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2016 年度 研究成果報告書

人工制限酵素を用いたゲノム編集技術の開発とその応用

研究課題

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研究課題/領域番号 25250014
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 実験動物学
研究機関大阪大学

研究代表者

伊川 正人  大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (20304066)

連携研究者 磯谷 綾子  奈良先端科学技術大学院大学, 准教授 (20444523)
藤原 祥高  大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (70578848)
宮田 治彦  大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (50604732)
佐藤 裕公  大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (40545571)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
キーワードゲノム編集 / 生殖不全 / 遺伝子破壊 / 点変異 / ES細胞
研究成果の概要

本研究課題では、ZFNやTALENに代わる新しい遺伝子改変技術であるCRISPR/Cas9システムを用いてマウス個体レベルでのゲノム編集技術を確立した。まずpCAG-EGxxFPプラスミドを作製し、EGFP蛍光を指標に培養細胞内でのDNA切断効率を判定する系を確立した。次に、標的配列を認識するgRNAとDNA切断するCAS9酵素を発現するプラスミドを受精卵に注入し、両者を一過性に発現させることで、約半数の子孫で遺伝子破壊マウスを作製できる系を確立した。さらにゲノム編集したES細胞を用いたキメラ解析などが実用的であることを示した。

自由記述の分野

実験動物学

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公開日: 2018-03-22  

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