:次世代機SCLIM-IIで,高速超解像観察の実証実験をさらに進めた。2.植物における膜交通の研究:植物の利点を生かした研究を進めると同時に,膜交通が組織,個体レベルでの高次機能で果たす役割の理解を目指した。(1) Rab5 GTPaseをツールとした植物膜交通の研究: 2種のRab5の機能分担とクロストークを明らかにするために,それぞれの相互作用分子の解析をさらに進めた。(2) 植物のゴルジ体とトランスゴルジ網(TGN)が担う膜交通の制御:SCLIMを用い,タンパク質の選別輸送におけるTGNゾーンの挙動を調べ,異なる積荷が異なるゾーンに選別されることを明らかにした。(3) 細胞極性形成と維持:シロイヌナズナに存在するミオシンXIとミオシンVIIIの膜交通における役割について,ライブイメージングによる研究をさらに進めた。
29年度が最終年度であるため、記入しない。
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