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2014 年度 実績報告書

RNAi依存性ヘテロクロマチンシステムと核膜による遺伝子発現調節機構

研究課題

研究課題/領域番号 25250022
研究機関北海道大学

研究代表者

村上 洋太  北海道大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (20260622)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワードクロマチン制御 / エピジェネティクス / 核膜 / ヘテロクロマチン / 分裂酵母
研究実績の概要

本研究では当初分裂酵母のRNAi依存性ヘテロクロマチンと核膜の関係について、我々が同定した核膜局在を示すRNAi因子Dsh1を中心に解析をする予定であった。しかし、Dsh1の発現量の低さと可溶化の難しさから、解析が難航している。一方、これと平行して既知の3種の核膜蛋白質(Lem2, Man1, Ima1)に着目して、ヘテロクロマチンとの関連について解析を始めた。その結果Lem2の欠損によりセントロメアヘテロクロマチンにおいてヘテロクロマチンを規定するヒストン修飾のヒストンH3K9のメチル化が大きく減少する事を見いだした。またLem2はセントロメアヘテロクロマチンには局在しないが、そのすぐ近傍のキネトコア形成領域に局在することを発見した。従来、ヘテロクロマチンが核膜直下に局在することが普遍的に見いだされており、分裂酵母でもセントロメアヘテロクロマチンは核膜直下に存在する。興味深いことにLem2破壊株ではセントロメアヘテロクロマチンが核膜から内側に優位に移動することを見いだした。ヘテロクロマチンの核膜局在の意義については不明であったが、この発見はヘテロクロマチン形成に核膜が(あるいは核膜タンパク質が)積極的に関与する可能性を示している。今後RNAiとの関連をふくめLem2の解析を積極的にすすめる計画である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

本申請の解析の鍵となるタンパク質であるDsh1が技術的理由から解析が難しく、そのラインでの解析の進展が遅れている。しかし、平行しておこなった核膜タンパク質とヘテロクロマチンの関係の解析から核膜Lem2がヘテロクロマチン形成に関与する事を示す結果が得られた。今後はこのLem2の解析を中心におこなう。

今後の研究の推進方策

核膜タンパク質Lem2のセントロメアヘテロクロマチンの関係について集中して解析をおこなう。特にRNAi依存性ヘテロクロマチンとの関係を明らかにする。また、Lem2のヘテロクロマチンの機能が、栄養条件のような環境の変化により変化する事を示唆する予備的結果が得られているので、この点について特に集中して解析を進める。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 謝辞記載あり 1件)

  • [雑誌論文] A Novel Method for Purification of the Endogenously Expressed Fission Yeast Set2 Complex.2014

    • 著者名/発表者名
      45.Suzuki, S., Nagao K., Obuse C., Murakami Y. and Takahata S.
    • 雑誌名

      Protein Expression

      巻: 97 ページ: 44-49

    • DOI

      10.1016/j.pep.2014.02.005

    • 査読あり / 謝辞記載あり

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公開日: 2017-01-06  

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